循環miR-361-5p、miR-223 及miR-146ɑ 水平與ACS 患者冠脈介入術后近期預后的關系

邱勛霧 李昭祺 蕭少武

急性冠狀動脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）是一種臨床常見的急危重癥［1］。隨著醫學技術的發展，近年來ACS 的診療水平明顯提高，但因主要不良心血管事件（Major Adverse Cardiovascular Events，MACE）的發生率仍居高不下，因此患者預后質量仍未有明顯改善［2］。目前臨床上用于評估ACS患者預后的指標較多，但均存在一定局限性［3］。miRNA 是一組單鏈非編碼小分子RNA，近年來有研究發現其與多種疾病進程及預后密切相關，最早有學者提出血漿miR-223水平與心血管事件存在相關性［4］。而miR-146ɑ在腎臟、心臟等組織中呈高表達，有研究顯示［5］其在動脈粥樣硬化斑塊中高表達。miR-361-5p可調節血管內皮生長因子表達，在冠心病等相關疾病中起一定作用［6］。許佳昕等［7］的研究認為miRNA可能與ACS病變程度相關。本研究旨在通過探討miRNA表達水平與ACS患者冠脈介入術后近期預后的關系，分析其在ACS患者預后評估中的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020 年12 月至2021 年12 月就診于文昌市人民醫院心血管內科的196 例行冠脈介入術ACS 患者臨床資料。納入標準：①符合歐洲心臟病學會急性ST 段抬高型心肌梗死（ST-segment elevation myocardial infarction，STEMI）［8］和《非ST 段抬高急性冠脈綜合征診斷和治療指南》［9］；②患者均符合手術指征，行冠脈介入術；③所有患者均知情本研究并簽署同意書。排除標準：①嚴重心律失常者；②急性心衰患者；③合并嚴重感染或惡性腫瘤者；④嚴重血液系統疾病、自身免疫性疾病者。本研究經文昌市人民醫院倫理委員會審核并批準。

1.2 臨床資料收集

一般臨床資料包括年齡、性別、吸煙、飲酒、糖尿病等。收集所有患者入院次日外周靜脈血12 mL 用于血常規、肝腎功能指標、實驗室指標及miRNA 定量。血常規指標［白細胞（white blood cell，WBC）、中性粒細胞比例（neutrophil，NEUT）、淋巴細胞比例（Lymphocyte ratio，LY）］、肝腎功能指標［總膽固醇（Total Cholesterol，TC）、三酰甘油（triacylglyceride，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（Low-Density Lipoprotein Cholesterol，LDL-C）、尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、肌酐（creatinine，Cr）、尿酸（Uric-Acid，UA］、實驗室指標［同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）、高 敏C 反 應 蛋 白（Highly Sensitive C Reactive Protein，hs-CRP）、肌鈣蛋白I（Troponin I，Tn I）、B 型尿鈉肽（Brain natriuretic peptide，BNP）］、miRNA（miR-361-5p、miR-223 及miR-146a）。其中TC、LDL-C、Hcy 采用酶比色法，TG、BUN、UA 采用比色法，Cr 采用酶學法，其余采用化學發光法。采用實時熒光定量PCR 法檢測，按TRlzol 法提取總RNA，按試劑說明書提示準備PCR 擴增體系。采用2-ΔΔCt法計算miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ表達水平相對定量值。

1.3 隨訪與分組

所有ACS 患者自出院后均隨訪6 個月，分別在術后1、3、6 個月采用門診復查、電話等方式進行隨訪并記錄發生（主要不良心臟事件）MACE 事件，包括：心源性死亡、再發ACS、再發心肌梗死、繼發心力衰竭及再發心絞痛致入院。以ACS 患者隨訪期間是否發生MACE 分為MACE 組（n=29）和未發生MACE 組（n=167）。

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0 軟件進行數據處理，計數資料以n（%）表示，采用χ2檢驗。采用多因素Logistic 回歸分析循環miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ水平與ACS 患者冠脈介入術后近期預后的關系；采用受試者工作特征（ROC）曲線評估循環miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ水平預測ACS患者發生MACE的診斷效能。以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 196 例ACS 患者隨訪期間發生MACE 情況

196 例ACS 患者共發生MACE29 例（14.79%），其中發生心源性死亡3 例（1.53%）、再發ACS6 例（3.06%）、再發心肌梗死8 例（4.08%）、繼發心力衰竭5 例（2.55%）及再發心絞痛7 例（3.57%）。

2.2 影響ACS 患者冠脈介入術后近期預后的單因素分析

單因素結果顯示，兩組患者年齡、Cr、Tn I、BNP、miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ水平比較差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 影響ACS 患者冠脈介入術后近期預后的單因素分析［n（%）］Table 1 Univariate analysis of short-term prognosis of patients with ACS after coronary intervention［n（%）］

2.3 影響ACS 患者冠脈介入術后近期預后的多因素分析

Logistic 回歸分析結果顯示，miR-223是影響ACS 患者冠脈介入術后近期預后的保護因素（P＜0.05），miR-361-5p、miR-146ɑ是影響ACS 患者冠脈介入術后近期預后的獨立危險因素（P＜0.05）。見表2。

表2 影響ACS 患者冠脈介入術后近期預后的多因素分析Table 2 Multivariate analysis of factors affecting the short-term prognosis of patients with ACS after coronary intervention

2.4 循環miR-361-5p、miR-223 及miR-146ɑ 預測ACS 患者發生MACE 的ROC 曲線分析

通過繪制ROC 曲線得出，循環miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ預測ACS 患者發生MACE 的曲線下面積（AUC）分別為0.763、0.701、0.794（P＜0.05）。見表3、圖1。

表3 循環miR-361-5p、miR-223 及miR-146ɑ 預測ACS患者發生MACE 的ROC 曲線分析Table 3 ROC curve analysis of circulating miR-361-5p，miR-223 and miR-146ɑ in predicting the occurrence of MACE in patients with ACS

圖1 ROC 曲線Figure 1 ROC curve

3 討論

冠心病是我國心腦血管疾病中致死率位居首位，近年來發病率呈上升趨勢且呈年輕化，給患者及社會醫療帶來極大的經濟負擔［10］。ACS 是冠心病中的危急重癥。研究證實，ACS 的發生發展與冠脈的不穩定硬化斑塊、斑塊鈣化、破裂等造成冠脈腔狹窄有關［11］。目前臨床上用于診斷冠脈病變程度的金標準是CAG，但其檢查費用昂貴，需患者提前預約，為創傷性檢查，存在一定風險，患者接受程度不高，臨床應用具有局限性，進而影響ACS冠脈病變的早期診斷和后續治療方案的抉擇［12］。

有研究報道，miRNA 在ACS 患者行冠脈介入術后冠脈再狹窄中有較高的診斷價值［13-14］。miR-146ɑ可通過調控靶基因，參與心血管疾病、腫瘤等多種疾病的發展進程。miR-361-5p是一種與腫瘤存在相關性的miRNA，其可調控下游靶基因在多個階段發揮功能進而參與腫瘤進展［15］。糖尿病患者發生缺血性腦卒中與miR-223低表達有關，miR-223水平呈低表達患者發生缺血性腦卒中的風險更高，其原因可能是miR-223 低表達造成血小板活性升高，從而使缺血性腦卒中的發病率更高。以上研究均提示miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ水平在冠心病發生發展中起重要作用。

既往已有研究表明miR-361-5p、miR-223及miR-146a 與心血管疾病進程密切相關。本研究進一步分析這三種血清miRNA 在ACS 患者預后中表達水平的差異。結果顯示，兩組年齡、Cr、Tn I、BNP、miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ水平差異有統計學意義。將上述因素納入Logistic 回歸分析，結果顯示miR-223是影響ACS 患者冠脈介入術后近期預后的保護因素，miR-361-5p、miR-146ɑ是影響ACS 患者冠脈介入術后近期預后的獨立危險因素。在巨噬細胞中miR-223過表達可顯著延緩脂質沉積，而miR-223低表達則可誘導脂質沉積，miR-223能夠調控脂蛋白和膽固醇代謝。而載脂蛋白E 能夠抑制NF-κB 通路調控miR-146ɑ表達水平。在心肌內皮細胞中，miR-223可通過降低RPSKB1 的表達，從而調控RPSKB1/H1F1α 信號通路，起到抑制血管生成的作用。同時本研究通過繪制ROC 曲線得出，循環miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ預測ACS 患者發生MACE 的曲線下面積（AUC）分別為0.763、0.701、0.794，表明三種血清miRNA表達水平在預測ACS預后方面有較高的診斷價值。

綜上所述，隨著冠脈病變程度加重，ACS 患者 循 環miR-361-5p、miR-146ɑ水 平 表 達 水 平 升高，miR-223水平降低，與MACE 發生率相關，提示miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ有可能成為輔助ACS 預后評估的潛在標志物。