骨相關(guān)間充質(zhì)干細(xì)胞CD166+亞群治療炎性腸病模型小鼠的研究*

孟煒程 陳要臻 安寧 張婧 陳禹彤 胡興斌

炎癥性腸病（inflammatory bowel disease，IBD）是一種慢性非特異性的腸道炎癥性疾病，目前病因不明，發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚。IBD好發(fā)于青壯年人群，有潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）和克羅恩病（Crohn's disease，CD）兩種臨床亞型，目前不可治愈[1-2]。IBD病程長(zhǎng)且反復(fù)發(fā)作，導(dǎo)致生活質(zhì)量和工作效率下降，甚至出現(xiàn)抑郁癥等癥狀，對(duì)患者的身心健康造成嚴(yán)重?fù)p害。同時(shí)，IBD患者需要反復(fù)住院治療，手術(shù)和藥物的使用，特別是生物制劑的使用，導(dǎo)致高昂的醫(yī)療費(fèi)用[3]。間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）來(lái)源廣泛，具有多向分化潛能，近年來(lái)因其突出的免疫調(diào)節(jié)功能被廣泛用于治療慢性炎癥性疾病研究[4-5]。前期實(shí)驗(yàn)室利用小鼠IBD模型，也證實(shí)MSCs可以抑制結(jié)腸炎癥狀，促進(jìn)炎癥修復(fù)[6]。但MSCs是混合群細(xì)胞具有多向分化潛能，發(fā)揮作用的可能是其中的某個(gè)亞群。經(jīng)流式分選可獲得到CD146+、CD166+、Sca1+三種骨相關(guān)MSCs亞群；這些MSCs亞群可能具有不同的功能，我們前期已發(fā)現(xiàn)它們支持骨髓移植后造血干細(xì)胞體內(nèi)重建存在差異[7]。CD166+細(xì)胞是數(shù)量相對(duì)較多的細(xì)胞，考慮到細(xì)胞獲得難度以及轉(zhuǎn)化的前景，本研究對(duì)骨相關(guān)間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行分選得到MSCs CD166+亞群，并檢測(cè)其應(yīng)用于小鼠IBD模型的治療效果。

材料與方法

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：雄性野生C57BL/6無(wú)特定病原體小鼠（體重19～22 g，8～12周齡）由空軍軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供并飼養(yǎng)。造模前，適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d，普通飼料喂養(yǎng)。本實(shí)驗(yàn)過(guò)程均嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理相關(guān)要求進(jìn)行。

1.2 主要試劑：磷酸鹽緩沖溶液（PBS）；0.5% Ⅰ型膠原酶；紅細(xì)胞裂解液（ACK）；……