結腸癌常規化療后應用DC-CIK生物免疫療法的效果研究

魯海斌，金 曙

（1. 房縣中醫院，湖北 房縣 442100 ；2. 十堰市太和醫院消化內科，湖北 十堰 442000）

結腸癌是一種消化道惡性腫瘤，發生于結腸部位[1]。近年來，隨著人們生活水平的提高，結腸癌的發病率也逐漸提高。調查結果顯示，男性結腸癌的患病率高于女性。在絕經后女性群體中，結腸癌的發病率有所提高[2]。結腸癌患者可出現消化道出血、貧血、大便里有膿血的癥狀。癌灶較大的患者可出現結腸完全梗阻或不完全梗阻的情況。臨床上對結腸癌患者主要進行手術治療及輔助化療，患者的預后較好[3]。據調查，行手術治療及輔助化療后，40% 的結腸癌患者生存期＞5 年[4-5]。部分晚期結腸癌患者行手術治療、輔助化療等綜合治療后，五年生存率可達20% 以上。DC-CIK 生物免疫療法是目前臨床上較為成熟的一種腫瘤生物治療方式。其中，樹突狀細胞（dendriticcells，DC）是迄今為止發現的一種功能最強大的抗原呈遞細胞。此細胞因成熟時有許多樹狀或偽足樣突起表現而得名，可識別腫瘤抗原，并傳遞給人體的免疫系統。多種細胞因子誘導的殺傷細胞（cytokine induced killer，CIK）作為一種天然腫瘤殺傷細胞，存在于人體中，具有細胞毒性，可通過分泌細胞因子殺傷腫瘤。近年來，DC-CIK 生物免疫療法被廣泛應用于化療后惡性腫瘤患者的治療中[6]。本研究主要分析結腸癌常規化療后應用DC-CIK 生物免疫療法的臨床效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究對象為我院收治的80 例結腸癌患者。選取患者的入院時間為2019 年至2021 年。根據采取治療方式的不同將患者分為研究組和對照組，每組患者有40 例。研究組中，男性患者22 例，女性患者18 例；年齡40 ～72 歲，平均年齡（54.26±3.68）歲；病程2 ～4年，平均病程（2.56±0.21）年；其中，低分化腺癌患者15 例，中分化腺癌患者19 例，高分化腺癌患者6 例。對照組中，男性患者20 例，女性患者20 例；年齡40 ～70 歲，平均年齡（56.95±3.27）歲；病程2 ～5 年，平均病程（2.96±0.37）年；其中，低分化腺癌患者14 例，中分化腺癌患者17 例，高分化腺癌患者9 例。兩組的年齡、性別、病程、病理分型等一般資料相比，差異不具有統計學意義（P＞0.05），可對比分析。

1.2 納入及排除標準

1）納入標準：病情符合臨床關于結腸癌的診斷標準；行手術后化療；惡性腫瘤處于無局部進展期或晚期。2）排除標準：腫瘤體積大；存在嚴重的心肺疾病；無法耐受常規化療。

1.3 治療方法

對兩組均予以常規化療， 化療方案采取FOLFOX4 方案。FOLFOX4 中化療藥物包括亞葉酸鈣、氟尿嘧啶和奧沙利鉑。治療周期第1、第2 天，自鎖骨下或頸內中心靜脈輸注奧沙利鉑85 mg/m2、亞葉酸鈣200 mg/m2，在2 h 內輸注完畢。為患者靜脈輸注氟尿嘧啶400 mg/m2，在0.5 h 內輸注完畢。在化療泵中加入 2400 mg/m2氟尿嘧啶，泵注時間48 ～72 h，2 周為一個化療周期，共化療6 個周期。在此基礎上，對研究組予以DC-CIK 生物免疫治療。治療前，先行DC-CIK 細胞培養，方法是：采集每例患者50 mL 外周靜脈血，按1:1 比例用生理鹽水稀釋后分裝到4 個離心管中，每個離心管中裝有20 mL 人細胞分離液。離心處理20 min 后棄上清液，加入50 mL 生理鹽水，再次離心處理。細胞沉淀處理后，靜置培養3 h，吸出懸浮細胞，加入培養液中，得到貼壁細胞，并放入IL-4、GM-GSF，置于培養箱中培養。在CIK 細胞中加入培養液IL-2（第1 天至第7 天）。在DC 細胞中加入IL-4、GM-GSF（隔天半量換液至第7 天），加入TNF-α 及相關抗原（第8 天），將其與CIK 細胞共同培養。于第9 天開始，連續3 天為患者回輸DC細胞。回輸DC 細胞完畢后，開始為患者回輸CIK 細胞，持續3 天。

1.4 觀察指標

對組間的近期療效、不良反應發生率、生存質量評分、免疫功能指標進行對比分析。兩組近期療效分為完全緩解（腫瘤病灶消失＞1 個月）、部分緩解（腫瘤體積減小＞50%）、穩定（腫瘤體積減小＜50%）、進展（腫瘤體積增大或發現新病灶）。總有效率= 完全緩解率+ 部分緩解率。治療期間不良反應包括白細胞減少、外周靜脈炎、惡心嘔吐、肝功能損傷。于治療前后評估兩組的生存質量，使用工具為腫瘤病人生活質量評分（Quality of life score of tumor patients，QOL）。此評分標準中包括食欲、精神、睡眠、疲乏、疼痛、家庭和同事的理解與配合、自身對癌癥的認識、對治療態度、日常生活等內容，滿分60 分。生存質量分為良好（51 ～60 分）、較好（41 ～50 分）、一般（31 ～40 分）、差（21 ～30 分）、極差（≤20 分）。免疫功能指標包括外周血T 細胞亞群CD4＋、CD8＋、CD4＋與CD8＋比值。

1.5 統計學分析

用SPSS25.0 統計學軟件進行數據分析，QOL 評分、血清免疫功能指標水平等計量資料以±s表示，行t檢驗。總有效率、不良反應的發生率等計數資料以百分比（%）表示，行卡方(χ2) 檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組近期療效對比

治療后，對照組的完全緩解、部分緩解、穩定、進展例數及總有效率分別為8 例、10 例、12 例、10例、45.00%，研究組的完全緩解、部分緩解、穩定、進展例數及總有效率分別為15 例、10 例、12 例、3 例、62.50%。兩組的總有效率相比，研究組高于對照組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。詳見表1。

表1 兩組近期療效對比

2.2 兩組不良反應發生率對比

治療期間，對照組的白細胞減少、外周靜脈炎、惡心嘔吐、肝功能損傷發生例數及總發生率分別為5例、4 例、6 例、4 例及47.50%，研究組的白細胞減少、外周靜脈炎、惡心嘔吐、肝功能損傷發生例數及總發生率分別為2 例、0 例、3 例、0 例及12.50%。兩組的不良反應總發生率相比，研究組低于對照組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。詳見表2。

表2 兩組不良反應發生率對比

2.3 治療前后兩組QOL 評分對比

治療前，兩組的QOL 評分相比，差異不具有統計學意義（P＞0.05）。治療后，兩組的QOL 評分均高于治療前，差異具有統計學意義（P＜0.05）；研究組的QOL 評分高于對照組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。詳見表3。

表3 治療前后兩組QOL 評分對比（分，± s）

表3 治療前后兩組QOL 評分對比（分，± s）

組別 QOL 評分治療前 治療后 t 值 P 值對照組（n=40）21.51±2.14 35.36±3.68 20.577 0.000研究組（n=40）21.59±2.64 46.58±4.57 29.947 0.000 t 值 0.149 12.094 P 值 0.882 0.000

2.4 兩組治療前后免疫指標對比

治 療 前， 兩 組 外 周 血 中 的CD4＋、CD8＋、CD4＋與CD8＋比值相比，差異不具有統計學意義（P＞0.05）。治療后，研究組的外周血T 細胞亞群CD4＋、CD4＋與CD8＋比值均高于對照組，差異具有統計學意義（P＜0.05）；研究組的外周血T 細胞亞群CD8＋低于對照組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。詳見表4。

表4 兩組治療前后免疫指標對比（± s）

表4 兩組治療前后免疫指標對比（± s）

組別 CD4＋（%） CD8＋（%） CD4＋/CD8＋治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后對照組（n=40） 35.87±1.25 37.08±2.80 32.09±1.68 30.26±1.09 1.02±0.28 1.34±0.12研究組（n=40） 35.25±1.68 39.52±1.57 32.31±1.39 27.58±1.31 1.03±0.09 1.56±0.18 t 值 1.873 4.807 0.638 9.946 0.215 6.432 P 值 0.065 0.000 0.525 0.000 0.830 0.000

3 討論

結腸癌是一種臨床常見的消化道惡性腫瘤，多數此病患者需要行手術治療[7]。手術后，部分結腸癌患者的骨髓、血液或淋巴結中會存在小的亞臨床轉移灶[8-9]。為了徹底清除結腸癌患者體內的癌細胞，臨床上在手術后常予以化療。FOLFOX 方案是結腸癌手術后化療的常用方案[10]。FOLFOX 方案中的藥物包括亞葉酸鈣、氟尿嘧啶和奧沙利鉑。亞葉酸鈣作為四氫葉酸的甲酰衍生物，常與氟尿嘧啶聯用，可提高氟尿嘧啶的療效。氟尿嘧啶在人體內可首先轉變為氟尿嘧啶脫氧核苷酸。氟尿嘧啶脫氧核苷酸可與四氫葉酸、胸腺嘧啶核苷酸合成酶結合成三聯復合物（此復合物具有不易分離特性），使胸腺嘧啶核苷酸合成酶喪失活性，導致脫氧胸腺嘧啶核苷酸無法生成，對腫瘤細胞DNA 的合成起到抑制作用，從而發揮抗腫瘤功效。奧沙利鉑為鉑類抗癌藥，安全性較高，不易損傷患者消化道及腎臟的功能。氟尿嘧啶對處于增殖期的腫瘤細胞有明顯抑制活性的作用。對于處于靜止期的腫瘤細胞，氟尿嘧啶的抑活特性并不明顯，但有干擾腫瘤細胞DNA 復制及蛋白質合成代謝等多種作用。

近年來，臨床上對于輔助化療后的結腸癌患者常通過DC-CIK 生物免疫療法予以治療。有研究顯示，采取治療措施后，惡性腫瘤患者體內各項免疫功能指標存在顯著差異，這為惡性腫瘤患者的臨床治療提供了新的思路，細胞免疫治療應運而生[11]。DC 細胞在人體抗腫瘤免疫中的作用極為重要。作為一種腫瘤抗原免疫反應理想靶點，DC 細胞已經被證實可以應用于多種惡性腫瘤治療中。經體外培養，使DC 細胞成熟后，其具有提呈抗原、激活免疫的作用，并可促進IL-6 分泌，抑制CD4＋、CD25＋的活性。CIK 細胞屬于異質細胞，具有T 細胞的抗腫瘤活性，是抗腫瘤過繼性細胞免疫治療的首選。CIK 細胞既可以直接殺傷腫瘤細胞，又可以通過釋放炎性細胞因子而間接性地殺傷腫瘤細胞。研究發現，實施DC-CIK 生物免疫治療期間，通過體外培養DC 與CIK 制成DC-CIK，并將其回輸到患者體內，可有效提高患者體內免疫細胞的抗腫瘤作用，最大限度地調動患者自身的免疫系統，使其滅殺腫瘤細胞。DC-CIK 生物免疫療法適用于治療小細胞肺癌、肺鱗癌、肺腺癌、肝癌、胃癌、腸癌、腎癌、腎上腺癌及血液系統惡性腫瘤等惡性腫瘤疾病。但對于患有自身免疫系統疾病、正在接受化療和放療、存在嚴重肝腎功能不全、凝血功能異常、活動性出血疾病、感染未控制、嚴重心血管疾病及糖尿病的患者，應禁用此法治療[12]。

本研究的結果顯示，兩組在近期療效、治療安全性、免疫功能指標、生存質量方面相比，研究組均優于對照組。本研究結果證實，將DC-CIK 生物免疫療法應用于結腸癌常規化療后的臨床效果理想，可提高近期療效、免疫功能，改善生存質量，減少不良反應的發生。