槽料及湖羊肉肝中農(nóng)藥殘留測定

汪建妹，錢鳴蓉，楊桂玲，孫淑媛

(1.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與營養(yǎng)研究所，浙江 杭州 310021；2.浙江樹人大學(xué) 交叉科學(xué)研究院，浙江 杭州 310015；3.長興縣農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)總站，浙江 長興 313199)

湖羊具有成熟較早、發(fā)情期長、二胎多羔、生長較快及改良性能極佳的特點(diǎn)，且由于湖羊的肉質(zhì)較好，能耐高溫潮濕，成為部分地區(qū)飼養(yǎng)的綿羊品種之一。湖羊具有較好的養(yǎng)殖和發(fā)展前景，因此，湖羊養(yǎng)殖成為精準(zhǔn)扶貧戰(zhàn)略和脫貧產(chǎn)業(yè)的重要發(fā)展方向[1]。近年來，湖羊的養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展，養(yǎng)殖規(guī)模逐漸擴(kuò)大，養(yǎng)殖模式趨向于規(guī)模化和標(biāo)準(zhǔn)化[2]。

鑒于飼料價(jià)格的上漲，較多長興地區(qū)規(guī)模化湖羊養(yǎng)殖主體考慮到飼養(yǎng)成本和資源化再利用，在育肥期間飼喂中藥渣，使用的中藥渣一般來源于品牌中藥生產(chǎn)商，多為藥食兩用、滋補(bǔ)型中藥藥渣，避免了一些副作用強(qiáng)的藥渣。中藥在種植過程中會(huì)使用殺蟲劑、殺菌劑等農(nóng)藥[3-4]，這些農(nóng)藥殘留也可能被羊攝入而殘留在產(chǎn)品中，可能對羊肉產(chǎn)品產(chǎn)生不良影響。

近年文獻(xiàn)報(bào)道，在金銀花中檢出水胺硫磷等高毒有機(jī)磷農(nóng)藥[5]。李家春等[6]對5種中藥中有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行分析，其中50批次樣品中有3批次檢出甲胺磷。何清彥等[7]對10種藥食兩用中藥材中的有機(jī)氯農(nóng)藥殘留情況進(jìn)行分析表明，30批藥材均被檢出有禁用農(nóng)藥六六六、滴滴涕。由于有機(jī)氯農(nóng)藥難降解，易累積，其對環(huán)境和人體的影響不容忽視[8-9]。李慧君等[10]對部分中藥材農(nóng)藥殘留污染研究報(bào)道進(jìn)行匯總分析顯示，我國中藥材農(nóng)藥殘留狀況普遍存在，特別是有機(jī)氯、有機(jī)磷和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥在中藥材中均有檢出和超標(biāo)。因此，在對中藥渣進(jìn)行利用時(shí)，其農(nóng)藥殘留值得關(guān)注。

本研究擬針對湖羊健康養(yǎng)殖全鏈條中的上市產(chǎn)品(羊肉、羊肝)以及湖羊健康養(yǎng)殖中的槽料樣品開展農(nóng)藥殘留排查，全面識(shí)別湖羊生產(chǎn)過程中的質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)，對湖羊養(yǎng)殖生產(chǎn)提供更加科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹笇?dǎo)，對養(yǎng)殖全鏈條的風(fēng)險(xiǎn)管理具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 儀器、材料與試劑

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(5種農(nóng)用生長調(diào)節(jié)劑、56種殺蟲劑、17種殺菌劑和2種除草劑)均購自于德國Dr.Ehrenstorfer公司；環(huán)己烷(色譜級(jí))、乙腈(色譜級(jí))、甲醇(色譜級(jí))、甲苯(色譜級(jí))和乙酸乙酯(色譜級(jí))均購自于德國Merck公司；超純水由美國Millipore的水凈化系統(tǒng)制得；分析純的MgSO4、NaCl等均購自于上海國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；GC-MS/MS 7000C氣相色譜三重四級(jí)桿質(zhì)譜(美國Agilent公司)。

1.2 中藥渣飼喂試驗(yàn)

為了考察飼喂中藥渣對湖羊安全的影響，項(xiàng)目組在一龍養(yǎng)殖基地，選擇生日齡、體重、胎次，同胞數(shù)等相近的斷奶羔羊30只，隨機(jī)分成3組，每組10頭，性別比例一致。對照組飼喂常規(guī)日糧，試驗(yàn)組1和2分別用30%和60%的中藥渣替代對照組中的粗飼料(花生秧等)。試驗(yàn)6個(gè)月。屠宰后，分析羊肉和羊肝樣品中的農(nóng)藥殘留情況。

1.3 槽料和湖羊肉肝中農(nóng)藥殘留分析方法

中藥渣中農(nóng)藥殘留檢測參照《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》(GB 23200.113—2018)，樣本預(yù)處理及分析具體步驟如下：(1)稱取100 g中藥渣，在組織搗碎機(jī)中勻漿后放入聚乙烯瓶中待用；(2)稱取1 g勻漿樣本，采用QuEChERS(10 mL乙腈+4 g硫酸鎂+1 g氯化鈉+1 g檸檬酸鈉+0.5 g檸檬酸氫二鈉)前處理方法進(jìn)行提取，上清液用凈化小柱(900 mg硫酸鎂+150 mg N-丙基乙二胺+15 mg石墨化炭黑)凈化，試樣在40 ℃水浴中氮?dú)獯抵两桑尤? mL乙酸乙酯復(fù)溶解，過0.22 μm微孔濾膜后待測；(3)采用安捷倫7000C三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)進(jìn)行檢測，色譜柱采用14%腈丙基苯基-86%二甲基聚硅氧烷石英毛細(xì)管柱(50 m×0.25 mm×0.25 μm)，每種農(nóng)藥根據(jù)國標(biāo)方法(附錄B)和本實(shí)驗(yàn)室建立的農(nóng)藥氣質(zhì)數(shù)據(jù)庫，選擇一堆定量離子對一對定性離子進(jìn)行檢測和定量。每份樣本平行實(shí)驗(yàn)2份。

羊肉和羊肝樣品中農(nóng)藥殘留參照國標(biāo)方法GB/T 20772—2008動(dòng)物肌肉中461種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行檢測。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Multiquant V3.0.3分析UPLC-MS/MS采集后得到的數(shù)據(jù)，采用Excel 2010分析各種農(nóng)藥殘留檢出率等。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法學(xué)評(píng)估

槽料中共檢測80種農(nóng)藥，檢出30種農(nóng)藥，對其進(jìn)行分析。分別對槽料和湖羊組織樣品進(jìn)行添加回收，30種農(nóng)藥的添加濃度均為5 mg·kg-1，5次平行，計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)，按3倍信噪比計(jì)算檢出限(LOD)，以10倍信噪比計(jì)算定量限(LOQ)。表1顯示，30種農(nóng)藥在槽料中的LOD均為0.1 mg·kg-1，LOQ均為0.3 mg·kg-1；在湖羊組織樣品中，LOD在0.01～0.10 mg·kg-1，LOQ在0.03～0.30 mg·kg-1。回收率在70.5%～94.3%，RSD為0.5%～10.5%，說明該方法具有較好的精密度和準(zhǔn)確度。

表1 不同基質(zhì)中30種農(nóng)藥的LOD、LOQ、回收率和RSD

2.2 槽料中農(nóng)藥殘留分析

農(nóng)藥檢出詳細(xì)數(shù)據(jù)見表2，其中不含中藥渣的槽料為003、004、007、026-041和043，另外樣品均為含中藥渣槽料。項(xiàng)目組測定了5種農(nóng)用生長劑(6-芐基腺嘌呤、脫落酸、矮壯素、丁酰肼、烯效唑)、56種殺蟲劑、17種殺菌劑、2種除草劑(甲基立枯磷、莠去津)，檢出濃度高于1 mg·kg-1的農(nóng)藥有19種，檢出率由高到低依次為甲拌磷(35%)、水胺硫磷(26%)、桔皮素(26%)、氟啶胺(21%)、蟲螨腈(16%)、氯蟲苯甲酰胺(16%)、烯酰嗎啉(16%)、多效唑(14%)、茚蟲威(12%)、烯效唑(7%)、聯(lián)苯菊酯(7%)、三氯殺螨醇(7%)、啶蟲脒(2%)、二氯吡啶酸(2%)、炔螨特(2%)、多菌靈(2%)、克百威(2%)、唑螨酯(2%)、己唑醇(2%)。檢出率最高的農(nóng)藥甲拌磷、水胺硫磷、桔皮素和氟啶胺的檢出濃度分別為4.3～18.9、1.3～9.2、0.54～17.3和1.53～28.6 mg·kg-1。在1個(gè)批次的混合飼料中，多菌靈濃度達(dá)156.0 mg·kg-1；在另1個(gè)批次混合飼料中，啶蟲脒濃度達(dá)118.3 mg·kg-1，表明槽料中殘留多種及濃度較高的農(nóng)藥。

表2 槽料中農(nóng)殘檢出結(jié)果

含中藥渣的槽料共23批次，其中22批次有農(nóng)藥檢出，檢出率為96%。共檢出27種殺蟲劑、1種植物生長調(diào)節(jié)劑(烯效唑)和1種殺菌劑(烯酰嗎啉)，檢出農(nóng)藥的濃度在0.024～156.0 mg·kg-1，有18種農(nóng)藥檢出濃度高于1 mg·kg-1。

圖1顯示，按檢出濃度≥1 mg·kg-1計(jì)，檢出率高于20%的農(nóng)藥有9種，按其檢出率和檢出濃度依次為甲拌磷(52.2%，4.3～16.5 mg·kg-1)、水胺硫磷(43.5%，2.1～9.2 mg·kg-1)、桔皮素(43.5%，1.5～17.3 mg·kg-1)、氟啶胺(39.1%，1.5～28.6 mg·kg-1)、蟲螨腈(30.4%，4.7～19.8 mg·kg-1)、氯蟲苯甲酰胺(30.4%，1.6～36.2 mg·kg-1)、烯酰嗎啉(26.1%，1.5～1.5 mg·kg-1)、多效唑(21.7%，17.5～21.1 mg·kg-1)和茚蟲威(21.7%，1.4～20.5 mg·kg-1)。

圖1 含中藥渣槽料中農(nóng)藥檢出率

不含中藥渣的槽料有20批次，其中8批次有農(nóng)藥檢出，檢出率為40%，共檢出7種殺蟲劑和1種殺菌劑(烯酰嗎啉)，檢出農(nóng)藥濃度在0.07～18.9 mg·kg-1，濃度高于1 mg·kg-1的農(nóng)藥有4種。圖2顯示，在3批次不含中藥渣槽料中檢出有甲拌磷，檢出率為15%，檢出濃度分別為16.2、18.9和16.2 mg·kg-1。在另外3批次槽料中各檢出1種農(nóng)藥，分別為水胺硫磷(5%)、唑螨酯(3%)和烯酰嗎啉(5%)，濃度分別為1.37、3.34和1.468 mg·kg-1。

圖2 不含中藥渣槽料中農(nóng)藥檢出率

2.3 湖羊肉和肝中農(nóng)藥殘留結(jié)果分析

58批次羊組織樣品中農(nóng)殘檢出結(jié)果見表3。其中，1～19批次為飼喂中藥渣的羊組織樣品，20～29批次為不飼喂中藥渣的羊組織樣品。在飼喂含中藥渣后的羊組織樣品中，3批次羊肉和2批次羊肝中檢出多效唑，濃度在0.013～0.112 mg·kg-1；1批次羊肝中檢出聯(lián)苯菊酯，濃度為0.061 mg·kg-1，小于GB 2763—2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》對哺乳動(dòng)物內(nèi)臟中聯(lián)苯菊酯的限量值(0.2 mg·kg-1)。另外，1批次羊肝中檢出氯氟氰菊酯，濃度為0.07 mg·kg-1，大于GB 2763—2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》對羊肝中氯氟氰菊酯最大殘留限量值0.05 mg·kg-1。2批次羊肝樣品中檢出三唑酮，濃度分別為0.03和0.07 mg·kg-1，大于GB 2763—2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》中的限量值(0.01 mg·kg-1)。其余樣品未檢出農(nóng)藥殘留。

表3 羊組織樣品中農(nóng)殘檢出結(jié)果

3 小結(jié)

通過對槽料與羊肉、羊肝樣品的檢測發(fā)現(xiàn)，槽料中存在農(nóng)藥殘留污染，檢出率或檢出濃度較高的農(nóng)藥殘留有甲拌磷、水胺硫磷、桔皮素、氟啶胺、多菌靈和啶蟲脒等。研究發(fā)現(xiàn)，含有中藥渣的槽料中農(nóng)藥殘留水平高于不含中藥渣的槽料。對照羊肉和羊肝的測定結(jié)果，在飼喂中藥渣的羊肉和羊肝中測出部分農(nóng)藥，且根據(jù)GB 2761—2017規(guī)定，氯氟氰菊酯和三唑酮在羊肝樣品中存在超標(biāo)現(xiàn)象。針對中藥渣育肥湖羊，需要關(guān)注藥渣中的農(nóng)藥對羊肉產(chǎn)品的安全影響。農(nóng)藥在作物上的大量使用可能會(huì)通過槽料遷移至畜產(chǎn)品中，有必要加強(qiáng)槽料中農(nóng)藥殘留的風(fēng)險(xiǎn)控制。