分析保護劑在農藥殘留檢測中的應用

鶴壁市農產品檢驗檢測中心 劉小麗 王風英 王麗娟 張艷麗 劉尚偉

水果、蔬菜中的農藥殘留量是衡量食品安全的一項重要指標，因此，研究水果、蔬菜中農藥殘留檢測技術尤為重要。氣相色譜法檢測水果、蔬菜中農藥殘留具有快速、準確、靈敏度高，重現性好的優勢，是農藥殘留分析應用中最普遍的技術。農藥殘留氣相色譜法分析過程中通常存在很強的基質效應，從而影響檢測結果的準確性。在純溶劑標樣溶液和待測樣品溶液中加入相同數量的保護劑時，保護劑能同等程度地補償標樣溶液和樣品溶液的基質效應。同一種保護劑在不同基質中，對不同類型農藥的保護作用不同。在白菜、茄子、蘋果、梨、橘子等5 種蔬菜水果用的有機磷農藥的試驗分析中加入L-古洛糖酸-γ-內酯和D-山梨糖醇，基質補償效應明顯。

一、材料與方法

（一）試驗儀器、試劑

試驗器材有Agilent GC 7890B 氣相色譜儀（配有FPD 檢測器、自動進樣器、分流/不分流進樣口），高速分散均質機，氮吹儀，快速混勻器，電子天平，均漿機，氮吹儀。試劑有乙腈（色譜純）、丙酮（色譜純）、氯化鈉（分析純）。

（二）標準溶液的配制

試驗標準溶液由農業部環境保護科研監測所提供，試驗標準溶液質量濃度均為100μg·mL-1。有機磷標液用丙酮稀釋10μg·mL-1。

（三）分析保護劑的配制

1.配制L-古洛糖酸-γ-內酯儲備液：稱取L-古洛糖酸-γ-內酯500 mg，加入水4 mL，用乙腈定容至10 mL，冷凍保存。

2.配制D-山梨糖醇儲備液：稱取 D-山梨糖醇500 mg，加入水5 mL，用乙腈定容至10 mL，冷凍保存。

3.配制分析物保護劑溶液：吸取L-古洛糖酸-γ-內酯儲備液4 mL 和D-山梨糖醇儲備液2 mL，用乙腈定容至10 mL，冷凍保存。

（四）實驗方法

根據《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留檢測方法》（NY/T 761-2008）進行檢測。

二、試驗條件和過程

（一）氣相條件

氣相檢測條件。色譜柱VF-5MS（30 m×0.25 mm×0.25μm）；溫度80 ℃保持1 min，以20 ℃·min-1的速度上升到130 ℃，再以5 ℃·min-1的速度上升到200 ℃，再以15 ℃·min-1的速度上升到250 ℃，保持11 min。進樣體積1μL；進樣口溫度250℃，不分流進樣；檢測器溫度300℃；進樣口溫度250℃；氮氣流速30 mL·min-1；柱流速2 mL·min-1；空氣流速17 mL·min-1；氫氣流速14 mL·min-1。

（二）凈化提取，加標

1.凈化提取。試驗樣品破碎混勻后裝入塑料盒內（樣品中不含有加標農藥），準確稱取25.0 g,加入50 mL 乙腈,在勻漿機中高速勻漿2 min 后用濾紙過濾。過濾前用純水濕潤濾紙，過濾結束時用玻璃棒壓濾紙擠凈濾液。濾液收集到裝有5～7 g 氯化鈉的100 mL 具塞量筒中，蓋上蓋子，劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置30 min,使乙腈相和水相分層；用大肚管從100 mL 具塞量筒中分別吸取10.00 mL 乙腈溶液裝入2 個小燒杯中,將燒杯放在溫度80℃水浴鍋上加熱,氮吹近干；用丙酮定容至5 mL,在旋渦混合器上混勻,用一次性針管吸液，過濾膜后留用。

2.加標。未加入保護劑的加標樣品：甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、毒死蜱、馬拉硫磷、甲拌磷亞砜、水胺硫磷、三唑磷、亞胺硫磷、伏殺磷、對硫磷、二嗪磷、樂果標液質量濃度均為10μg·mL-1。分別吸500μL到25.0 g 樣品中，加標濃度為0.2μg·mL-1，分別吸1000μL 到25.0 g 樣品中，加標濃度為0.4μg·mL-1，分別吸2000μL 到25.0 g 樣品中，加標濃度為0.8μg·mL-1。凈化提取后上機測定峰面積和保留時間。加入保護劑的加標樣品：甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、毒死蜱、馬拉硫磷、甲拌磷亞砜、水胺硫磷、三唑磷、亞胺硫磷、伏殺磷、對硫磷、二嗪磷、樂果標液質量濃度均為10μg·mL-1。分別吸500μL 到25.0 g 樣品中，加標濃度為0.2μg·mL-1，分別吸1000μL 到25.0 g 樣品中，加標濃度為0.4μg·mL-1，分別吸2000μL 到25.0 g 樣品中，加標濃度為0.8μg·mL-1。凈化提取后后，加入80μL 分析物保護劑溶液，用丙酮定容至5 mL，上機測定峰面積和保留時間。

三、結果分析

（一）標準曲線相關性

下頁表1 中的13 種有機磷農藥溶劑標準工作曲線和基質標準工作曲線的相關系數在0.999 以上，線性關系非常好，符合《實驗室質量控制規范 食品理化檢測》(GB/T 27404-2008)標準要求。這就為樣品加標色譜中比較農藥殘留量提供了較好的依據。溶劑為丙酮，基質溶液為混合基質丙酮溶液(為使基質具有一定的代表性,基質種類選擇白菜、茄子、蘋果、梨、橘子的等量混合基質)。

表1 檢測結果比較（加標濃度0.20μg·mL-1）

(二)檢測結果比較

從表1 中可以看出，添加保護劑后對于基質增強效應有很大程度的補償作用,峰形及靈敏度都有極大改善。其中甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、甲拌磷亞砜、亞胺硫磷、伏殺磷、甲基對硫磷等得到了很好的補償。但添加保護劑對于顯示有基質減弱效應的毒死蜱、馬拉硫磷、水胺硫磷等并沒有顯示出補償作用。同時從表中還可以看出，添加保護劑的溶劑標與基質配標響應一致，可以有效消除基質效應。

（三）回收試驗的準確度與精密度

不加保護劑的13 種有機磷農藥用溶劑標準曲線計算時，回收率為76%～139%。其中乙酰甲胺磷樣品平行測定結果的重復性差。用溶劑標準曲線計算加保護劑的13 種有機磷農藥時，回收率為88%～115%，回收率比不加保護劑計時好。其中乙酰甲胺磷樣品平行測定結果的重復性不好。在6 次平行測定中，其峰面積隨著測定次數的增加而增加，6 次測定值的RSD 達到14%。更換進樣墊及襯管、老化色譜柱后再次測定，6 次測定值的RSD 為5%。用基質標準曲線計算不加保護劑的13 種有機磷農藥時，回收率在89%～124%，與用溶劑標準曲線計算加保護劑的13 種有機磷農藥時接近。

四、結果討論

蔬菜、水果中的13 種有機磷農藥的試驗分析過程中添加分析保護劑對大多數農藥能顯著補償由基質增強效應造成的定量誤差，同時降低了檢出限,改善了峰形，提高了靈敏度。相比利用空白基質標準曲線、頻繁維護進樣口等方法，添加分析保護劑這種方法的人工消耗少、經濟成本低，效果顯著。