六神曲中總有機酸含量的測定

肖 瑜，魏引平，袁小倩

(1.寶雞市食品藥品檢驗檢測中心，陜西 寶雞 721013； 2.陜西省藥品和疫苗檢查中心寶雞分中心，陜西 寶雞 721013)

0 引言

六神曲是由辣蓼、青蒿六味原料加工發酵制成的曲劑，是中醫傳統曲類中藥飲片中用量最大的品種，臨床多用于脾胃虛弱、飲食停滯及食積不消等癥，是雞內金散、補中益氣湯等常用藥的生產原料和處方用藥。六神曲原料并沒有消食功效，而是在發酵后具備了健脾消食的作用，說明藥效作用是由發酵產生[1]，因此發酵是六神曲產生藥效的工藝基礎。

企業生產中多采用自然發酵，有效生產時間根據地域氣候不同而不同。但現行質量標準對發酵程度沒有有效控制指標，1998年頒布的衛生部標準[2]僅對性狀、常規檢查等簡單項目做了規范，沒有含量測定項目，無法對六神曲質量進行有效評價。全國各地六神曲標準不同，各省地方標準也沒有量化控制指標，文獻調研發現處方和制法也有所不同，導致市售六神曲質量差異較大。在標準開發中約束發酵程度、控制發酵終點是質量控制指標急需解決的問題。

收集了陜西省六神曲主要生產廠家不同月份生產的六神曲數批，采用電位滴定法，在參考文獻[3-5]的基礎上，研究建立六神曲中總有機酸含量的測定方法，為有效控制質量、提升質量標準提供科學依據。

1 儀器與材料

SQPPractum224-1CN電子天平(Sartorius)，SevevMulti pH計(梅特勒-托利多)，78-1磁力攪拌器(常州國華生產)。24批六神曲樣品購自陜西省廠家A、廠家B、廠家C、廠家D，其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 方法

枸櫞酸溶液的制備。精密稱取枸櫞酸約3 g至燒杯中，加新沸過的冷水100 mL溶解，轉移定容至500 mL容量瓶中，制成含枸櫞酸6 mg/mL的溶液，搖勻，備用。

樣品溶液的制備。精密稱取六神曲粉末約25 g于三角瓶中，加新沸過的冷水150 mL，搖勻，室溫放置30 min后超聲30 min，用新沸過的冷水轉移并定容至250 mL量瓶中，搖勻，過濾，取續濾液，備用。

測定方法。精密移取上述樣品溶液25 mL至200 mL燒杯中，加入新沸過的冷水50 mL，開啟磁力攪拌器，放入電極，用0.1 mol/L氫氧化鈉滴定液滴定至pH8.2即可，同時進行空白實驗。通過氫氧化鈉的消耗量計算樣品中相當于枸櫞酸[6](C6H8O7)的含量。

2.2 實驗考察

重復性試驗。按樣品溶液的制備方法制備供試品溶液，平行6份，按上述測定方法測定，空白校正，RSD為0.92%(n=6)，表明該方法重復性良好。

穩定性試驗。同上制備供試品溶液，分別于0、1、2、4、6、8 h進行測定，空白校正，結果RSD為0.56%，表明供試品溶液在8h內穩定性較好。

加樣回收實驗。取15 g六神曲粉末6份，精密稱定，分別精密加入枸櫞酸對照品溶液20 mL，按上述方法制備供試品溶液，進行方法測定，空白校正。計算回收率為99.5%，RSD%=1.23(n=6)，測定結果見表1。

表1 加樣回收率結果 (n=6)Tab.1 Recovery rate of the added sample (n=6)

2.3 樣品測定

24批次樣品按上述方法制備供試品溶液，進行測定，測定結果見表2。

表2 不同批次六神曲總有機酸含量Tab.2 Total organic acid content in different batches of Liushenqu

3 討論

六神曲中含有沒食子酸、隱綠原酸、異綠原酸A等[7]，且文獻報道從六神曲中成功分離鑒定出2種乳酸菌[8]，乳酸菌在發酵過程中產生代謝物乳酸。六神曲作為面曲類，基質中存在淀粉、蛋白質、油脂等大分子物質，發酵過程中極易被微生物利用，分解為人體易吸收的低聚糖、氨基酸、脂肪酸等[9]。發酵后，產品中含有脂肪酸、氨基酸、脂類等香味物質，如發酵條件控制不當，發酵程度和方向偏離后可能會使有機酸過度產生，因此適宜的酸度區間可作為發酵工藝的一個評價指標，故而選擇總有機酸作為六神曲質量控制指標。由于六神曲供試品顏色較深，用指示劑法難以觀察終點顏色，故選擇電位滴定法。此測定方法簡便、準確、重復性好，可作為六神曲總有機酸含量的測定方法。

24批次六神曲總有機酸以枸櫞酸計，含量在0.69%～2.05%，平均含量為1.24%，不同批次總有機酸含量差異較明顯，說明不同工藝條件對六神曲質量影響較大，且相同的廠家不同月份產品存在差異，因此對六神曲總有機酸含量測定很有必要。