乳酸脫氫酶在紅細胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺陷癥引起的溶血性貧血診治中的臨床意義

周一男，樊小燕，熊夢云

（江西省九江市婦幼保健院兒內科，九江 332000）

紅細胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase，G-6-PD）缺陷癥是兒童溶血性貧血（Hemolytic Anemia，HA）的常見病因，可引發貧血、黃疸、嘔吐等癥狀，嚴重溶血者還會出現無尿、酸中毒及急性腎衰竭等嚴重癥狀，對患兒生命安全造成威脅，需盡早診治[1-2]。目前，臨床主要依據患兒臨床表現及血紅蛋白、尿常規等實驗室指標對G-6-PD缺陷癥引起的HA進行診斷，但無法對HA所致的溶血危象進行快速預警，可能會延誤患兒最佳治療時間，促進疾病進展，增加不良預后發生風險[3]。因此，積極尋找可快速、準確預警G-6-PD缺陷癥引起HA患兒溶血危象的指標十分必要。張鳳奎[4]報道，HA嚴重程度取決于紅細胞破壞速率，紅細胞破壞速率越快，疾病越嚴重。乳酸脫氫酶（Lactate Dehydrogenase，LDH）是糖無氧酵解及糖異生的重要酶系之一，在紅細胞中含量較高，當紅細胞遭到破壞時，LDH也會隨之釋放入血，導致血清中LDH活性異常升高[5]。因此，推測LDH可能對G-6-PD缺陷癥引起的溶血危象具有一定評估價值，且LDH活性水平可能與溶血危象嚴重程度存在一定關系。本研究主要探究LDH對G-6-PD缺陷癥引起的HA評估價值，并分析其與溶血程度的相關性。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析，收集自2015年1月至2021年8月因“G-6-PD缺陷癥引起的HA”于九江市婦幼保健院兒童血液專科住院治療的患兒臨床資料，根據是否存在溶血危象分為溶血危象組和未發生溶血危象組，每組各收集病例30例。溶血危象組中男28例，女2例；年齡1~14歲，平均（3.12±1.23）歲。未發生溶血危象組中男28例，女2例；年齡1~14歲，平均（2.05±1.19）歲。（1）納入標準：G-6-PD缺陷癥引起的HA符合《諸福棠實用兒科學》[6]中相關規定：患兒面色蒼黃，伴或不伴鞏膜黃染、發熱，尿色加深，或呈濃茶水樣，或是呈醬油色尿，有進食蠶豆及蠶豆制品的病史，實驗室檢驗提示各種程度的貧血，網織紅細胞升高，膽紅素升高，尿常規提示尿膽原升高等；紅細胞G-6-PD活性測定減低；年齡在1~14歲者；病例資料完整，包括本研究所需資料者。（2）排除標準：非溶血原因所致的貧血者；紅細胞膜的缺陷、血紅蛋白病及紅細胞外異常所致的HA者；合并有嚴重感染者；合并有泌尿道畸形、血液腫瘤惡性疾病、心、肝、腎等嚴重臟器功能疾病者。兩組患兒一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可對比性。

1.2 方法

1.2.1 資料中溶血危象評估方法 溶血危象符合《內科學》[7]中相關規定：患兒突然出現寒戰、高熱、煩躁不安等癥狀，較大兒童能訴腰痛，四肢疼痛、腹痛、少尿或尿閉，尿色呈棕紅色或醬油色，血紅蛋白大幅度下降、貧血、黃疸驟然加重，脾臟較前明顯增大，且經血分析及網織紅細胞測定、尿常規、血生化檢驗及肝膽脾B超檢查確診。

1.2.2 資料中溶血危象組患兒疾病嚴重程度評估與分組方法 患兒入院時，采集空腹外周肘靜脈血5 mL，采用全自動細胞分析儀（珠海科域生物工程有限公司，型號：KU-800）測定血紅蛋白（Hemoglobin，Hb）水平，根據Hb下降程度評估溶血危象患兒疾病嚴重程度，將Hb＜60 g/L患兒納入重度組，將60 g/L≤Hb≤70 g/L患兒納入中度組，將Hb＞70 g/L患兒納入輕度組。

1.2.3 資料中LDH活性水平測定方法 患兒入院時，采集空腹外周肘靜脈血5 mL，以3500 r/min速率離心10 min，離心半徑10 cm，取血清，采用乳酸底物法測定血清LDH活性水平，試劑盒選自深圳雷杜生命科學股份有限公司，嚴格按照試劑盒說明進行。

1.3 統計學方法 采用SPSS 25.0軟件處理數據，全部計量資料均經Shapiro-Wilk正態性檢驗，符合正態分布計量資料以（±s）表示，組間比較用獨立樣本t檢驗；三組間比較用單因素方差分析檢驗，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗；計數資料用[n（%）]表示，采用χ2檢驗；繪制受試者工作曲線（ROC），并計算曲線下面積（AUC）值，以檢驗LDH評估G-6-PD缺陷癥引起的HA患兒溶血危象發生的價值，AUC值＞0.9表示評估價值較高，0.71~0.9表示有一定評估價值，0.5~0.7表示評估價值較低，＜0.5表示無評估價值；用雙變量Kendall的tau-b（K）直線相關性分析LDH與溶血危象患兒疾病嚴重程度的關系；檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 溶血危象組與未發生溶血危象組患兒LDH活性水平比較 溶血危象組患兒LDH活性水平平均為（523.16±23.85）U·L-1，未發生溶血危象組患兒LDH活性水平平均為（197.52±12.27）U·L-1，溶血危象組患兒LDH活性水平高于未發生溶血危象組患兒，差異有統計學意義（t=66.500，P=0.000）。

2.2 LDH評估G-6-PD缺陷癥引起的HA患兒溶血危象發生的價值分析 將G-6-PD缺陷癥引起的HA患兒溶血危象發生情況作為狀態變量（“1”=發生，“0”=未發生），將LDH活性水平納入作為檢驗變量，繪制ROC曲線（見圖1），結果顯示，LDH過表達評估G-6-PD缺陷癥引起的HA患兒溶血危象發生的AUC為0.877（95%CI：0.788~0.965），具有一定評估價值，且當LDH活性水平為300.015 U·L-1時，其敏感度、特異性較高分別為0.900、0.667，約登指數為0.567。

圖1 LDH評估G-6-PD缺陷癥引起的HA患兒溶血危象發生價值的ROC曲線圖

2.3 不同疾病嚴重程度溶血危象患兒LDH活性水平比較 全部30例溶血危象患兒中，11例疾病嚴重程度為輕度，占36.67%（11/30）；15例為中度，占50.00%（15/30）；4例為重度，占13.33%（4/30）；重度組LDH活性水平平均為（727.18±15.27）U·L-1，中度組LDH活性水平平均為（589.34±12.25）U·L-1，輕度組LDH活性水平平均為（383.27±11.53）U·L-1，重度組LDH活性水平高于中度、輕度組，且中度組LDH活性水平高于輕度組，差異有統計學意義（F=1564.105，P=0.000）。

2.4 LDH與溶血危象患兒疾病嚴重程度的關系分析 經雙變量Kendall的tau-b（K）直線相關性分析，結果顯示，LDH活性水平與溶血危象患兒疾病嚴重程度呈正相關（r=0.786，P=0.000）。

3 討論

G-6-PD缺陷癥引起的HA患兒溶血危象具有發病急、病情進展快、病情兇險等特點，若未及時診治，可引發諸多并發癥，威脅患兒生命安全[8]。因此，臨床需尋找快速、有效的方法對HA患兒溶血危象的發生進行盡早評估與預警，從而為治療方案的制定提供準確參考，挽救患兒生命，改善其預后。

LDH為含鋅離子的金屬蛋白，正常情況下，紅細胞內LDH含量約為血清的100倍，當血清LDH水平異常升高時，多提示紅細胞膜、血紅蛋白及紅細胞酶存在異常，機體可能存在HA[9-10]。因此，推測LDH可能與G-6-PD缺陷癥引起的HA溶血程度存在一定關系。本研究結果顯示，溶血危象組LDH活性水平高于未發生溶血危象組，初步提示LDH對HA所致的溶血危象具有一定評估價值，分析原因可能為，G-6-PD缺陷癥可導致機體氧化作用所產生的過氧化氫無法被及時還原成水，而過多的過氧化氫會使血紅蛋白和膜蛋白產生氧化損傷，最終造成紅細胞膜的損傷及溶血，引起HA[11]。HA患兒因體內紅細胞不斷遭到破壞，紅細胞中的LDH會不斷釋放入血，從而導致血清中LDH活性水平不斷升高，且當機體出現溶血危象時，紅細胞破壞速率會顯著提高，進而導致血清中LDH活性水平顯著升高[12]。因此，當血清LDH活性水平異常升高時，提示機體可能存在溶血危象，且血清LDH活性水平越高，紅細胞破壞程度越嚴重，機體溶血程度越嚴重。為驗證假說，進一步繪制ROC曲線結果顯示，LDH過表達評估G-6-PD缺陷癥引起的HA患兒溶血危象發生的AUC為0.877，具有一定評估價值，且經雙變量Kendall的tau-b（K）直線相關性分析，結果顯示，LDH活性水平與溶血危象患兒疾病嚴重程度呈正相關。建議臨床今后可通過密切監測G-6-PD缺陷癥引起的HA患兒血清LDH活性水平，可能對輔助判斷HA所致的溶血危象，評估患兒溶血程度具有積極意義。

綜上所述，LDH對G-6-PD缺陷癥引起的HA溶血危象具有一定評估價值，且LDH活性水平與溶血程度呈正相關，可作為危重病例的警示指標，并為臨床治療方案的制定提供有力的依據。