王繼升 鮑丙豪 鄧 省 馮雋龍 李海松
北京中醫藥大學東直門醫院男科,北京 100700
[關鍵字]菟絲子;枸杞子;男性不育癥;增殖;凋亡
男性不育癥是指夫婦有規律性生活1 年以上,未采用避孕措施,由于男方因素造成女方無法自然受孕[1]。研究表明,有10%~15%的夫婦面臨不孕不育的困擾[2]。中醫學認為,腎精虧虛是導致男性生精功能障礙的重要病因[3-4],而菟絲子-枸杞子藥對是臨床中常用的補腎填精藥物組合,在臨床上被廣泛用于少弱精子癥的治療[5-6]。
精原細胞是精子生成的基礎,本課題組既往研究表明,菟絲子-枸杞子可對精原細胞有修復作用[7-9]。本研究擬觀察菟絲子-枸杞子對精原細胞的增殖、周期及超微結構的治療作用,為補腎填精法治療男性不育癥提供依據。
動物:北京維通利華有限公司提供6 周齡SPF 級雄性SD 大鼠20 只,體重(200±20)g,主要用于含藥血清制備,動物許可證號:SCXK(京)2016-0006,動物合格證號:1100111911000582。實驗實施、動物喂養均在北京中醫藥大學東直門醫院(以下簡稱“我院”)重點實驗室動物中心進行,飼養條件依照實驗室動物標準條件。
細胞:精原細胞購自武漢普諾賽公司(貨號:CL-0600),當細胞覆蓋率達70%~80%時,按1∶5 比例傳代培養,48 h 更換完全培養基。本研究通過我院動物倫理委員會審查(NO:19-27)。
雷公藤多苷(批號:130801,每片10 mg),左卡尼汀口服液(批號:130801),菟絲子-枸杞子免煎顆粒劑各15 g,均購自北京康仁堂股份有限公司。細胞凋亡(T2190)、細胞周期(CA1510)、線粒體膜電位(M8650)試劑盒均購自Solarbio 公司。……