MicroRNA-155/Nrf2對(duì)體外培養(yǎng)雪旺細(xì)胞增殖和遷移的影響及作用機(jī)制*

趙飛，姚忠軍，曹洪，朱必濤，張彌

（1.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院 骨2科，湖北 十堰 442000；2.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬人民醫(yī)院創(chuàng)傷骨科，湖北 十堰 442000；3.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院 皮膚科，湖北 十堰 442000）

坐骨神經(jīng)慢性卡壓損傷是臨床上較常見的周圍神經(jīng)損傷，易致組織破壞和痛覺過敏[1-2]。研究發(fā)現(xiàn)，雪旺細(xì)胞是周圍神經(jīng)系統(tǒng)中特有的膠質(zhì)細(xì)胞，在周圍神經(jīng)損傷后促進(jìn)神經(jīng)自發(fā)再生[3-5]。神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子可促進(jìn)神經(jīng)再生，但該因子在臨床應(yīng)用上受到限制[6]。因此，迫切需要尋找新的方法保護(hù)雪旺細(xì)胞并提高其增殖、遷移等功能，促進(jìn)神經(jīng)再生，對(duì)治療坐骨神經(jīng)慢性卡壓損傷等周圍神經(jīng)損傷具有重要意義。miRNA 是一類小的內(nèi)源性非編碼RNA，在周圍神經(jīng)損傷后表達(dá)失調(diào)，并影響雪旺細(xì)胞表型[7-8]。有研究顯示，miR-155 在坐骨神經(jīng)慢性卡壓損傷大鼠中高表達(dá)，抑制其表達(dá)可緩解神經(jīng)損傷引起的痛感和炎癥反應(yīng)[9-10]。然而，miR-155 在雪旺細(xì)胞中的功能與機(jī)制尚不明確。生物信息學(xué)在線工具starBase 預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn)核因子E2 相關(guān)因子2（Nrf2）可能是miR-155 的下游靶標(biāo)，Nrf2 與細(xì)胞的增殖、遷移密切相關(guān)。神經(jīng)生長(zhǎng)因子（Ngf）、層粘連蛋白（Laminin）是介導(dǎo)細(xì)胞增殖和遷移的關(guān)鍵成分，但miR-155 是否靶向Nrf2 調(diào)控Ngf 和Laminin 表達(dá)，介導(dǎo)雪旺細(xì)胞增殖、遷移仍不清楚。故本研究以體外培養(yǎng)的雪旺細(xì)胞作為研究對(duì)象，進(jìn)一步探討miR-155 對(duì)雪旺細(xì)胞增殖、遷移的調(diào)控作用與潛在機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞和材料

大鼠雪旺細(xì)胞（RSC96，中國(guó)科學(xué)院細(xì)胞庫），DMEM 培養(yǎng)基、胎牛血清（美國(guó)Gibco 公司），RNA 提取試劑……