IL-6、IL-8、IL-18、VEGF診斷活動性肺結核的價值

陳玉芊，王世軍，王 欣，徐修禮

1.西安區域醫學檢驗中心，陜西西安 710116；2.蘭州市肺科醫院檢驗科，甘肅蘭州 730046；3.甘肅省人民醫院檢驗中心，甘肅蘭州 730013

肺結核已經成為導致全球人類死亡的十大常見病因之一[1]，保守估計每年因該病死亡的人數超過170萬，并且其中超過1/3的活動性肺結核患者并未得到及時確診及治療[2]。痰液顯微鏡檢查在活動性肺結核診斷中十分常用，但檢查結果嚴重依賴于檢驗人員的自身技術水平，并且采用的固體或者液體培養方法耗時長，使其難以在醫療條件較差的地區得到廣泛應用[3]。感染了人類免疫缺陷病毒的患者難以獲得痰液標本，即便是獲得了痰液標本也會因細菌量不足而得出錯誤的診斷[4]。近年來，與活動性肺結核有關的外周血蛋白標志物引起了醫學界及臨床的高度重視，臨床上紛紛開展研究[5]。活動性肺結核起病后患者普遍伴有不同程度的肺部炎癥滲出，由此導致炎癥因子持續釋放，而目前臨床上與活動性肺結核炎癥活動有關的指標包括白細胞介素(IL)-6、IL-8、IL-18等，其水平升高往往反映出炎癥的嚴重程度[6]。血管內皮生長因子(VEGF)全程參與結核分枝桿菌的增殖，并且隨著結核分枝桿菌數量的增加，由細胞壁中的糖脂、其他組分刺激單核細胞與巨噬細胞將會源源不斷地釋放該物質[7]。因此，在理論上檢測IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平有助于活動性肺結核的臨床診斷，但目前涉及此方面內容的臨床研究較少，故本研究圍繞IL-6、IL-8、IL-18、VEGF在活動性肺結核診斷中的應用效果展開分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年6月至2021年6月蘭州市肺科醫院和甘肅省人民醫院收治的80例活動性肺結核患者作為活動性肺結核組，73例非活動性肺結核患者作為非活動性肺結核組，另選取同期80例健康體檢者作為對照組。活動性肺結核組男45例，女35例；年齡48～69歲，平均(56.87±2.43)歲；病程1～3個月，平均(1.85±0.25)個月；有吸煙史44例，無吸煙史36例；有飲酒史35例，無飲酒史45例；有胸腔積液45例，無胸腔積液35例；有空洞48例，無空洞32例。非活動性肺結核組男43例，女30例；年齡49～68歲，平均(56.62±2.52)歲；病程1～3個月，平均(1.80±0.23)個月；有吸煙史40例，無吸煙史33例；有飲酒史37例，無飲酒史36例。對照組男48例，女32例；年齡50～66歲，平均(56.82±2.51)歲；有吸煙史47例，無吸煙史33例；有飲酒史32例，無飲酒史48例。納入標準：(1)活動性肺結核符合相關的診斷標準[8]，結核分枝桿菌檢測陽性。或者結核分枝桿菌檢測陰性但具有以下情形之一：影像學檢查提示肺部滲出性病變；原結核分枝桿菌檢測陽性，正在接受規范的抗結核治療但尚未完成療程；新發現活動性病變、病變較之前增多、新發空洞、結核分枝桿菌轉陽。(2)非活動性肺結核診斷標準：細菌學檢查為陰性，無活動結核體征及相關癥狀，影像學檢查有結節性病灶、空洞、胸膜粘連或增厚等。(3)認知功能良好，能夠配合標本采集者。排除標準：(1)具有活動性肺結核相似癥狀的肺癌、支氣管擴張、肺炎、慢性阻塞性肺疾病患者。(2)合并嚴重精神障礙并伴有攻擊傾向的患者。(3)標本采集前服用過抗菌藥物或抗VEGF的患者。(4)合并終末期惡性腫瘤或未經控制的重度感染患者。所有研究對象均知情同意并簽署知情同意書。本研究通過醫學倫理委員會審批。活動性肺結核組、非活動性肺結核組和對照組性別、年齡、吸煙史、飲酒史比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 活動性肺結核組、非活動性肺結核組和對照組均采集空腹靜脈血3 mL，置于山東博科生物產業有限公司生產的TD-5M-I醫用離心機中以3 000 r/min離心10 min，收集上清液。采用上海卡努生物科技有限公司生產的VEGF定量檢測試劑盒以酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測VEGF水平。采用英國Abcam公司生產的檢測試劑盒以ELISA檢測IL-6、IL-8、IL-18水平。所有檢測步驟均嚴格按照試劑盒說明書執行。入院后活動性肺結核患者均按照《肺結核基層診療指南(2018年)》[9]內容予以2HRZE/4HR方案治療，總療程9個月。

1.3觀察指標 選取活動性肺結核組、非活動性肺結核組和對照組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF，以及活動性肺結核組內有、無胸腔積液組和有、無空洞組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF作為觀察指標。

2 結 果

2.1活動性肺結核組、非活動性肺結核組和對照組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平比較 活動性肺結核組和非活動性肺結核組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平均明顯高于對照組，且活動性肺結核組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平均高于非活動性肺結核組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 活動性肺結核組、非活動性肺結核組和對照組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平比較

2.2有胸腔積液組和無胸腔積液組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平比較 活動性肺結核組內有胸腔積液組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平均明顯高于無胸腔積液組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 有胸腔積液組和無胸腔積液組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平比較

2.3有空洞組和無空洞組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平比較 活動性肺結核組內有空洞組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平均明顯高于無空洞組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 有空洞組和無空洞組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平比較

3 討 論

活動性肺結核是指痰涂片陽性，發現結核分枝桿菌排出、病灶處于活動期的肺結核類型[10]。X線片檢查能夠發現斑片狀陰影或結核空洞，或播散病灶，表明此時患者體內的結核分枝桿菌毒力強、繁殖活躍[11]。本研究發現，與無空洞組比較，有空洞組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平均明顯升高，差異均有統計學意義(P<0.05)。活動性肺結核并非不可治愈，在明確診斷后接受積極、規律抗結核治療后患者普遍能夠取得較好的預后[12]。若未合理、規律抗結核治療將會導致病情持續加重，甚至播散至其他臟器形成播散性疾病，病情嚴重者會危及其生命安全[13]。未及時治療的活動性肺結核患者會形成永久性肺損傷，使其肺功能呈進行性下降[14]。鑒于活動性肺結核有極大的危害，故早發現、早治療尤為重要。然而，活動性肺結核患者的癥狀表現存在較為明顯的差異，輕者可無任何癥狀，僅僅在正常體檢時被發現，典型患者則表現出咳嗽、咳痰、午后低熱、盜汗、消瘦等，女性患者則伴有月經不調，容易被患者忽視[15]。痰涂片鏡檢雖然能夠為臨床診斷工作提供較為可靠的參照依據，但靈敏度相對較低且耗時長，難以滿足快速檢測[16]。并非每個醫療衛生機構均可以開展痰涂片鏡檢，該方法的限制性較大。故當前診斷迫切需要一種操作便捷、簡單可靠、成本低廉、靈敏度高的檢測方法。

美國哈佛大學和麻省理工學院的研究團隊在Luminex平臺基礎上應用Simoa超高靈敏蛋白檢測技術研發出一種基于血液的活動性結核病快速檢測方法，通過分層篩選，最終獲得了4種蛋白質標志物，分別是IL-6、IL-8、IL-18和VEGF，連續性數據檢測證實以上指標可以作為區分活動性結核病及其他與結核病相似癥狀疾病的生物標志物[17]。然而，目前國內臨床研究中尚無此方面的研究，故該成果是否可以被用于臨床尚有待于進一步證實。基于此，本研究對此展開分析，結果顯示，與對照組比較，活動性肺結核組和非活動性肺結核組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平更高，且活動性肺結核組高于非活動性肺結核組，差異均有統計學意義(P<0.05)，由此提示，IL-6、IL-8、IL-18、VEGF有助于活動性肺結核的診斷且不失為良好的生物學標志物。其原因在于IL-6、IL-8、IL-18與炎癥密切相關，活動性肺結核患者在結核分枝桿菌侵入肺部后將會誘發感染性病變，容易形成胸腔積液，而胸腔積液恰恰屬于炎癥滲出的重要表現，并且胸腔積液的出現還加重了患者的咳嗽、咳痰等癥狀[18]。本研究結果顯示，活動性肺結核組內有胸腔積液組血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平均明顯高于無胸腔積液組，差異均有統計學意義(P<0.05)。VEGF全程參與到細胞的增殖、炎癥、新生血管形成等進程中，廣泛分布于結核分枝桿菌細胞壁中的糖脂在其增殖活躍時不斷刺激單核/巨噬細胞，使巨噬細胞源源不斷地釋放出VEGF，而隨著VEGF水平升高，活動性肺結核的病理進程隨之加快。因此，IL-6、IL-8、IL-18、VEGF與活動性肺結核之間存在密切的關聯性，在臨床中具有一定的推廣使用價值，但不足之處在于血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF的特異度相對較低，在今后工作中需繼續摸索全新的檢測方案。

綜上所述，活動性肺結核患者血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平較高，可作為生物學標志物推廣使用。