分析保護劑在農(nóng)藥殘留檢測中的應(yīng)用

鶴壁市農(nóng)產(chǎn)品檢驗檢測中心 劉小麗 王風英 王麗娟 張艷麗 劉尚偉

水果、蔬菜中的農(nóng)藥殘留量是衡量食品安全的一項重要指標，因此，研究水果、蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)尤為重要。氣相色譜法檢測水果、蔬菜中農(nóng)藥殘留具有快速、準確、靈敏度高，重現(xiàn)性好的優(yōu)勢，是農(nóng)藥殘留分析應(yīng)用中最普遍的技術(shù)。農(nóng)藥殘留氣相色譜法分析過程中通常存在很強的基質(zhì)效應(yīng)，從而影響檢測結(jié)果的準確性。在純?nèi)軇藰尤芤汉痛郎y樣品溶液中加入相同數(shù)量的保護劑時，保護劑能同等程度地補償標樣溶液和樣品溶液的基質(zhì)效應(yīng)。同一種保護劑在不同基質(zhì)中，對不同類型農(nóng)藥的保護作用不同。在白菜、茄子、蘋果、梨、橘子等5 種蔬菜水果用的有機磷農(nóng)藥的試驗分析中加入L-古洛糖酸-γ-內(nèi)酯和D-山梨糖醇，基質(zhì)補償效應(yīng)明顯。

一、材料與方法

（一）試驗儀器、試劑

試驗器材有Agilent GC 7890B 氣相色譜儀（配有FPD 檢測器、自動進樣器、分流/不分流進樣口），高速分散均質(zhì)機，氮吹儀，快速混勻器，電子天平，均漿機，氮吹儀。試劑有乙腈（色譜純）、丙酮（色譜純）、氯化鈉（分析純）。

（二）標準溶液的配制

試驗標準溶液由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所提供，試驗標準溶液質(zhì)量濃度均為100μg·mL-1。有機磷標液用丙酮稀釋10μg·mL-1。

（三）分析保護劑的配制

1.配制L-古洛糖酸-γ-內(nèi)酯儲備液：稱取L-古洛糖酸-γ-內(nèi)酯500 mg，加入水4 mL，用乙腈定容至10 mL，冷凍保存。

2.配制D-山梨糖醇儲備液：稱取 D-山梨糖醇500 mg，加入水5 mL，用乙腈定容至10 mL，冷凍保存。

3.配制分析物保護劑溶液：吸取L-古洛糖酸-γ-內(nèi)酯儲備液4 mL 和D-山梨糖醇儲備液2 mL，用乙腈定容至10 mL，冷凍保存。

（四）實驗方法

根據(jù)《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留檢測方法》（NY/T 761-2008）進行檢測。

二、試驗條件和過程

（一）氣相條件

氣相檢測條件。色譜柱VF-5MS（30 m×0.25 mm×0.25μm）；溫度80 ℃保持1 min，以20 ℃·min-1的速度上升到130 ℃，再以5 ℃·min-1的速度上升到200 ℃，再以15 ℃·min-1的速度上升到250 ℃，保持11 min。進樣體積1μL；進樣口溫度250℃，不分流進樣；檢測器溫度300℃；進樣口溫度250℃；氮氣流速30 mL·min-1；柱流速2 mL·min-1；空氣流速17 mL·min-1；氫氣流速14 mL·min-1。

（二）凈化提取，加標

1.凈化提取。試驗樣品破碎混勻后裝入塑料盒內(nèi)（樣品中不含有加標農(nóng)藥），準確稱取25.0 g,加入50 mL 乙腈,在勻漿機中高速勻漿2 min 后用濾紙過濾。過濾前用純水濕潤濾紙，過濾結(jié)束時用玻璃棒壓濾紙擠凈濾液。濾液收集到裝有5～7 g 氯化鈉的100 mL 具塞量筒中，蓋上蓋子，劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置30 min,使乙腈相和水相分層；用大肚管從100 mL 具塞量筒中分別吸取10.00 mL 乙腈溶液裝入2 個小燒杯中,將燒杯放在溫度80℃水浴鍋上加熱,氮吹近干；用丙酮定容至5 mL,在旋渦混合器上混勻,用一次性針管吸液，過濾膜后留用。

2.加標。未加入保護劑的加標樣品：甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、毒死蜱、馬拉硫磷、甲拌磷亞砜、水胺硫磷、三唑磷、亞胺硫磷、伏殺磷、對硫磷、二嗪磷、樂果標液質(zhì)量濃度均為10μg·mL-1。分別吸500μL到25.0 g 樣品中，加標濃度為0.2μg·mL-1，分別吸1000μL 到25.0 g 樣品中，加標濃度為0.4μg·mL-1，分別吸2000μL 到25.0 g 樣品中，加標濃度為0.8μg·mL-1。凈化提取后上機測定峰面積和保留時間。加入保護劑的加標樣品：甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、毒死蜱、馬拉硫磷、甲拌磷亞砜、水胺硫磷、三唑磷、亞胺硫磷、伏殺磷、對硫磷、二嗪磷、樂果標液質(zhì)量濃度均為10μg·mL-1。分別吸500μL 到25.0 g 樣品中，加標濃度為0.2μg·mL-1，分別吸1000μL 到25.0 g 樣品中，加標濃度為0.4μg·mL-1，分別吸2000μL 到25.0 g 樣品中，加標濃度為0.8μg·mL-1。凈化提取后后，加入80μL 分析物保護劑溶液，用丙酮定容至5 mL，上機測定峰面積和保留時間。

三、結(jié)果分析

（一）標準曲線相關(guān)性

下頁表1 中的13 種有機磷農(nóng)藥溶劑標準工作曲線和基質(zhì)標準工作曲線的相關(guān)系數(shù)在0.999 以上，線性關(guān)系非常好，符合《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》(GB/T 27404-2008)標準要求。這就為樣品加標色譜中比較農(nóng)藥殘留量提供了較好的依據(jù)。溶劑為丙酮，基質(zhì)溶液為混合基質(zhì)丙酮溶液(為使基質(zhì)具有一定的代表性,基質(zhì)種類選擇白菜、茄子、蘋果、梨、橘子的等量混合基質(zhì))。

表1 檢測結(jié)果比較（加標濃度0.20μg·mL-1）

(二)檢測結(jié)果比較

從表1 中可以看出，添加保護劑后對于基質(zhì)增強效應(yīng)有很大程度的補償作用,峰形及靈敏度都有極大改善。其中甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、甲拌磷亞砜、亞胺硫磷、伏殺磷、甲基對硫磷等得到了很好的補償。但添加保護劑對于顯示有基質(zhì)減弱效應(yīng)的毒死蜱、馬拉硫磷、水胺硫磷等并沒有顯示出補償作用。同時從表中還可以看出，添加保護劑的溶劑標與基質(zhì)配標響應(yīng)一致，可以有效消除基質(zhì)效應(yīng)。

（三）回收試驗的準確度與精密度

不加保護劑的13 種有機磷農(nóng)藥用溶劑標準曲線計算時，回收率為76%～139%。其中乙酰甲胺磷樣品平行測定結(jié)果的重復(fù)性差。用溶劑標準曲線計算加保護劑的13 種有機磷農(nóng)藥時，回收率為88%～115%，回收率比不加保護劑計時好。其中乙酰甲胺磷樣品平行測定結(jié)果的重復(fù)性不好。在6 次平行測定中，其峰面積隨著測定次數(shù)的增加而增加，6 次測定值的RSD 達到14%。更換進樣墊及襯管、老化色譜柱后再次測定，6 次測定值的RSD 為5%。用基質(zhì)標準曲線計算不加保護劑的13 種有機磷農(nóng)藥時，回收率在89%～124%，與用溶劑標準曲線計算加保護劑的13 種有機磷農(nóng)藥時接近。

四、結(jié)果討論

蔬菜、水果中的13 種有機磷農(nóng)藥的試驗分析過程中添加分析保護劑對大多數(shù)農(nóng)藥能顯著補償由基質(zhì)增強效應(yīng)造成的定量誤差，同時降低了檢出限,改善了峰形，提高了靈敏度。相比利用空白基質(zhì)標準曲線、頻繁維護進樣口等方法，添加分析保護劑這種方法的人工消耗少、經(jīng)濟成本低，效果顯著。