內(nèi)鏡下止血治療聯(lián)合奧曲肽對(duì)十二指腸潰瘍伴出血患者的治療效果及免疫功能影響

莫霏霏 余 光 金玲玲 章月桃 王國(guó)祥

1.臺(tái)州市立醫(yī)院消化內(nèi)科，浙江臺(tái)州 318000；2.臺(tái)州市中心醫(yī)院（臺(tái)州學(xué)院附屬醫(yī)院）功能診斷中心，浙江臺(tái)州 318000

十二指腸潰瘍出血是最常見(jiàn)的一種消化道出血現(xiàn)象，其多發(fā)生于氣候變化比較大的春秋兩季，而且男性的發(fā)病率要高于女性，十二指腸潰瘍多發(fā)生在十二指腸球部，以前壁居多，其次為后壁、下壁和上壁[1]。部分患者會(huì)伴有出血，而且是反復(fù)、大量的出血，極易造成休克、暈厥，危害生命[2]。奧曲肽是一種人工合成的生長(zhǎng)抑素，能夠?qū)σ雀哐撬?、胃蛋白酶的分泌進(jìn)行抑制，對(duì)其血管產(chǎn)生較為顯著的收縮作用，從而對(duì)出血情況進(jìn)行控制[3]。內(nèi)鏡下止血治療是內(nèi)鏡下治療消化道出血方法的統(tǒng)稱，能夠有效收縮局部血管，減少出血[4]。本研究中使用內(nèi)鏡下止血治療聯(lián)合奧曲肽對(duì)十二指腸潰瘍伴出血患者進(jìn)行治療，探究對(duì)免疫功能的影響，觀察其治療效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年4 月至2020 年4 月臺(tái)州市立醫(yī)院收治的十二指腸潰瘍伴出血患者140 例，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組和聯(lián)合組，每組各70 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者均經(jīng)臺(tái)州市立醫(yī)院胃鏡檢查顯示十二指腸潰瘍病灶。排除標(biāo)準(zhǔn)：①H+–K+酶抑制劑過(guò)敏者；②合并血液系統(tǒng)疾病者；③有溝通障礙，無(wú)法溝通者。對(duì)照組中，男36 例，女34 例，年齡20～56 歲，平均（36.10±8.90）歲；聯(lián)合組中，男41 例，女29例，年齡19～50 歲，平均（32.77±6.36）歲，兩組患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究所有患者及家屬均知情同意并獲得臺(tái)州市立醫(yī)院倫理委員會(huì)審批（倫理學(xué)審批號(hào)：LWYJ–2022–057）。

1.2 方法

兩組患者均給予飲食控制，采用相關(guān)質(zhì)子泵抑制劑等常規(guī)治療來(lái)抑制胃酸分泌。對(duì)照組在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上使用奧曲肽（生產(chǎn)單位：長(zhǎng)春金賽藥業(yè)有限責(zé)任公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H20051860，規(guī)格：0.3mg）靜脈滴注，初始劑量為0.1mg 加生理鹽水20ml 緩慢靜推，待患者無(wú)出血癥狀或胃鏡檢查未見(jiàn)出血跡象，可停用奧曲肽治療。聯(lián)合組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上給予內(nèi)鏡下出血治療進(jìn)行治療，胃鏡在直視的狀態(tài)下明確十二指腸潰瘍伴出血的部位，發(fā)現(xiàn)出血病灶后注水沖洗，在出血灶周圍2～4 點(diǎn)位置注射1∶10000 腎上腺素針，共5～10ml，同時(shí)在出血點(diǎn)處1～2 點(diǎn)位置注射1%聚桂醇，每點(diǎn)0.5～1.0ml，注水沖洗確認(rèn)出血停止后結(jié)束治療。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 平均輸血量及平均住院時(shí)間 比較兩組患者手術(shù)過(guò)程中的平均輸血量以及手術(shù)結(jié)束后的住院時(shí)間。

1.3.2 治療前后基礎(chǔ)胃酸分泌量（basal acid output，BAO）、單胺氧化酶（monoamine oxidase，MAO）、銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PAO）水平 在清晨空腹條件下，收集兩組患者上臂靜脈血5ml，采用免疫透射比濁法進(jìn)行檢測(cè)。采集患者治療前后靜脈血5ml，離心后–50℃保存。對(duì)所抽取的血清標(biāo)本進(jìn)行稀釋，隨后取3 支潔凈試管，分別標(biāo)記為對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)、檢測(cè)，將350μl 緩沖液分別加入3 支試管內(nèi)，再將20μl 蒸餾水、標(biāo)準(zhǔn)液、血清標(biāo)本分別加入3 支試管中，搖晃均勻，在37℃保溫箱保存15min 取出進(jìn)行比色，分別在340nm、700nm 波長(zhǎng)處測(cè)定免疫復(fù)合物濁度，根據(jù)吸光度計(jì)算BAO、MAO、PAO 水平。

1.3.3 治療前后腫瘤壞死因子–α（tumor necrosis factor–α，TNF–α）、超敏C 反應(yīng)蛋白（high–sensitivity C–reactive protein，hs–CRP）水平 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)TNF–α、hs–CRP 水平，以2500 轉(zhuǎn)/min 的速度進(jìn)行離心，時(shí)間為10min，進(jìn)行血清分離，置于–32℃的低溫中保存待檢。首先，在包被E12 株單克隆抗體的板條內(nèi)加入多種濃度的肽聚糖識(shí)別蛋白抗原。其次，在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔內(nèi)加0.1ml 樣本溶液，溫度為4℃，時(shí)間為12h。后丟棄孔內(nèi)溶液，使用洗滌緩沖液洗4次，每次4min，并加入一定程度稀釋后樣品0.1ml，置于上述包被的反應(yīng)孔中，在溫度38℃箱中培養(yǎng)60min。再次，待洗滌后，加稀釋酶標(biāo)抗體0.1ml，在溫度38℃下，培養(yǎng)30～60min，進(jìn)行1 次洗滌。在各反應(yīng)孔內(nèi)，加入臨時(shí)配制的3,3',5,5'–四甲基聯(lián)苯胺底物液0.2ml，時(shí)間為20～35min，并在各反應(yīng)孔內(nèi)加2.5mol/L 硫酸0.06ml 攪拌均勻，36℃下顯色20min，在反應(yīng)孔中加終止溶液45μl 終止反應(yīng)，在350nm 波長(zhǎng)測(cè)量各孔吸光度，使每列板孔內(nèi)抗原濃度相同及梯度降低，并顯色、記錄TNF–α、hs–CRP 讀數(shù)。

1.3.4 H+–K+–ATP 酶活性、促胃液素水平 使用ATP 比色法檢測(cè)H+–K+–ATP 酶活性、促胃液素。收集所有患者治療前后靜脈血5ml，按照體積比1∶9加入煮沸雙蒸水，在沸水?dāng)噭蛑瞥?0%勻漿液后再置于沸水中煮10min，抽提1min 離心測(cè)量。

1.3.5 CD3+、CD4+、CD8+水平 采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD3+、CD4+、CD8+，使用磷酸鹽緩沖液對(duì)所要進(jìn)行待測(cè)的細(xì)胞進(jìn)行洗滌2 次，隨后加入10μl 碘化丙啶染液，放置于2～4℃的溫度下避光染色30min，檢測(cè)細(xì)胞的凋亡情況。次日進(jìn)行離心處理，加入100μl胰核糖核酸酶，搖晃均勻后避光染色30min，觀察細(xì)胞周期變化情況。

1.3.6 止血成功、再出血情況 觀察兩組手術(shù)止血狀況和手術(shù)結(jié)束后和再出血情況。

1.3.7 療效評(píng)價(jià) 顯效：患者潰瘍及出血癥狀得到顯著改善，胃鏡顯示潰瘍面積基本消失不見(jiàn)，治療結(jié)束后出血已止，且臨床癥狀有所好轉(zhuǎn)，血紅蛋白以及生命體征穩(wěn)定。有效：患者潰瘍及出血癥狀得到一定程度改善，胃鏡顯示潰瘍面積有顯著減小，伴有輕微出血情況，還需進(jìn)一步留院觀察治療；無(wú)效：治療結(jié)束后仍有活動(dòng)性出血現(xiàn)象，需再進(jìn)行手術(shù)或者介入治療，臨床癥狀未得到任何改善。總有效率=（顯效+有效）例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）描述，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)（百分率）[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05 為差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 平均輸血量及平均住院時(shí)間比較

聯(lián)合組患者的平均輸血量及平均住院時(shí)間均少于對(duì)照組，其中平均輸血量?jī)山M比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），兩組平均住院時(shí)間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組患者平均輸血量及平均住院時(shí)間比較（ ）

表1 兩組患者平均輸血量及平均住院時(shí)間比較（ ）

2.2 治療前后BAO、MAO、PAO 水平對(duì)比

兩組患者治療前BAO、MAO、PAO 水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；治療后兩組患者BAO、MAO、PAO 值均有所下降，且聯(lián)合組低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

表2 兩組患者治療前后BAO、MAO、PAO 水平比較（，mmol/h）

表2 兩組患者治療前后BAO、MAO、PAO 水平比較（，mmol/h）

2.3 治療前后炎癥因子、H+–K+–ATP 酶活性、促胃液素水平比較

兩組患者治療前TNF–α、hs–CRP、H+–K+–ATP酶活性、促胃液素水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；治療后兩組患者TNF–α、hs–CRP 均有所下降，聯(lián)合組TNF–α、hs–CRP、H+–K+–ATP 酶活性、促胃液素均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表3。

表3 兩組患者治療前后炎癥因子、H+–K+–ATP 酶活性、促胃液素水平比較（ ）

表3 兩組患者治療前后炎癥因子、H+–K+–ATP 酶活性、促胃液素水平比較（ ）

2.4 治療前后CD3+、CD4+、CD8+水平比較

治療前，兩組患者CD3+、CD4+、CD8+水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；治療后，聯(lián)合組CD3+、CD4+水平高于對(duì)照組，CD8+水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表4。

表4 兩組患者CD3+、CD4+、CD8+水平比較（，/ul）

表4 兩組患者CD3+、CD4+、CD8+水平比較（，/ul）

2.5 止血成功情況和再出血情況比較

聯(lián)合組患者治療止血成功率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。聯(lián)合組治療再出血發(fā)生率低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表5。

表5 兩組患者止血成功情況和再出血情況比較[n（%）]

2.6 治療有效率比較

聯(lián)合組患者治療總有效率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=7.936，P=0.004），見(jiàn)表6。

表6 兩組患者治療有效率比較[n（%）]

2.7 不良反應(yīng)率比較

治療過(guò)程中，聯(lián)合組患者不良反應(yīng)發(fā)生率略高于對(duì)照組，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.430，P=0.551），見(jiàn)表7。

表7 兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率比較[n（%）]

3 討論

研究表明，十二指腸潰瘍是由胃酸分泌情況出現(xiàn)異常而導(dǎo)致，而胃酸分泌異常在該疾病中起到了決定性的作用，所以治療十二指腸潰瘍時(shí)應(yīng)先抑制胃酸分泌[5]。奧曲肽在臨床中屬于人工合成8 肽生物，對(duì)于十二指腸潰瘍、胃潰瘍等疾病具有較好的療效，能夠?qū)ξ杆嵋约按傥敢核氐姆置谇闆r進(jìn)行顯著抑制，從而改善機(jī)體內(nèi)血供情況。本研究中，對(duì)十二指腸潰瘍伴出血患者使用奧曲肽治療后，兩組患者H+–K+–ATP 酶活性、促胃液素均有所下降，聯(lián)合組患者H+–K+–ATP 酶活性、促胃液素低于對(duì)照組，說(shuō)明使用奧曲肽對(duì)十二指腸潰瘍伴出血癥能夠?qū)颊唧w內(nèi)胃酸的分泌情況進(jìn)行顯著抑制，幫助潰瘍愈合，與魏廣賢[6]的研究結(jié)果一致。隨著內(nèi)鏡與相關(guān)技術(shù)的飛速發(fā)展，內(nèi)鏡下止血治療對(duì)于改善十二指腸潰瘍患者出血的成功率極高，可避免患者實(shí)施外科手術(shù)，臨床得到廣泛應(yīng)用。研究指出，采用內(nèi)鏡下止血治療的患者，其輸血量低于單一用藥患者的輸血量情況，而進(jìn)行聯(lián)合治療，患者的輸血量情況均低于單一治療的情況水平[7]，與本研究結(jié)果一致，說(shuō)明聯(lián)合治療能夠顯著降低患者輸血量情況，從而減少患者住院時(shí)間，使患者病情得到進(jìn)一步恢復(fù)。

BAO 為基礎(chǔ)胃酸分泌量，指在無(wú)食物、藥物刺激的狀態(tài)下連續(xù)互小時(shí)的胃酸分泌量[8]。MAO 是指經(jīng)五肽胃泌素刺激后，1h 內(nèi)內(nèi)壁細(xì)胞充分發(fā)揮分泌功能所能分泌的胃酸量[9]。PAO 是銅綠假單胞菌，又稱為綠膿桿菌，好氧、呈長(zhǎng)棒形，是一種機(jī)會(huì)性感染細(xì)菌[10]。PAO 廣泛分布于自然界及正常人的皮膚、腸道和呼吸道，是臨床較為常見(jiàn)的條件致病菌之一。PAO 天生對(duì)大部分抗生素具有抗藥性，如慶大霉素、頭孢他啶、哌拉西林、丁胺卡那霉素、頭孢噻肟酸等，并能快速的產(chǎn)生抗藥性突變[11]。本研究使用該聯(lián)合方案對(duì)十二指腸潰瘍伴出血患者進(jìn)行治療，患者BAO、MAO、PAO 均明顯下降，說(shuō)明在常規(guī)治療下奧曲肽聯(lián)合內(nèi)鏡下止血治療能夠抑制十二指腸潰瘍伴出血患者體內(nèi)BAO、MAO、PAO 的增殖，有一定的治療效果。

TNF–α 主要由活化的巨噬細(xì)胞、NK 細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生[12]。hs–CRP 自身形態(tài)的形成是由于機(jī)體內(nèi)遭受到微生物入侵，形成炎性刺激而形成，在炎癥開(kāi)始時(shí)迅速攀升，48h 達(dá)到峰值[13]。本研究中使用該聯(lián)合方案對(duì)十二指腸潰瘍伴出血患者進(jìn)行治療，患者體內(nèi)TNF–α、hs–CRP 均出現(xiàn)下降趨勢(shì)，說(shuō)明在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上使用奧曲肽聯(lián)合內(nèi)鏡下止血治療能夠控制十二指腸潰瘍伴出血患者TNF–α、hs–CRP 水平，減輕機(jī)體炎癥，改善出血情況，有效恢復(fù)患者病情。

相關(guān)研究顯示，十二指腸潰瘍伴出血能夠使患者免疫功能出現(xiàn)異常，可通過(guò)對(duì)T 淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行細(xì)胞免疫檢測(cè)判定[14,15]。CD3+可參與免疫應(yīng)答全過(guò)程，CD4+可對(duì)T 細(xì)胞表面進(jìn)行輔助標(biāo)記，CD8+在免疫系統(tǒng)抵御病原體中發(fā)揮重要作用[16]。本研究結(jié)果顯示，在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上使用奧曲肽聯(lián)合內(nèi)鏡下止血治療對(duì)患者進(jìn)行治療，CD3+、CD4+水平升高，CD8+水平降低，說(shuō)明該聯(lián)合方案能夠顯著改善患者的免疫功能，抑制疾病的進(jìn)一步發(fā)展。

綜上所述，本研究在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上使用奧曲肽聯(lián)合內(nèi)鏡下止血治療能夠抑制十二指腸潰瘍伴出血患者體內(nèi)的H+–K+–ATP 酶活性和促胃液素的分泌，BAO、MAO、PAO 均明顯下降，同時(shí)減少患者體內(nèi)胃酸的生成，降低患者平均輸血量、住院時(shí)間以及再出血發(fā)生率，改善患者的免疫功能，治療效果顯著。