廈門地區(qū)3 805例女性HPV感染情況分析*

陳海明，陳曉銘，王前明，逯曉輝△

1.廈門大學附屬第一醫(yī)院檢驗科/廈門市基因檢測重點實驗室，福建廈門361001；2.藥學與醫(yī)學技術(shù)學院醫(yī)學檢驗系，福建莆田351100

人乳頭瘤病毒(HPV)是一種屬于乳多空病毒科的乳頭瘤空泡病毒A屬，是球形DNA病毒，它可以引起人類皮膚和黏膜的鱗狀上皮細胞增殖，人類是其唯一的宿主，持續(xù)感染是宮頸癌的致病因素[1-3]。目前經(jīng)鑒定分離的HPV亞型共有200多種，其中有近40種亞型和宮頸疾病具有相關(guān)性。HPV根據(jù)致病力高低可分為高危型和低危型。低危型HPV與尖銳濕疣及呼吸道中的多發(fā)性乳頭瘤相關(guān)，但很少導致癌癥；高危型HPV持續(xù)感染與宮頸癌、陰道癌和肛門癌、復發(fā)性呼吸道乳頭狀瘤病和某些頭頸部惡性腫瘤相關(guān)，尤其與宮頸癌的發(fā)生關(guān)系密切[4-5]。因此，對易感人群進行HPV早期篩查及盡早接種HPV疫苗，有助于降低宮頸癌的發(fā)病率[6]。相關(guān)研究顯示，HPV感染具有區(qū)域和群體特性，不同國家、地區(qū)和人群之間HPV的流行和基因型分布存在顯著的差異[7]。為了解本地區(qū)女性HPV的感染特征，為區(qū)域的宮頸癌防治及HPV疫苗研發(fā)提供科學依據(jù)，本研究對廈門地區(qū)3 805例女性的HPV微流控芯片技術(shù)檢測結(jié)果進行了回顧性分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年1月至2019年12月于廈門大學附屬第一醫(yī)院門診就診及體檢部健康查體的女性患者共計3 805例作為研究對象，年齡16～89歲，平均(37.57±8.25)歲。本次調(diào)查研究對象納入標準：(1)自愿行HPV 24種分型檢測項目的初診女性；(2)檢測前3天無陰道內(nèi)藥物使用情況；(3)檢測前24 h內(nèi)無發(fā)生性行為且非處于經(jīng)期狀態(tài)。排除標準：(1)檢測時處于妊娠期；(2)有凝血功能障礙或生殖系統(tǒng)出血；(3)有其他嚴重的器質(zhì)性疾病；(4)檢測前3天內(nèi)進行過陰道沖洗。

1.2儀器與試劑 核酸芯片檢測儀(BHF-1型)、臺式高速冷凍離心機(H2500R型)、漩渦混勻(VORTEX型)、生物安全柜(Hfsafe-1500型)、水浴箱(HH.W21.6008型)等。HPV核酸檢測試劑盒(微流控生物芯片法)購自北京博暉創(chuàng)新生物技術(shù)股份有限公司。

1.3方法

1.3.1標本采集與運輸 采用專用宮頸脫落細胞采集器采集標本。由婦科醫(yī)生清潔患者宮頸口，用宮頸刷在宮頸口順時針或逆時針旋轉(zhuǎn)數(shù)圈得到宮頸脫落細胞標本，然后將標本放入采集器，貼好條碼，標本采集后在1周內(nèi)檢測完畢。

1.3.2標本檢測 采用微流控芯片技術(shù)定性檢測標本中24種HPV基因亞型，涵蓋18種高危型(HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV73、HPV82、HPV83)和6種低危型(HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44、HPV81)。先進行標本處理，將標本洗刷下來，并在管壁上將標本刷擠干，吸1 mL洗脫液至1.5 mL離心管中，離心后保留300 μL的上清液，混勻備用；然后，將標本加入微流控芯片加樣孔中。按照儀器操作程序進行檢測，然后用配套分析軟件自動對標本檢測結(jié)果進行判讀。

1.3.3結(jié)果判讀 陽性、陰性結(jié)果判定：雜交膜的SP點(3個)的GB-50點有陽性斑點，內(nèi)參質(zhì)控點(3個)的GB-50點有陽性斑點，且有HPV探針陽性斑點出現(xiàn)，提示標本為該探針對應亞型陽性；若無HPV探針陽性斑點出現(xiàn)，提示標本HPV陰性。其他可能結(jié)果說明：若內(nèi)參質(zhì)控點(3個)的GB-50點有陽性斑點，無論GB-20和GB-2點有或沒有陽性斑點，均提示內(nèi)參擴增成功，不影響結(jié)果判定；若雜交膜的空白對照點或陰性對照點呈陽性，則提示試驗過程可能發(fā)生污染，試驗不成功，建議重復試驗；若雜交膜的SP點(3個)有陽性斑點，但內(nèi)參質(zhì)控點的GB-50點無陽性斑點，提示標本內(nèi)參雜交失敗，需對該標本做重復試驗，若重復試驗GB-50點仍無陽性，則判定標本采集不符合要求。

1.4統(tǒng)計學處理 采用SPSS26.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理。計數(shù)資料采用例數(shù)或率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1HPV感染檢出情況 3 805例患者中HPV陽性1 021例，檢出率為26.83%(1 021/3 805)；其中單一感染構(gòu)成比為71.99%(735/1 021)，二重感染為18.32%(187/1 021)，三重感染為7.05%(72/1 021)，四重感染為1.76%(18/1 021)，五重感染為0.59%(6/1 021)，六重感染為0.20%(2/1 021)，七重感染為0.10%(1/1 021)；二重及以上感染稱為多重感染，則廈門地區(qū)HPV多重感染構(gòu)成比為28.01%(286/1 021)。可見多重感染構(gòu)成比顯著低于單一感染，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=6.8023，P<0.05)。

2.2HPV亞型分布情況 1 021例HPV陽性患者中，HPV低危型中檢出率最高的是HPV81型(2.18%)，其次為HPV42型(1.71%)、HPV6型(1.39%)、HPV44型(1.08%)、HPV43型(1.00%)和HPV11型(0.68%)；HPV高危型中以HPV52型檢出率最高(6.57%)，其次為HPV16型(3.63%)、HPV58型(3.00%)、HPV51型(2.60%)、HPV39型(1.92%)；24種型別中檢出率最低的是HPV83型(0.03%)，僅檢出1例。見表1。

表1 1 021例HPV陽性患者24種HPV亞型分布情況

2.3不同年齡段女性HPV感染分布情況 將研究對象依據(jù)年齡劃分為≤20歲、>20～30歲、>30～40歲、>40～50歲、>50～60歲、>60～70歲、>70～89歲年齡段。分析結(jié)果顯示，>30～40歲、>40～50歲年齡段女性HPV篩查人數(shù)較多，>70～89歲年齡段女性HPV篩查人數(shù)最少；≤20歲年齡段女性檢出率(38.46%)最高，其次為>50～60歲年齡段(36.34%)，>40～50歲年齡段最低(21.81%)。單一感染檢出率最高的年齡段是>50～60歲(25.99%)，最低的年齡段是≤20歲(12.82%)；多重感染檢出率以≤20歲年齡段女性最高(25.64%)，>30～40歲年齡段女性最低(5.77%)。不同年齡段的HPV檢出率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同年齡段HPV感染情況[n(%)]

3 討 論

HPV可以通過感染人體生殖器、皮膚黏膜等引起多種感染性疾病和導致多種良惡性腫瘤的發(fā)生。研究表明，HPV低危型可能導致女性外陰尖銳濕疣，而高危型則較易引起宮頸癌、陰道癌等病變[8]。宮頸病變的影響因素甚多，持續(xù)性高危型HPV感染是誘發(fā)宮頸癌的重要病因之一[9-10]。相關(guān)研究表明，不同區(qū)域女性的HPV感染情況不同，且HPV亞型分布與年齡密切相關(guān)[11-13]。因此，了解各個地區(qū)女性HPV感染的亞型分布及不同年齡段HPV亞型分布特點對該地區(qū)的宮頸癌防治工作有較高的指導意義。

在本研究中，HPV最多見的亞型是HPV52、HPV16、HPV58、HPV51、HPV39型，與吳凱[14]對福建地區(qū)女性HPV感染的流行病學特征的結(jié)果相似。本研究結(jié)果顯示，廈門地區(qū)HPV檢出率(26.83%)顯著高于新疆維吾爾自治區(qū)[15](14.55%)和粵東地區(qū)[16](16.94%)，低于黑龍江地區(qū)[17](32.19%)，但與濟寧地區(qū)[18](24.2%)和南充地區(qū)[19](27.18%)相近。

臨床患者HPV感染型別呈多樣性。本研究結(jié)果顯示，廈門地區(qū)單一感染、雙重感染、三重感染、四重感染、五重感染、六重感染和七重感染的構(gòu)成比依次為71.99%、18.32%、7.05%、1.76%、0.59%、0.20%、0.10%，說明該地區(qū)女性HPV感染主要以單一感染為主，雙重感染次之。3 805例女性患者標本中同時檢出7種HPV亞型的僅為1例。相關(guān)研究數(shù)據(jù)顯示，HPV多重感染對人體的影響比單一感染大，且多重感染的患者患宮頸癌的風險更高[20]。

有研究表明，HPV感染和年齡密切相關(guān)[21]。本研究結(jié)果顯示，廈門地區(qū)女性HPV檢出率最高的年齡段為≤20歲，且該年齡段HPV多重感染檢出率也最高(25.64%)，可能與女性性生活年齡逐漸年輕化、衛(wèi)生保健知識較為缺乏等原因有關(guān)。本研究顯示，廈門地區(qū)參與HPV檢測人員多為>20～50歲年齡段女性，占85.94%(3 270/3 805)。原因可能為該年齡段女性的衛(wèi)生保健意識較強，且經(jīng)濟相對獨立，所以主動就診的人數(shù)較多。同時本研究數(shù)據(jù)還顯示，該年齡段女性的HPV檢出率較高，說明HPV感染可能與性生活活躍程度有關(guān)。

綜上所述，廈門地區(qū)女性HPV檢出率較高，不同年齡段的HPV亞型分布不同，應加強本地區(qū)的HPV相關(guān)健康知識宣傳，特別是低年齡段(≤20歲)女性的生殖健康教育，大力推廣HPV疫苗預防接種。