昆明地區6 091 名女性HPV 篩查結果及基因分型初步探討

李心怡 ，朱 燕 ，黃蓉霞

（1）昆明市婦幼保健院藥學部;2）婦女保健部，云南 昆明 650031）

生殖器人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染會導致人體皮膚黏膜的鱗狀上皮增殖，目前已知的HPV 有160 多個型別，其中高危型持續感染已被國內外多個研究證實與子宮頸癌發病有密切相關性，低危型感染常與生殖器疣、皮膚疣等病變有關[1-2]。亞洲地區HPV16、18、52 等高危型感染較為常見[3]。宮頸癌是我國女性惡性腫瘤發病率排第二位的疾病，我國每年新發約13萬病例，死亡病例約3.7 萬[4]。近年來大量研究證實，宮頸癌發病率呈年輕化趨勢，且山區高于平原[5]。昆明地區地處西南高原地區，因此了解昆明地區女性HPV 感染情況非常有必要，根據篩查結果提前干預可有效控制宮頸癌前病變。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2021 年1 月～12 月在昆明市婦幼保健院婦科門診、住院部和健康管理中心進行常規治療或體檢，經知情同意后自愿進行宮頸HPV 篩查的女性病歷資料6 091 份，年齡16～86 歲，平均年齡（37.57±8.66）歲。納入標準：（1）既往有性生活史；（2）非經期；（3）非妊娠期。排除標準：（1）宮頸癌患者；（2）檢測前1 d 有陰道灌洗史；（3）月經期、妊娠期；（4）無性生活史者。本項目經醫院倫理委員會審核通過后進行。

1.2 儀器與試劑

采用上海透景生命科技股份有限公司的人乳頭瘤病毒檢測試劑盒和基因擴增儀，運用流式熒光雜交法進行PCR 擴增。Luminex200 多功能流式點陣儀購自美國Luminex 公司。

1.3 方法

將標本進行震蕩混勻后離心棄去上清液，加入核酸提取試劑后渦旋混勻，100 ℃孵育15 min，再離心提取上清液可得DNA，-20 ℃保存標本。將標本取出后按照試劑盒說明書進行PCR 擴增、PCR 產物雜交。使用 Luminex200（48 ℃預熱15 min）進行雜交產物的檢測。觀測陽性內對照Globin 信號，當該信號大于150 且HPV 型別特異性探針信號大于150 時，則判斷值該探針對應的HPV 型別為陽性，否則為陰性。

1.4 統計學處理

采用SPSS26.0 統計軟件進行數據分析。計量資料采用均數±標準差（）表示。計數資料采用頻數和率[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜ 0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HPV 感染率

6 091 人次標本中共檢出HPV 陽性1 301 人次，陽性率21.36%。單一感染1 027 例，占陽性感染者比例78.94%。多重感染274 例，占陽性感染者比例21.06%。

2.2 HPV 感染分型

本次研究共檢出25 種HPV 基因分型，高危型包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、55、56、58、59、61、66、68、82、83 型，低危型包括HPV6、11、42、43、44、81 型。

所有基因分型陽性標本共計1 689 例，其中以高危型居多，占82.95%（1 401/1 689），低危型17.05%（288/1 689）。陽性標本中，HPV52 型占比最 多（21.83%），其次為HPV16 型（11.38%）、HPV58 型（10.76%），見表1。

表1 HPV 感染亞型分布（n）Tab.1 Distribution of HPV infection subtypes（n）

2.3 感染模式

單一感染1 027 例，主要亞型為HPV52 型，占單一感染患者比例20.06%（206/1 027），其次為HPV16（9.83%）、HPV58（9.06%）。多重感染274 例，以二重感染人數最多，主要亞型為HPV52 型+HPV53 型，最多檢出7 種亞型同時感染，見表2。多重感染模式中以高危+高危組合模式為主，見表3。

表2 HPV 感染模式（n）Tab.2 Patterns of HPV infection（n）

表3 HPV 多重感染基因亞型組合模式（n）Tab.3 Combination patterns of HPV multiple infection gene subtypes（n）

2.4 感染年齡分布

將參檢者按年齡分為≤20 歲組、21～30 歲組、31～40 歲組、41～50 歲組、51～60 歲組、＞ 60歲組[6-8]。＞ 60 歲組HPV 感染率最高，其次為21～30 歲組、51～60 歲組。將各年齡組感染率進行比較，差異有統計學意義（χ2=42.790，P=0.000），見表4。組間兩兩比較，21～30 歲組感染率高于31～40 歲組、41～50 歲組，差異有統計學意義（χ2=10.740，P=0.001；χ2=22.221，P=0.000；χ2=8.792，P=0.003）。其余組間比較結果均無統計學意義（P＞ 0.003）。

表4 HPV 感染年齡分布[n（%）]Tab.4 Age distribution of HPV infection [n（%）]

各年齡組間高危型感染率差別無統計學意義（χ2=9.820，P=0.080）。

3 討論

HPV 主要通過性交、皮膚接觸感染，也存在母嬰垂直傳播的情況[9]。多數HPV 感染是存在自限性，能夠通過自身免疫性清除。但持續的感染會引起宮頸癌、尖銳濕疣等疾病。HPV 感染通常具有隱匿性，臨床癥狀不明顯，不能被輕易識別[10]。因此了解昆明地區女性宮頸HPV 感染情況非常有必要。

分析2021 年1 月～12 月昆明市婦幼保健院就診的6 091 名女性的HPV 檢測結果顯示。去年我院最常見的HPV 亞型分別為HPV52、HPV16、HPV58，這與唐鳳祝等[11]報道的四川省21 776 例女性的HPV 檢查結果基本一致。張愛鳳等[7]報道的北京通州地區的常見類型依次為HPV16、HPV51、HPV52，王睿等[8]報道的山東地區的常見類型依次為HPV16、HPV52、HPV6。說明HPV 感染亞型分布存在地域差異，南方地區HPV52 類型較常見，接種者在選取HPV 疫苗時需盡量覆蓋該類型。

本研究顯示本地HPV 感染模式以單一高危型感染為主，與我國其他地域檢查結果相近[7-8，11-12]。不同年齡段的HPV 感染結果顯示，21～30 歲組HPV 感染率高于31～50 歲人群。這與該年齡段性行為活躍、保健預防意識不足有關。31～50 歲女性 HPV 感染人數下降，可能原因為其自身免疫系統發育成熟、預防防護意識增強，性伴侶較為固定[13]。本研究 ＞ 60 歲人群HPV 率最高，這可能與該年齡段人群免疫力低下，自身清除病毒能力下降有關[14]，而且該年齡段人群常常是因為出現癥狀后就診，因而陽性率更高。

綜上所述，昆明地區30 歲以下和60 歲以上人群有較高HPV 感染幾率，HPV52、HPV16、HPV58 是感染風險較高的亞型。HPV 感染呈年輕低齡化趨勢，筆者認為應加大對青少年人群對宮頸癌防治的宣教力度，提高他們預防HPV 感染和接種宮頸癌疫苗重要性的認識[15]。我國目前上市的能覆蓋HPV52、HPV58 的疫苗不多，相關疫苗的研發很有必要。