高效液相色譜法測定與比較5種不同提取方法提取的茶葉咖啡因

吳以龍，王康，武增才，稅再坤，字成庭2，*

（1.云南農業大學食品科學技術學院，云南 昆明 650201；2.云南農業大學普洱茶學教育部重點實驗室，云南 昆明 650201；3.云南農業大學理學院，云南 昆明 650201）

近年來，越來越多的研究證明咖啡因具有興奮心臟、骨骼肌和中樞神經系統、抗氧化、舒張血管、松弛平滑肌等生理作用[1-4]，廣泛存在于瓜拿納、馬黛茶、咖啡樹、茶樹、可樂樹、代茶冬青樹和可可樹的葉片和果實中[5-6]。茶葉是咖啡因的主要來源之一，茶葉中咖啡因的含量占干物質的2%～5%，咖啡因是茶葉中重要的功能成分[7-8]。

咖啡因作為一種傳統的中樞神經系統興奮劑，是世界上應用較為廣泛的精神類藥物，日常生活中的茶葉、咖啡、可可飲料、巧克力以及一些軟飲料等食品中均含有咖啡因[9-10]，其獲取方法主要是從天然作物中進行提取或人工合成[11-14]。從茶葉中提取咖啡因的常用方法有醇提法、水提法、超臨界二氧化碳流體提取法、微波輻射法、恒壓滴液漏斗代替索氏提取器提取法等[15]，但這些提取方法的提取率和純度普遍偏低。目前測定咖啡因提取物純度的方法較多，有薄層色譜法[16-18]、紫外分光光度法[17]和高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）法[19]等。薄層色譜法是一種微量分離方法，其分離速度較快，但存在無法定量和重現性不好等問題。紫外分光光度法利用了咖啡因結構中嘌呤環具有共軛雙鍵體系并能產生獨特吸收光譜的特點，但紫外分光光度法容易受到提取物中其他嘌呤堿的干擾，較純咖啡因的測定才可用紫外分光光度法[20]。……