水果蔬菜中吡蟲啉的QuEChERS法測定

張小寧，劉 偉

（楊凌職業技術學院，陜西咸陽 712100）

農藥殘留問題一直是人們關注的焦點之一[1-2]。植物性食品的農藥殘留主要來源于水、土壤和農藥噴灑這一農業生產活動。完善農藥殘留檢測技術、建立健全的農藥使用管理體系是保護生態環境的重要手段之一。

吡蟲啉是煙堿類超高效殺蟲劑，具有廣譜、高效、低毒和低殘留等特點，害蟲不易產生抗性，并有觸殺、胃毒和內吸等多重作用[3-4]。害蟲接觸藥劑后，中樞神經正常傳導受阻，使其麻痹死亡[5-6]。吡蟲啉可有效防治薊馬、葉蟬、粉虱、蚜蟲、稻甲蟲、負泥蟲、潛葉蠅和潛葉蛾等刺吸式口器害蟲，對于鱗翅目和雙翅目害蟲也有很高的防治效果，可用于防治小麥、玉米、水稻、棉花、蔬菜、甜菜和果樹等作物病蟲害[7-10]。目前，農檢實驗室吡蟲啉的檢測方法多采用GB/T 23379—2009，通過多次提取、濃縮、固相萃取，最后通過高效液相色譜法測定[11-12]。

本研究在國家標準GB/T 23379—2009的基礎上，借鑒NY/T 761—2008的預處理方法，采用了QuEChERS方法和固相萃取，比較了兩者優劣，簡化了預處理和儀器分析過程，縮短了檢測分析時間，方法具有較好的重復性和靈敏度[13-14]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

吡蟲啉標準品（GBW（E）084948，北京壇墨質檢）；乙腈、甲醇（HPLC級，美國天地）；超純水（實驗室自制）；乙酸鈉、硫酸鎂、氫氧化鈉（西隴，分析純）。

1.2 儀器與設備

1260高效液相色譜儀（安捷倫公司）；D型干式氮吹儀（上海滬析實業有限公司）；MS3渦旋振蕩器（德國IKA公司）；ME204電子天平（瑞士梅特勒公司）；固相萃取柱（C18，1 g/6 mL）。

1.3 實驗方法

1.3.1 標準溶液的配制

標準中間液：準確移取100 μg·mL-1吡蟲啉標準溶液1.0 mL，用甲醇稀釋定容至10 mL，配制成濃度為10 μg·mL-1的標準中間液。

標準工作液：分別取0.05 mL、0.10 mL、0.20 mL、0.50 mL和1.00 mL中間液用甲醇水（3+7）稀釋定容至10 mL，配制成濃度為0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1、0.50 μg·mL-1和1.00 μg·mL-1系列標準工作液。

1.3.2 樣品處理

稱取約25.0 g蘋果樣品于250 mL燒杯中，加入50.0 mL乙腈，高速勻漿2 min，過濾置于50 mL盛有3～7 g氯化鈉的具塞量筒中，劇烈振蕩1 min，靜置分層。

固相萃取：吸取上清液4 mL在40 ℃下氮吹至干，用2.5 mL乙腈水（1+3）渦旋復溶。C18固相萃取柱先用2.5 mL乙腈和乙腈水（1+3）淋洗活化后，將復溶后樣品全部過柱，再用5 mL 20 mol·L-1氫氧化鈉、5 mL水淋洗，最后用1.0 mL乙腈洗脫，加水1.0 mL渦旋混合后過0.45 μm濾膜裝瓶待測。

QuEChERS：吸取上層清液10.0 mL加入1 g MgSO4，0.5 g NaOAc，渦旋30 s后靜置5 min，取上清2 mL氮吹濃縮后，用乙腈水（1+1）稀釋定容至1.0 mL，溶液過0.22 μm尼龍濾膜，液相色譜測定。

1.3.3色譜條件

色譜柱：C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流速：1.0 mL·min-1；進樣量10 μL；柱溫：40 ℃；流動相A：甲醇溶液；流動相B：水；洗脫程序：70%甲醇（A）等度洗脫；檢測波長：270 nm；檢測器采集頻率：500 ms；外標法定量。

2 結果與分析

2.1 標準譜圖

本文采用高效液相色譜法-紫外檢測器測定吡蟲啉，檢測波長為270 nm。得到較好的檢測結果，保留時間為4.922 min，每次樣品分析的時間小于10 min，大大縮短了GB/T 23379—2009中梯度洗脫的分析時間。色譜圖如圖1所示。

圖1 吡蟲啉標準溶液色譜圖

2.2 標準曲線

依 次 測 定 濃 度0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1、0.50、 μg·mL-1和1.00 μg·mL-1標準工作液，進樣量10 μL，以濃度為橫坐標，峰面積響應值為縱坐標，得到線性回歸方程，線性關系良好。線性方程為A=57.611 34C+0.437 91（R=0.999 366）。

2.3 凈化方法

依據1.3.2處理方法，添加濃度為2倍檢出限即0.04 mg·kg-1時，分別采取固相萃取和QuEChERS凈化，比較兩種方法的峰面積和信噪比。通過對比發現，固相萃取法信噪比大，凈化效果較優于QuEChERS法，但QuEChERS方法的回收率更高，詳見表1。

表1 QuEChERS與固相萃取法的比較

2.4 準確度和精密度

分別選定青菜、白菜和蘋果空白樣品，添加濃度 為0.04 mg·kg-1、0.06 mg·kg-1、0.20 mg·kg-1的 標準溶液，按QuEChERS方法進行處理（n=6），計算加標回收率和精密度，見表2。3種果蔬的加標回收率為80.2%～110.2%，精密度為1.3%～4.8%。符合實驗室方法的一般要求（回收率在70%～120%質檢，偏差小于10%）。

表2 吡蟲啉的回收率和相對標準偏差（n=6）

3 結論

本研究基于GB/T 23379—2009和NY/T 761—2008，應用高效液相色譜法建立了一種處理簡單、快速、準確定量分析水果中吡蟲啉的方法，與GB/T 23379—2009相比，簡化了提取、凈化過程，通過等度洗脫縮短了檢測時間，提高了檢測靈敏度。結果顯示，該方法可在10 min內完成吡蟲啉的檢測，具有良好的精確度和準確度，在0.05～1.00 μg·mL-1與 信 號 響 應 值 呈 現 良 好 的 線性關系，線性相關系數大于0.999，檢出限遠低于

0.02 mg·kg-1，加標回收率為80.2%～110.2%，相對標準偏差為1.3%～4.8%。