影響農殘快檢儀測定結果的因素

劉艷春，舒淑芬，項飛兵，陳文煜，肖 妙，崔晨燕

（黃岡市公共檢驗檢測中心，湖北黃岡 438000）

蔬菜中農藥殘留（以下簡稱“農殘”）超標，會嚴重影響消費者安全與健康。為應對該類產品保質期短、流動性快的特殊性，在短時間內完成從樣品制備到檢測結果出具整個過程的快檢是非常必要的。快檢設備可有效避免大型儀器對場地、人員等的高要求，實現在實驗室外對新鮮蔬菜等初級農產品的快速檢測。有機磷及氨基甲酸酯類殺蟲劑使用廣泛，占殺蟲劑用量的70%以上[1]，是蔬菜中殘留的主要農藥種類，也是目前農藥殘留檢測的重點。此外，對于該類物質的檢測已有相關國標方法[2]，因此對這兩類農殘的快速檢測方法進行研究具有非常重要的意義。

常見的農殘快檢方法有酶抑制法、免疫分析法、生物傳感器法等多種方法[3]，每種方法具有不同的特點，適用于不同的檢測環境。且已開發出速測卡法、快速測定儀、膠體金法以及生物傳感器[4-6]等多種類型的產品，農殘快速檢測儀以其快速、靈敏便捷、低成本等特點，被廣泛應用于商超市場、蔬菜基地等的產品質量檢驗工作中，成為果蔬類農藥殘留初篩的重要工具[2]，通過初篩、定性分析，最終獲得農殘初步結果。本文介紹的是采用乙酰膽堿酯酶抑制方法為原理的農殘快速檢測儀在檢測過程中的影響因素，旨在通過對影響檢測結果的因素進行考察，保證檢測結果的準確性，從而降低檢測風險，為其推廣應用提供技術支持。

1 工作原理

農殘快速檢測儀的工作原理是比色法[7]，利用農藥靶標酶活性受抑制的程度，通過測定特定波長處吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率，從而對有機磷和氨基甲酸酯類農藥進行定性判定。

2 檢測前的質量控制

2.1 設備與試劑

設備管理人員應做好儀器設備定期檢查檢修工作，做好量具的定期檢定工作，確保儀器設備能滿足檢測需求。

試劑管理人員應做好試劑驗收及管理工作，按要求合理存放試劑。配制的酶、顯色劑、底物應于4 ℃冰箱中儲存；緩沖溶液應以蒸餾水或去離子水配備，配好后于4 ℃冰箱中儲存。同批次樣品的檢測中，為減少數據的誤差，應選用同一批次的試劑。此外，還應定期處置過期試劑。

2.2 樣品

抽樣人員應按照農業部相關要求[8]，按操作規程抽取有代表性樣品，抽樣器具、包裝材料要干凈獨立，杜絕污染，標簽信息要完善，所抽樣品應及時送檢避免變質、受損或污染；他人送檢樣品，抽樣人員應做好收樣工作，分別包裝登記，及時送檢。

2.3 人員

抽樣人員、檢測人員應具有一定水平的知識儲備和業務能力，經培訓后，持考核通過證上崗。抽樣人員要保證所抽樣品能夠反映所抽批次真實情況；檢測人員應能熟練理解測試原理，能準確使用快檢儀器，能及時發現異常數據并處理常見故障，能對所檢測數據負責。

3 檢測中的質量控制

3.1 樣品前處理

將待檢樣品剪成1 cm2的碎片，選取1 g樣品，加提取液5 mL，振蕩萃取2 min后靜置，濾液即為樣品提取液。

3.1.1 取樣

取樣不可過碎，以免色素過多干擾；對汁水過多的番茄等樣品，要拭去多余汁液，避免提取液混濁，干擾透光。

3.1.2 萃取

用5 mL提取液提取，時長以2 min為宜，該條件下既能充分提取又能避免色素漫出。有研究表明，直接浸提法對農殘的提取率不高，且不能利用相似相溶原理采用有機溶劑進行提取，因有機溶劑會使酶失活，而去除有機溶劑的大型設備及煩瑣過程將使快檢失去快這一重要特點[9]。姜露等[9]發現通過超聲萃取可以有效提高農藥提取效率；對顏色較深的提取液經有機濾漠過濾后，可以在保證較好的回收率的前提下，排除有色物質的干擾。蘇明偉等[10]通過條件優化，首次實現將亞臨界水萃取技術用于果蔬中的農藥殘留樣品的預處理，并得到了耗時短、提取率高的亞臨界水萃取的最優條件。也有研究表明，對易產生假陽性的含硫化合物的蔬菜可采取整株蔬菜浸提法，對葉菜類含色素較高的蔬菜采用莖處表皮也能減少干擾[11-12]。

3.2 樣品檢測

3.2.1 酶

酶是一種高度專一，被廣泛應用的強催化劑。酶的來源主要有兩種，即動物或植物。有研究表明來源于動物或植物的酶作用相同，其準確度和精密度相近[13]。酶活性及對農藥的敏感度會直接影響檢測的準確性及可信度，因此對其改良優化一直是研究熱點。因此，在實際工作中，同批次檢測中酶應保證其同一性，選用同一廠家同一批次的，且合理保存以保持活性，減少其對結果的影響。購置的酶于4 ℃冰箱中儲存時，處于休眠狀態，使用時，應取出后放置至室溫，蘇醒活性。例如，空白試樣的ΔA＜0.3，則活性已不能滿足實驗要求，不可再用。

3.2.2 pH值

pH值會影響酶活力。有研究表明不同膽堿酯酶具有最佳活力的pH值略有不同[14]。也有研究顯示，適宜的pH值范圍可以減少某些特殊種類樣品出現假陽性。有些辛辣類的蔬菜，如蔥、大蒜、韭菜等，因其切口會產生硫化物，與有機磷和有機氯類農藥性質相似，從而產生假陽性[15]，嚴重影響檢測結果。加熱理論上可以去除硫化物，從而避免假陽性，但同時也會不可避免的造成農藥的分解[16]。王文等[1]研究發現，通過改進檢測條件（pH值），可以減小檢測中含硫物質對乙酰膽堿酯酶的抑制作用，同時還能保證有機磷和氨基甲酸酯類農藥的正常檢測，為后續研究開辟了一種新的研究思路。

3.2.3 溫度

提取溫度會影響提取效率及酶的活性，溫度過高，酶失活，會降低抑制反應；在溫度不足37 ℃的情況下，酶反應的速度會降低；反應溫度為37 ℃時測定結果較好[17]。因此，檢測中應配備恒溫水浴鍋，保持溫度恒定，使試樣在恒溫水浴鍋中的反應結果的重現性較好[18]。蘇明偉等[10]研究獲得了抑制率對溫度的校正公式，真正實現了野外檢測。通過溫度較正，實現了在無恒溫水浴的條件下，將現場溫度下測得的抑制率校正到37 ℃的抑制率。

4 檢測后的質量控制

2022年新修訂的《中華人民共和國農產品質量安全法》中，第五十條規定，經相關部門認定的快速檢測方法可以作為行政處罰的證據。但從業人員須知由于快檢儀檢測中大量假陽性的存在，因此快檢結論通常只作定性結論，不可輕易作為處罰依據。對易出現假陽性的品類，應謹慎對待。必要時，應將前述品類樣品進行定量檢測，測得農藥品種和含量，再作出最終定斷。

5 結語

農殘快檢儀可及時篩查不合格食用農產品，避免不合格食用農產品流入市場，對加快推進食用農產品集中交易市場快檢室建設顯得尤為重要。例如，可形成安全預警前移，為重大活動提供食品保障；價廉快速，有利于大規模推廣應用，對違規使用農藥形成震懾。相關從業者應深刻學習研究農殘快檢的相關知識，做好關鍵點的控制，確保檢測數據的真實可靠。相關農業部門應做好農技、農藥宣傳工作，鼓勵綠色種植，少用或不用農藥，綠色種植，從根本上減少農藥殘留。