血清LDH、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC在病毒性腦炎患兒病情判斷及預后評估中的臨床意義

韓玉娟，鄧 劼

1.青海省婦女兒童醫院神經內科，青海西寧 810000；2.北京兒童醫院神經內科，北京 100045

病毒性腦炎(VE)是常見的中樞神經系統感染性疾病，在兒童中發病率較高。大部分VE患兒經對癥治療后預后良好，但某些重癥患兒治療干預效果不佳，遺留后遺癥甚至死亡的風險極高[1]。目前，對于VE患兒病情嚴重程度的判斷主要以其臨床癥狀及腦電圖檢查為主，缺乏可量化的指標[2]。VE發病機制尚不清楚，但有研究表明，VE患兒心肌酶譜水平紊亂，其乳酸脫氫酶(LDH)水平異常上升[3]。VE還是一種與機體免疫力密切相關的疾病，CD4+/CD8+比值是重要的免疫功能狀態指標[4]。此外，白細胞參與人體機體防御以及腦血管病變等多種生理反應，VE引起的腦水腫將降低白細胞變形能力，而白細胞計數(WBC)升高又進一步促進氧自由基及血管活性因子的釋放，加重腦損傷[5]?；诖?，本研究探討血清LDH、CD4+/CD8+比值以及腦脊液WBC在VE患兒病情嚴重程度及預后中的價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 將青海省婦女兒童醫院2018年1月至2021年1月收治的79例VE患兒納為VE組。另選擇同期疑似中樞神經系統疾病，但經腦脊液、腦電圖、影像學及體征檢查排除VE的60例住院患兒作為對照組。VE診斷參照《諸福棠實用兒科學》[6]中相關診斷標準：(1)急性期有發熱、畏光、眩暈等臨床表現；(2)噴射性嘔吐、驚厥等腦實質受損體征；(3)腦脊液WBC增高，但<500×106/L；(4)腦電圖檢查有彌漫性異常慢波背景活動。重癥VE診斷標準：(1)有持續驚厥狀態；(2)合并意識障礙；(3)持續高熱；(4)有偏癱、單肢偏癱、精神行為異常等大腦皮質受損表現。根據入院時臨床表現，將VE患兒分為輕癥組(44例)與重癥組(35例)。本研究經青海省婦女兒童醫院醫學倫理委員會批準實施，患兒家長均簽署知情同意書參與本研究。

1.2納入、排除標準 納入標準：(1)VE組患兒滿足上述診斷標準，年齡4～12歲，臨床資料完整；(2)對照組患兒年齡及性別比例與VE組相匹配。排除標準：細菌性腦膜炎、急性傳播性腦脊髓炎等其他腦病綜合征及發熱相關性疾病者；住院時間<3 d者；隨訪資料不全者。

1.3方法

1.3.1血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC檢測 分別于VE組治療前后及對照組入組時采集患兒外周空腹靜脈血2管。一管3 mL，不抗凝，靜置20 min后以3 000 r/min離心5 min，取上層血清，采用日本Olympus AU-1000全自動生化分析儀進行檢測血清LDH。另一管1.8 mL，置于EDTA-K2抗凝管內，使用相應的熒光標記單克隆抗體染色，避光孵育20 min，FACSLysing solution溶血處理，流式細胞儀檢測CD4+、CD8+T細胞水平，計算CD4+/CD8+比值。分別于VE組治療前后及對照組入組時抽取腦脊液2 mL，以離心半徑3 cm、3 000 r/min離心15 min，使用日本Sysmex UF-100全自動尿沉渣分析儀檢測腦脊液WBC。

1.3.2VE治療方法 VE患兒進行抗病毒及對癥支持治療，同時聯合物理降溫、鎮靜、脫水降顱壓、改善腦代謝等治療，適當應用糖皮質激素。重癥組患兒視情況給予丙種球蛋白治療。

1.3.3治療效果觀察 治療2周后，評估VE患兒治療效果：(1)顯效，指治療1周內患兒退熱，意識清醒無頭痛或驚厥，神經系統損傷開始恢復；(2)有效，指治療1～2周后，患兒退熱，意識清醒無頭痛或驚厥，神經系統損傷開始恢復；(3)無效，指治療2周內，發熱及神經損傷癥狀依舊無改善。將顯效及有效患兒納為預后良好組(70例)，治療無效患兒納為預后不良組(9例)。

1.3.4觀察指標 (1)比較VE組與對照組，VE組治療前后，輕癥組及重癥組，以及不同預后VE患兒血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC。(2)繪制受試者工作特征(ROC)曲線，計算曲線下面積(AUC)，評估血清LDH、CD4+/CD8+比值、腦脊液WBC在VE患兒預后中的預測效能。

2 結 果

2.1VE組與對照組治療前血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC比較 VE組治療前血清LDH水平、腦脊液WBC高于對照組，CD4+/CD8+比值低于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 VE組與對照組治療前血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC比較

2.2VE組治療前后血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC比較 治療后，VE組血清LDH水平、腦脊液WBC較治療前下降，CD4+/CD8+比值較治療前升高，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 VE組治療前后血清LDH水平、CD4+/CD8+比值以及腦脊液WBC比較

2.3輕癥組及重癥組治療前血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC比較 輕癥組治療前血清LDH水平、腦脊液WBC低于重癥組，CD4+/CD8+比值高于重癥組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 輕癥組及重癥組治療前血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC比較

2.4不同預后VE患兒治療前血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC比較 預后良好組治療前血清LDH水平、腦脊液WBC低于預后不良組，CD4+/CD8+比值高于預后不良組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 不同預后VE患兒治療前血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC比較

2.5血清LDH、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC單獨和聯合檢測對VE患兒預后的預測效能 血清LDH、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC單獨和聯合檢測對VE患兒預后均有一定的預測效能，3項指標聯合檢測的AUC為0.849，高于3項指標單獨檢測的0.752、0.761、0.733(Z=2.172、2.963、2.394，P<0.05)，而3項指標單獨檢測的AUC差異無統計學意義(P>0.05)。見圖1、表5。

圖1 血清LDH、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC單獨和聯合檢測預測VE患兒預后的ROC曲線

表5 血清LDH、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC單獨和聯合檢測對VE患兒預后的預測效能

3 討 論

VE由病毒入侵大腦引起，是小兒常見的中樞神經系統感染性疾病。免疫功能障礙與VE發病機制密切相關。尋找對VE患兒病程及預后有提示作用的有效指標，在臨床中具有重要的意義。

LDH是胞漿酶，在腦組織內含量豐富，當腦組織受損時，LDH透過腦屏障，被大量釋放至外周血循環系統，使其血液活性大幅度升高[7-8]。有研究報道LDH水平變化可作為腦損傷及病情恢復程度判斷的有效指標[9]。CD4+、CD8+T細胞分別是輔助性及抑制性細胞亞群，CD4+可輔助T、B淋巴細胞產生免疫應答，清除病毒，并能阻止病毒所引起的B細胞增殖，增強免疫反應，維持機體正常免疫平衡[10-11]。而CD8+T細胞可抑制B淋巴細胞分化及抗體合成等作用，當病程發展到一定程度后，B細胞可與CD8+T細胞相互結合而凋亡，迫使淋巴細胞增殖呈自限性變化[12]。CD4+/CD8+比值下降提示患兒機體免疫功能下降。炎癥反應的特征表現之一是白細胞滲出，而腦脊液WBC是反應感染性疾病的敏感指標之一[13-14]。一方面，VE引起的腦水腫將降低白細胞變形能力，增加其黏附性，加重腦部微循環障礙。另一方面，黏附于血管內皮表面的白細胞還能與浸潤于腦組織內的白細胞相互激活，釋放大量氧自由基與血管活性物質，加重腦損傷[15]。

本研究發現，VE組治療前血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC均異常，具體表現為VE組治療前血清LDH水平、腦脊液WBC升高，CD4+/CD8+比值降低，差異均有統計學意義(P<0.05)，提示VE患兒存在腦組織損傷及炎癥反應；此外，與治療前比較，治療后VE組血清LDH水平、腦脊液WBC明顯下降，CD4+/CD8+比值明顯上升，差異均有統計學意義(P<0.05)，提示血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC在反映VE患兒病情變化方面有一定價值。

此外，本研究還發現，在不同病情嚴重程度的VE患兒中，重癥組治療前血清LDH水平、腦脊液WBC均高于輕度組，CD4+/CD8+比值低于輕度組，差異均有統計學意義(P<0.05)，說明血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC在評估VE患兒病情嚴重程度中也具有一定的價值。

治療2周后對VE患兒治療效果進行統計，結果發現，預后良好組治療前血清LDH水平、腦脊液WBC明顯低于預后不良組，CD4+/CD8+比值高于預后良好組，差異均有統計學意義(P<0.05)，提示血清LDH水平、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC對VE患兒的預后也有一定的預測價值。進一步繪制ROC曲線，計算AUC，分析入院時血清LDH、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC對VE患兒預后的預測效能，結果顯示，血清LDH、CD4+/CD8+比值及腦脊液WBC單獨和聯合檢測預測VE患兒預后的AUC分別為0.752、0.761、0.733、0.849，提示3項指標在判斷VE患兒預后中均有一定的預測效能，但3項指標聯合檢測可有效提高預測效能。

綜上所述，在VE患兒中，血清LDH水平、腦脊液WBC升高，CD4+/CD8+比值降低，三者在反映VE患兒病情嚴重程度及預后中均有一定的價值，可作為評估VE患兒病情嚴重程度及預測預后的量化指標。