乙型肝炎病毒核酸反應性獻血者歸隊方案探討

劉智敏 霍寶鋒 王莉娟 梁海燕 林奕斌 何 輝 張天弼

廣東省韶關市中心血站檢驗科，廣東韶關 512026

血液篩查是防止乙型肝炎病毒（hepatitis bvirus，HBV）、丙型肝炎、艾滋病等多種傳染性疾病發生的重要手段，能夠防止供受血間的交叉感染，保障臨床用血安全[1]。既往，獻血者HBV篩查方法為常規酶聯免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測，隨著近年來病毒核酸檢測（nucleic acid test，NAT）技術的逐步完善，采供血機構將NAT納入無償獻血的篩查策略，以提高血液安全性[2-3]。研究指出，NAT聯合ELISA檢測應用于血液篩查中雖提高檢測靈敏度，但特異性往往有所下降，加之在篩查血液標本時受試劑、技術及獻血者自身因素的影響，多存在假反應性結果[4]。HBV獻血者NAT假反應性不僅在一定程度上造成獻血資源流失，也給獻血者自身帶來心理負擔，甚至造成醫療糾紛。因此，為減少獻血者流失和保護獻血者的權利，完善獻血后續服務，建立無償獻血者歸隊策略十分必要。中國輸血協會團隊于2019年制定的《血液篩查反應性獻血者歸隊指南》[5]中指出單試劑HBV表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）反應性、NAT 檢測無反應，獻血者屏蔽6個月后可進入歸隊流程，但HBV NAT存在假反應情況，對于HBV NAT反應性獻血者的歸隊方案值得探討和研究?；诖?，本研究旨在探討HBV NAT反應性獻血者可行性歸隊方案?，F報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

分析2015年1月至2020年12月在韶關市中心血站無償獻血中HBV NAT反應性且ELISA無反應性的獻血者，召回63例進入歸隊流程，本研究經本站醫學倫理委員會批準，獻血者對本研究均知情同意。獻血者中男41例，女22例；年齡18～55歲，平均（30.76±3.15）歲；初次獻血15例，獻血2～10次39例，獻血10次以上9例。

1.2 方法

1.2.1 獻血者追蹤復查流程 由獻血服務科室專人通知HBV NAT反應性獻血者，解釋獻血歸隊過程及意義，由獻血者自行選擇是否歸隊，本研究共有63例HBV NAT反應性獻血者自愿進入歸隊流程。

1.2.2 復檢標本采集 采集63例HBV NAT反應性獻血者初次反應性結果后第3、6個月時外周靜脈血10 ml，分別置于血清學標本管（EDTA-K2抗凝）和NAT標本管（EDTA-K2抗凝，帶分離膠）中，每個試管各5 ml血液標本，其中血清學標本管以離心力1600 g離心8 min，NAT標本管以離心力2000 g離心15 min，均在72 h內完成相關檢測。

1.2.3 試劑和儀器 HBsAg ELISA檢測（北京萬泰、上?？迫A生物）；檢測HBV核酸試劑（中山大學達安基因）。ELISA檢測所用主要儀器：TECAN EVO200全自動加樣儀、BEHRING（Ⅲ）ELISA分析系統。NAT病毒檢測主要儀器：DA3000核酸提取儀（達安）、ABI7500核酸擴增儀。

1.2.4 HBV NAT反應性獻血者能否符合歸隊獻血資格判定 參照《血液篩查反應性獻血者歸隊指南》[5]制訂判定標準。（1）合格判定：63例HBV NAT反應性獻血者初次反應性結果后第3、6個月時檢測的ELISA雙試劑檢測陰性/NAT陰性，則為合格，不再屏蔽獻血資格，允許歸隊獻血并建立相關檔案，若歸隊獻血后再次出現ELISA或NAT陽性，則移出歸隊流程，并將獻血資格永遠屏蔽。（2）不合格判定：①在初次反應性結果后第3個月第1次檢測1種或2種試劑出現ELISA反應性或NAT反應性，則不需要進行第6個月時的第2次檢測，直接淘汰移出歸隊程序；②若第1次結果為合格，第2次檢測出現不合格情況（出現①的情況），則淘汰并屏蔽獻血資格，且移出歸隊程序。

1.3 統計學處理

采用SPSS 25.0統計學軟件進行數據處理，計量資料均經Shapiro-Wilk正態性檢驗，符合正態分布以均數±標準差（）表示；計數資料以[n（%）]表示。

2 結果

2.1 HBV NAT反應性獻血者歸隊復查人數情況

2015—2020 年獻血人數共146 319例，共召回63例歸隊復查。見表1。

表1 HBV NAT反應性獻血者歸隊復查人數情況

2.2 HBV NAT反應性獻血者第1次追蹤檢測結果

63例HBV NAT反應性獻血者第1次追蹤檢測結果ELISA篩查反應性1例，占1.59%；NAT篩查反應性9例，占14.29%。見表2。

表2 HBV NAT反應性獻血者第1次追蹤檢測結果[n=63，n（%）]

2.3 HBV NAT反應性獻血者第2次追蹤檢測結果

53例ELISA無反應性/HBV DNA無反應性獻血者第2次追蹤檢測結果ELISA篩查反應性為0例，NAT篩查反應性為5例，占9.43%。見表3。

表3 HBV NAT反應性獻血者第2次追蹤檢測結果[n=53，n（%）]

2.4 歸隊獻血資格方案設計

本研究召回63例HBV反應性獻血者經第1次追蹤檢測后直接淘汰ELISA篩查反應性、NAT篩查反應性共10例，移除歸隊程序，其余53例第1次追蹤檢測為ELISA無反應性/HBV DNA無反應性獻血者進行第2次追蹤檢測后，直接淘汰NAT篩查反應性5例，移除歸隊程序；經2次追蹤復查結果顯示，有76.19%（48/63）的獻血者ELISA無反應性/HBV DNA無反應性，符合歸隊獻血資格。

3 討論

HBV為常見的感染性疾病，病毒攜帶率高、傳染性強，對無償獻血者血液常規ELISA篩查后行NAT能夠有效提高血液的安全性，降低HBV傳染風險[6-7]。但隨NAT在血液篩查領域的廣泛應用，有許多獻血者因HBV NAT假反應性結果或獻血處于病毒感染康復期被永久屏蔽，導致獻血者流失，加劇采供血與需求矛盾[8]。但有相當部分此類獻血者于后期自身完全清除病毒而自然恢復，符合獻血體檢要求。因此，對HBV NAT反應性獻血者進行追蹤調查，探討其歸隊策略對穩定獻血隊伍、保障血液資源具有重要意義。

獻血者歸隊策略是為減少獻血者流失、保留固定獻血者的一種手段，通過對暫時屏蔽的獻血者進行復檢，從而證明其血液安全性，可繼續進行獻血，緩解血液供求不足[9-10]。本研究結果顯示，2015—2020年獻血人數共146 319例，共召回63例歸隊復查；63例HBV NAT反應性獻血者第1次追蹤檢測結果ELISA篩查反應性1例，占1.59%；NAT篩查反應性9例，占14.29%；53例ELISA無反應性/HBV DNA無反應性獻血者第2次追蹤檢測結果ELISA篩查反應性為0例，NAT篩查反應性為5例，占9.43%；經2次追蹤復查結果顯示，有76.19%（48/63）的獻血者ELISA無反應性/HBV DNA無反應性，符合歸隊獻血資格，對此類獻血者的獻血資格屏蔽需要仔細考慮，這為HBV NAT反應獻血者是否建立歸隊方案及其歸隊流程提供數據支持。本研究第1次追蹤復檢是在HBV NAT初次反應性結果后第3個月，此時間段能夠基本將HBV的窗口感染期覆蓋，而在6個月的第2次追蹤復檢時，仍有9.43%的獻血都出現不合格情況，可見對HBV反應性獻血者只屏蔽3個月仍存在一定風險，難以達到獻血者免疫預后轉歸的間隔時間，建議歸隊復檢間隔時間至少為6個月更能保障血液安全[11-12]。

本研究中HBV NAT反應性獻血者經2次復檢仍具有一定的不合格率，由于隱匿性HBV獻血感染者病毒載量較低，會呈現低水平的波動狀態，即使在規定間隔時間進行2次復檢仍存在合格可能性，但仍不能確保獻血者自身完全清除病毒，是輸血傳播HBV的潛在危險[13-14]。文獻指出，HBV NAT反應性獻血者歸隊復檢ELISA、NAT均無反應性，補充化學發光法檢測有89.5%為HBV表面抗體（hepatitis B surface antibody，抗 -HBs）和 /或HBV 核心抗體（hepatitis B core antibody，抗 -HBc）反應性[15]。由此，建議對HBV NAT反應性獻血者的歸隊復檢增加化學發光法等補充試驗，以制訂更嚴密的安全歸隊策略，從而更加安全、合理、有效地保障血液質量，確保血液檢測結果準確性，減少血源流失，完善獻血后續服務。本研究局限之處在于獻血者的數據會隨著后續的獻血行為及時間推移發生變化，所以本研究結果受數據截取時間影響較大。

綜上所述，HBV NAT反應性獻血者中存在假反應性結果，也存在感染康復期群體，開展獻血歸隊方案可完善獻血后續服務，為獻血者歸隊的科學管理程序提供依據，有利于血篩檢測結果確證，減少血源流失。