葡萄酒中農藥殘留檢測前處理方法研究進展

王小標，程鎖明，翟銀成，朱 莉

（昌吉市農產品質量安全檢驗檢測中心（園藝工作站），新疆昌吉 831100）

葡萄酒是以鮮葡萄或葡萄汁為原料經全部或部分發酵釀制而成、含有一定酒精度的發酵酒[1]。釀酒葡萄在種植過程中，受栽培品種、土壤、氣候和田間管理等因素的影響，易導致灰霉病、霜霉病、穗軸褐枯病、二星葉蟬和綠盲蝽等常見病蟲害[2-3]。在釀酒葡萄的病蟲害防治過程中，不可避免地導致農藥在釀酒葡萄上的殘留，進而伴隨葡萄酒的生產釀造殘留于葡萄酒中，對葡萄酒產品的品質安全構成潛在的風險隱患。本文綜述了檢測葡萄酒中農藥殘留的前處理技術，旨在為葡萄酒產品中的農殘檢測提供理論基礎和技術參考。

1 葡萄酒中農藥殘留的現狀

殺菌劑、殺蟲劑、植物生長調節劑、除草劑、植物誘抗劑和殺螨劑等農藥均可用于防治釀酒葡萄種植過程中的病蟲害，已登記在中國農藥信息網的就多達820種。我國現行的農藥殘留限量國家標準《食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量》 （GB 2763—2021）中，有關釀酒葡萄中農殘限量種類只有216種，相對于可使用的農藥種類，限量標準的制定嚴重滯后，更是缺乏葡萄酒中農藥殘留的檢測方法和最大殘留限量的國家標準，僅《綠色食品 葡萄酒》（NY/T 274—2014）中對多菌靈、甲霜靈、呋喃丹和氧化樂果4種農藥殘留作了限量規定。

國內有學者對進口和國產葡萄酒中的農藥殘留狀況進行研究。尉冬梅等[4]對我國葡萄北方主產區采收期內829份葡萄酒樣品中的13種常用殺菌劑進行了檢測，13種殺菌劑的檢出率達到72.52%，且所有檢出樣品中農藥殘留種類均不少于2種，檢出樣品中農藥殘留最多可達到10種。何佳[5]在河西走廊產區、進口和實驗室自釀的64款葡萄酒中檢測到了嘧菌酯、烯酰嗎啉、氟吡甲禾靈等24種農藥殘留，檢出頻率較高的農藥殘留是烯酰嗎啉、氟吡甲禾靈、甲霜靈，而啶酰菌胺、甲基硫菌靈等檢出頻率較低。麥巧冰等[6]對超市熱銷的130種進口葡萄酒中農藥殘留進行測定，發現多數進口葡萄酒產品中檢出的農藥殘留多為1～2種，檢出率較大的是殺菌劑、殺蟲劑，尤其是甲霜靈、嘧霉胺和丙森鋅。同時，還發現紅葡萄酒中農藥殘留檢出率比白葡萄酒高，可能與兩者的生產工藝不同有關。薛潔等[7]對28個國產葡萄酒產品中40種農藥殘留進行檢測，其中有13種農藥的檢出率高于5%，殘留量在0.001～ 0.372 mg/L，紅葡萄酒中農藥平均殘留量要高于白葡萄酒，分別為0.622 mg/L、0.359 mg/L，并且農藥的殘留率與其疏水值有關，甲霜靈的疏水值最小，殘留率最高。

2 葡萄酒中農藥殘留的前處理方法

葡萄酒中農藥殘留含量較低，且葡萄酒中含有糖、酸、醇和多酚等物質，成分復雜，基質干擾大，因此前處理技術直接影響到農藥殘留檢測的準確性。目前，葡萄酒中農藥殘留測定的前處理方法主要有分散液液萃取、固相微萃取、固相萃取和固相分散萃取等。

2.1 分散液液微萃取

分散液液微萃取是近年發展的一種新型綠色萃取技術，具有操作簡便、富集倍數高、試劑用量少和萃取效率高等特點，廣泛應用于農藥殘留、重金屬檢測、中藥成分分析等領域。其原理是在萃取體系中加入能夠與水、萃取劑互相溶解的分散劑，形成乳濁液體系，萃取劑在分散劑的分散下，形成了非常微小的液滴，增加了萃取劑與待測物的萃取面積，從而實現萃取劑對待測物的快速萃取[8-10]。

郭亞蕓等[11]采用分散液液微萃取技術提取葡萄酒中4種三嗪類除草劑特丁津、撲草凈、西瑪津和莠去津的殘留。結果表明，在萃取劑為20 μL十一醇，萃取10 min，分散劑為2 μL 0.25 g/LTween-20，NaCl濃度為250 g/L的條件下，葡萄酒中4種三嗪類除草劑的萃取效果佳，穩定性好，濃縮倍數可達到24.5～32.4倍，回收率在84%～102%。周建科等[12]采用分散液液微萃取法提取白葡萄酒樣品中聯苯菊酯、氟氯氰菊酯、氰戊菊酯和氯氰菊酯共4種擬除蟲菊酯類農藥殘留。結果表明，二氯甲烷作萃取劑，乙醇作分散劑，葡萄酒中4種擬除蟲菊酯類農藥的回收率高，達到83.20%～102.71%，雜質峰干擾小。

2.2 固相微萃取

固相微萃取（Solid-Phase Microextraction，SPME）的核心是固相微萃取纖維，由用來萃取目標分析物的高分子涂層和支撐涂層的載體兩部分構成。根據萃取方式的不同，固相微萃取可分為直接-固相微萃取（Direct Immersion-SPME）、頂空-固相微萃取（Head Space-SPME）、膜保護-固相微萃取（Membrane-protected-SPME）和衍生化-固相微萃取（Derivatization SPME），根據萃取裝置的不同，可分為管內固相微萃取（In-tube-SPME）、纖維固相微萃取（Fiber-SPME）、針內固相微萃取（Syringeneedle-SPME）和 管 尖 微 萃 取（Pipette-Tip-SPME）等。固相微萃取具有萃取性能佳、穩定性好、選擇性好、使用壽命長和易操作等優點，普遍用于食品中農藥殘留、風味物質、食品添加劑檢測和環境監測等多個領域[13-14]。

崔宗巖等[15]優化了葡萄酒中94種農藥殘留固相微萃取-氣相色譜-質譜聯用法檢測。研究發現，浸入式固相微萃取萃取的農藥種類、數量顯著多于頂空式固相微萃取，聚二甲基硅烷/二乙烯基苯（Polydimethylsiloxane/Divinylbenzene，PDMS/DVB）、二乙烯基苯/Carboxen/聚二甲基硅氧 烷（Divinylbenzene/Carboxen/Polydimethylsiloxane，DVB/CAR/PDMS）和PA萃取纖維的萃取效果最好，優化后的方法對甲拌磷、滅線磷等94種農藥的檢出限均低于10 μg/L，加標回收率可達到60%～110%，重復性標準偏差和再現性標準偏差分別低于20%和30%。郭亞蕓等[16]優化了白葡萄酒中西瑪津等4種三嗪類除草劑固相微萃取方法，結果表明最優萃取條件為萃取頭85 μmPA，NaCl質量濃度100 g/L，50 ℃下萃取40 min，對白葡萄酒中西瑪津等4種三嗪類除草劑的萃取效果良好，加標回收率可達到82%～103%，相對標準偏差在3.2%～8.8%。

2.3 固相萃取

固相萃取是食品營養分析和安全檢測常用的待測樣品預處理技術，原理是固相萃取材料通過范德華力、靜電力、氫鍵等作用力選擇性吸附原溶液中的目標分析物，通過淋洗、洗脫等步驟實現對目標分析物的凈化、富集，具有選擇性好、靈敏度高、有機試劑用量少和易于操作等優點，常用的固相萃取吸附材料主要有鍵合硅膠、活性炭、納米材料、有機聚合物樹脂和分子印跡吸附劑等[17-19]。

劉濱等[20]采用固相萃取技術提取測定葡萄酒中4種殺菌劑氟吡菌胺、胺啶酰菌胺、硅噻菌胺和吲哚磺菌的含量，經HR-X固相萃取小柱吸附凈化、乙酸乙酯洗脫，4種殺菌劑的回收率達到77.2%～93.9%。莊麗麗[21]在LC-NH2柱上部填入無水MgSO4，并和HLB柱串聯富集凈化葡萄酒中敵敵畏、滅線磷、甲拌磷等16種有機磷農藥，用正已烷+乙酸乙酯（1+1）洗脫目標物，在葡萄酒中添加0.01～0.10 mg/kg濃度的16種有機磷類農藥時，回收率為65.3%～92.3%。

2.4 固相分散萃取

固相分散萃取是在傳統固相萃取技術基礎上研發的一種前處理方法，融合了樣品勻漿、提取、凈化等前處理流程，具有樣品用量和試劑用量少、分析高效、易操作等優點，被廣泛應用于食品中農獸藥殘留的檢測，尤其QuEChERS的應用和發展較為快速[22]。

謝建軍等[23]采用固相分散萃取法提取葡萄酒中甲基對硫磷、乙烯菌核利、敵敵畏等43種葡萄上常用的殺蟲劑、殺菌劑和殺螨劑。葡萄酒樣品通過乙腈提取、加入NaCl和無水MgSO4鹽析，再用30 mg NH2粉、30 mg GCB粉、80 mg PSA粉組成的混合吸附劑凈化，43種農藥的加標濃度為50～200 μg/kg時，回收率可達67.43%～114.74%。郭璐瑤[24]采用乙腈作提取劑，50 mg PSA和150 mg無水MgSO4作凈化劑，對葡萄酒中嘧菌酯、苯醚甲環唑、戊唑醇、吡啶嘧菌酯、噻蟲嗪和噻蟲胺6種農藥殘留進行提取凈化，6種農藥的回收率在77.37%～96.91%。趙振宇等[25]采用QuEChERS方法提取凈化葡萄酒中97種農藥殘留。樣品經QuEChERS前處理技術提取和凈化后，97種農藥殘留的回收率在85.0%～115.8%。

3 結語

本文綜述了葡萄酒中農藥殘留檢測的常用前處理技術，并簡述了不同前處理技術在葡萄酒中的研究進展。檢測方法的標準化、前處理過程的低毒、低成本、高效、快速與高靈敏度和高分辨率的色譜質譜技術聯用，才能更好地保障葡萄酒的質量安全，從而為我國葡萄酒產業的健康持續發展提供技術 支持。