農產品檢測實驗室標準物質的期間核查分析

◎ 穆小婷，陳智標

（1.清遠市農業科技推廣服務中心，廣東 清遠 511500；2.清遠市農產品質量檢驗檢測中心，廣東 清遠 511500）

標準物質作為農產品檢測實驗室必須配備的重要化學物質，對實驗室檢測數據的準確性起著決定性的作用[1]，《實驗室資質認定評審準則》中也明確要求“檢驗檢測機構應建立和保持標準物質管理程序”及“檢驗檢測機構應根據程序對標準物質進行期間核查”。然而在實際工作中，多數實驗室對于標準物質的期間核查存在認識上的誤區，尤其在制定核查計劃和具體實施方法方面均缺乏一致性要求。本文以農產品檢測實驗室為例，以簡單實用可操作為出發點，系統闡述了實驗室標準物質期間核查的確定方法，為農產品檢測實驗室標準物質的期間核查提供一定的參考依據。

1 標準物質的定義及實驗室標準物質期間核查的必要性

根據《國際標準化組織指南30》（ISO Guide 30）的定義，標準物質（Reference Mterials，RM）是具有一種或多種確定了特性的量值，用以校準測量裝置、評價測量方法或給材料賦值的一種材料或物質[2]。農產品檢測實驗室標準物質主要包括農藥類、重金屬類、激素類和抗生素類等，其中液態有證標準物質是農產品檢測實驗室最主要的標準物質，還有少部分為固態有證標準物質，這些標準物質主要用于實驗室儀器設備的檢定和校準、測量方法的評價以及作為質控品與待測樣品在同一條件下分析，最終達到質量控制的目的[3]。進行實驗室標準物質的期間核查，目的是驗證實驗室儲存和使用過程中的標準物質在現有環境條件下是否發生了異常變化，從而確保檢測結果的準確性和可溯源性。因此，正確有效地進行農產品檢測實驗室標準物質的期間核查是實驗室工作的重要內容之一[4-5]。

2 標準物質期間核查如何展開

①進行標準物質的期間核查，需要制定“標準物質期間核查程序”，明確核查計劃編制人及審批人、核查方案的制定原則、核查的具體實施方式、核查有效性的跟蹤等相關內容。②應根據“標準物質期間核查程序”和標準物質清單編制期間核查計劃，核查計劃的內容包括核查頻次、核查種類、核查方法、核查參數、核查人員、判定依據及核查結論等[6]。因實驗室標準物質數量和種類不盡相同，核查計劃的制定需根據標準物質本身的特點、實驗室使用情況等因素綜合考慮。③期間核查計劃應由有資質并經實驗室授權的人員編制，且需經審批后方可實施。

2.1 期間核查方法的確定

不同的標準物質可采用不同的期間核查方法。對于附有證書的標準物質，因其研制過程嚴謹，均勻性、穩定性也經過了嚴密的考察，量值可以得到保證，只要按標準物質證書上所規定的條件和方法保存，并在有效期內使用，量值是可以保障的[7]。對于沒有充分的數據證明其均勻性或穩定性的一般標準物質，不僅需要定期進行期間核查，還要進行量值驗證，以此確保標準物質的置信度[8]。對于不同狀態的有證標準物質，期間核查參數也不盡相同。如對于新購買的有證標準物質，核查指標主要包括是否正確購置、是否在有效期、包裝是否完好及運輸途中是否滿足標準物質的保存條件等內容。對于未開封且在保質期內的標準物質，核查指標包括保存條件是否恰當、標識是否清晰、外觀（顏色、性狀等）是否正常、信息是否完整及包裝是否完好等[9]。對于已經開封使用的有證標物質，應著重檢查實驗室是否嚴格按證書和作業指導書規定方法保存和使用，如儲存條件是否正確、是否出現泄漏、變色、標識不清等情況、包裝及外觀是否完整、使用方法是否恰當等，如發現存在異常不能確保量值是否準確的情況下，則要按照一定方法對其進行量值驗證。對實驗人員自配自標的標準溶液，主要核查是否做到專人管理專人使用即可[10]。

2.2 期間核查頻次的確定

對于標準物質期間核查的時間間隔并沒有明確的規定，因此不同實驗室可根據自身條件靈活決定[11]，但一般遵循以下原則。①若擁有完善的標準物質管理程序及良好的實驗環境和儲存條件，同時配備了專人專柜保存，期間核查時間間隔可適當延長[12]。②對于實驗室首次使用的溶液標準物質，期間核查時間間隔可按先密后疏的原則安排，最終找出此標準物質期間核查的間隔點。③對于固體標準物質或穩定性好的液體標準物質，只要按要求保存，一般期間核查時間間隔可定在半年一次，但部分不穩定的固體性標準物質除外。④對于合格狀態置信度很高，同時也沒有使用期限的標準物質，可以不列入期間核查以降低使用成本[13]。⑤如果發現某個標準物質一直非常穩定，某次使用突然出現了離群值，則需立即增補期間核查計劃。

2.3 需要進行期間核查標準物質的確定

期間核查并不是機構內所有標準物質都要進行，而是根據實驗室標準物質具體使用情況及影響因素等綜合確定。不同類型的標準物質對應的準確性影響因素差距很大，如液體標準物質，從標準原液移入儲備瓶后，會增加儲備瓶、儲存條件、儲存和使用過程中的交叉污染概率；固體標準物質雖穩定性較好，但保存條件和操作者的嚴謹程度有至關重要的作用。總體而言應遵循以下原則。①對于使用頻率高、性狀不穩定的標準物質應定期進行期間核查。②對于新購置的標準物質必須進行期間核查。③對于儲存環境條件未滿足說明書要求、多次使用時，標準物質需盡快進行核查。④對于臨近有效期的標準物質按標準物質特性酌情確定是否進行期間核查[14]。

2.4 期間核查結論及核查記錄的完善

期間核查結束后，實驗室要按體系文件等要求，及時完善標準物質期間核查記錄，同時給出明確的期間核查結論，具體包括核查時間、核查方法、核查種類、核查參數、核查人員、標準物質的儲存條件、核查時的環境條件、核查數據、結果評價方法、原始數據、數據處理記錄及其他核查時需要記錄的內容。核查結論需經實驗室授權的人員進行綜合分析評估，提出是否繼續使用的意見，并經管理人員審批后方可實施[15]。如果核查結果確定該標準物質在證書規定的不確定度范圍內，則可以繼續使用；如果核查結果表明該標準物質的穩定性準確性已達到控制的臨界水平，則需立即采取預防措施；如果核查結果表明該標準物質已超出證書規定的不確定度范圍，則必須立即停止使用，同時啟動糾正措施，追溯是否對之前的測定結果產生影響。

3 標準物質量值的重新驗證

3.1 量值驗證方法

對疑似受污染或其量值無法得到保證的標準物質，則需要進行量值驗證[16]，主要包括以下幾類。①通過標準物質間相互比對，如利用同一生產商不同濃度的標準物質或不同生產商的標準物質比對驗證、利用有證標準樣品或近期參加過能力驗證的質控品進行驗證等[17]。②通過實驗室間比對、實驗室內部n臺儀器或n個測量方法比對（n≥2）等方法進行驗證，比對實驗室和比對儀器/測量方法的準確度等級要求相同或相近[18]。③利用質量控制圖進行驗證，常用控制圖有平均值-極差控制圖和平均值-標準偏差控制圖[19]。

3.2 結果的評定

標準物質量值驗證常用的評定方法包括t檢驗法、En值判斷法、臨界值（CD值）法、專業標準判斷法和Z比分數法等。t檢驗[20]是用t分布理論來推論差異發生的概率，以此比較2個平均數的差異是否顯著。t檢驗法共有3種，分別為單總體t檢驗、雙總體t檢驗和配對t檢驗，每種t檢驗適用于不同類型和領域，標準物質特征量值的期間核查屬于一種準確度的檢驗，一般采用單總體t檢驗。En值判斷法可用于判斷2個測量值之間的一致性，適用于包括標準物質比對、指定參考實驗室的實驗室間比對等有參考值的標準物質間比對[21]。CD臨界值法[22]主要適用于無法提供合理的測量不確定度評定結果的情況，提供關于該方法的重復性標準偏差Sr，復現性標準偏差SR時的標準物質核查結果評定。當En值判斷法與CD臨界值法均不可用，相應專業標準中又有明確規定測試結果的允許差，可以采用專業標準判斷法進行標準物質量值的評定[23]。Z比分數法屬于多組比對檢測數據，常用于權威機構組織的能力驗證，很少用到檢測機構自行組織的比對分析試驗。

4 結語

對于檢測實驗室來說，標準物質的期間核查方法應以簡潔實用為原則，確保可操作性強，盡量避免過多的開封、分取等操作增加其被污染的概率。不同的檢測實驗室要從自身實際情況出發，確定期間核查的種類和頻次，根據不同的物質種類或同品種不同的狀態確定具體的適合實驗室的核查方法，確保期間核查的有效適用和標準物質的溯源可靠。