QuEChERS結(jié)合氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法檢測豇豆中5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留

◎ 陳嘉儀

（廣州華鑫檢測技術(shù)有限公司，廣東 廣州 510663）

豇豆是薔薇目豆科豇豆屬植物，是我國比較常見的一種豆莢類蔬菜，因其含有碳水化合物、蛋白質(zhì)、多種維生素和微量元素，且味道可口、做法豐富多樣，深受人們的喜愛。但是作為一種花果同期農(nóng)作物，豇豆在花期極易遭受病蟲害，為了防治病蟲害、提高產(chǎn)量，此過程中會(huì)使用農(nóng)藥來控制病蟲害，而施用的農(nóng)藥又容易對(duì)同在收獲期的果實(shí)造成較大的農(nóng)藥殘留超標(biāo)風(fēng)險(xiǎn)。在使用的農(nóng)藥中，有機(jī)磷農(nóng)藥因病蟲害防治效果好，一度被應(yīng)用于豇豆的種植過程中，但由于有機(jī)磷農(nóng)藥的高毒性，大部分有機(jī)磷農(nóng)藥被禁止在豇豆中使用。甲基異柳磷、水胺硫磷、甲胺磷、三唑磷和氯唑磷等5 種有機(jī)磷農(nóng)藥就被明確禁止在豇豆中使用，而在實(shí)際工作中，這5 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留在豇豆中時(shí)有檢出。目前，QuEChERS 結(jié)合氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜檢測豇豆中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的研究不多，GB 23200.113—2018[1]中規(guī)定了植物源性食品中208 種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法，陳祝軍等[2-5]研究了QuEChERS 方法在蔬菜農(nóng)殘檢測前處理中的應(yīng)用，王麗芳等[6-7]研究了蔬菜中有機(jī)磷檢測的相關(guān)方法。本研究采用QuEChERS 結(jié)合氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜建立了檢測豇豆中甲基異柳磷、水胺硫磷、甲胺磷、三唑磷和氯唑磷的方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀（Thermo Fisher TSQ 9000，EI 源）；多管渦旋振蕩器（EYELA CM-1000）；氮?dú)獯蹈蓛x（Organomation N-EVAP-12）；離心機(jī)（赫西HR/T20MM）。

甲基異柳磷、水胺硫磷、甲胺磷、三唑磷和氯唑磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（純度均≥97%，德國Dr.Ehrenstorfer）；丙酮、乙酸乙酯、乙腈（HPLC 級(jí)，MREDA）；硫酸鎂、氯化鈉（分析純，廣州化學(xué)試劑廠）；檸檬酸鈉、檸檬酸二鈉（98%，Sigma）；PSA（40～63 μm，CNW）。

1.2 樣品前處理

取300 g 以上豇豆樣品，置于勻漿機(jī)中勻漿，勻漿后的樣品裝在樣品密封袋或者樣品密封瓶中-18 ℃保存。稱取經(jīng)過勻漿制備的樣品10 g（精確到0.01 g），置于50 mL 離心管中，加入20 mL 乙腈、6 g 硫酸鎂、2 g 氯化鈉、2 g 檸檬酸鈉和1 g 檸檬酸氫二鈉，放入1 顆陶瓷均質(zhì)子，蓋緊離心管蓋之后置于渦旋振蕩器中劇烈振蕩2 min，10 000 r·min-1離心3 min 后，取8 mL上清液于15 mL 離心管中，加入1 g 硫酸鎂和200 mg PSA，渦旋振蕩1 min，5 000 r·min-1離心3 min，準(zhǔn)確取上清液5 mL到15 mL小離心管中，45 ℃氮吹至近干，加入20 μL 的10 μg·mL-1環(huán)氧七氯內(nèi)標(biāo)溶液，再加入2.00 mL 乙酸乙酯-丙酮（V∶V=1∶1），渦旋振蕩1 min，將復(fù)溶液過0.45 μm 濾膜后，上機(jī)。

1.3 氣相色譜質(zhì)譜條件

1.3.1 色譜條件

色譜柱：DB-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；載氣：高純氦氣（99.999%）；載氣流速：1.2 mL·min-1；進(jìn)樣量：不分流進(jìn)樣1 μL；進(jìn)樣口溫度：280 ℃；程序升溫：40 ℃保持1.2 min，以24 ℃·min-1升溫至180 ℃保持1.5 min，以5 ℃·min-1升溫至280 ℃保持4.5 min。

1.3.2 質(zhì)譜條件

離子源：電子轟擊離子源（EI）；Q2 碰撞氣：高純Ar；質(zhì)譜傳輸線溫度：280 ℃；離子源溫度：300 ℃；電離能量：70 eV；掃描模式：SRM-time 模式。保留時(shí)間和離子對(duì)數(shù)據(jù)見表1。

表1 豇豆中5 種有機(jī)磷農(nóng)藥和內(nèi)標(biāo)環(huán)氧七氯的保留時(shí)間及離子對(duì)表

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍

以空白樣品基質(zhì)提取液配制甲基異柳磷、水胺硫磷、甲胺磷、三唑磷和氯唑磷混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，標(biāo)液中各組分濃度均為0 μg·mL-1、0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1、0.50 μg·mL-1和1.00 μg·mL-1。5 種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)曲相關(guān)系數(shù)均在0.99 以上。5 種有機(jī)磷及內(nèi)標(biāo)環(huán)氧七氯的典型譜圖見圖1。

圖1 內(nèi)標(biāo)環(huán)氧七氯和5 種有機(jī)磷農(nóng)藥典型譜圖

2.2 定量限

采用本研究所建立的方法，根據(jù)空白豇豆樣品的平均基線噪聲值，按照10 倍信噪比計(jì)算5 種有機(jī)磷類農(nóng)藥定量限，結(jié)果見表2。

2.3 回收率與精密度

在豇豆空白基質(zhì)中，分別以濃度為0.01 mg·kg-1、0.03 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1的5 種有機(jī)磷類農(nóng)藥加標(biāo)，每個(gè)水平做6 個(gè)平行樣品，按前述檢測方法進(jìn)行測定，測得豇豆樣品中5 種有機(jī)磷農(nóng)藥的加標(biāo)回收率以及精密度數(shù)據(jù)見表2。

表2 豇豆中5 種有機(jī)磷農(nóng)藥的定量限、回收率和精密度表

3 結(jié)論

本研究建立了豇豆中5 種有機(jī)磷類農(nóng)藥的檢測方法，試驗(yàn)結(jié)果表明該方法具有快速、準(zhǔn)確、高效等特點(diǎn)，適用于豇豆中5 種有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留的測定。