烏鱧p65基因克隆及表達(dá)分析

摘要 為探究烏鱧p65基因在機(jī)體中免疫應(yīng)答的作用，本研究克隆烏鱧p65基因（Cap65）的開放閱讀框（ORF），推導(dǎo)Cap65序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析，利用熒光定量PCR（qRT-PCR）分析其在各組織的分布及諾卡氏菌感染后的表達(dá)模式，探究p65基因在魚類免疫應(yīng)答中的作用機(jī)制，為研究該基因在魚類免疫上的作用提供參考。

關(guān)鍵詞 烏鱧；p65；組織分布；免疫應(yīng)答

中圖分類號(hào) S917.4；S9-9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

文章編號(hào) 1007-7731（2023）21-0067-06

魚類諾卡氏菌病是由諾卡氏菌引起，該致病菌廣泛分布于水中，主要感染魚類的脾臟、肝臟、體腎和頭腎，并在免疫器官表面形成白色結(jié)節(jié)[1]。20世紀(jì)60年代，學(xué)者從海水魚紅大麻哈魚中分離鑒定了星狀諾卡氏菌（Nocardia asteroides）[2]。迄今為止，在多種魚類中相繼分離到諾卡氏菌，諾卡氏菌主要分為3種不同類型，分別是星狀諾卡氏菌（N. asteroides）[3]、殺鮭諾卡氏菌（N. salmonicida）[4]和鰤?mèng)~諾卡氏菌（N. seriolae）[5]。其中鰤?mèng)~諾卡氏菌（N. seriolae）是一種革蘭氏陽性分支絲狀菌，為魚類諾卡氏菌病的主要病原。現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)，鰤?mèng)~諾卡氏菌是一種條件致病菌，只有適合條件下才會(huì)感染魚類[1]。該菌可以通過魚鰓或傷口感染魚體，其發(fā)病周期長(zhǎng)，感染率和死亡率均較高，給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)帶來了極大經(jīng)濟(jì)損失[6]。

烏鱧（Channa argus），隸屬于鱧科鱧屬，又叫烏魚、俗稱黑魚，具有較高的藥用價(jià)值，同時(shí)其肉味鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富，深受消費(fèi)者熱愛[7]，在我國廣東、安徽和福建等地區(qū)廣泛養(yǎng)殖。烏鱧性格兇猛、喜集群、好斗，經(jīng)常出現(xiàn)皮膚潰爛的情況，易感染諾卡氏菌。研究發(fā)現(xiàn)，烏鱧感染諾卡氏菌后，前期出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍、食欲下降、體表潰瘍等癥狀，后期在其鰓絲或內(nèi)臟組織中形成白色結(jié)節(jié)，易導(dǎo)致其大量死亡[1]。……