血清核轉錄因子-κB及CD64診斷細菌性感染疾病的價值

田 宇, 馬夢影, 辛 娜, 曾 佳, 高 娟

(1. 西安醫學院第一附屬醫院 檢驗科, 陜西 西安, 710077; 2. 陜西省人民醫院 檢驗科, 陜西 西安, 710000)

細菌感染是金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等致病菌侵入血液循環中生長繁殖，產生毒素和其他代謝產物所引起的急性全身性感染，好發于老人、兒童、免疫力低下或有慢性疾病者，以寒戰、高熱、皮疹、關節痛為臨床特征，部分患者還可出現煩躁、四肢厥冷、呼吸加快、血壓下降等癥狀，治療不及時可發展為敗血癥或膿毒癥，嚴重者可導致死亡[1]。因此，準確且及時的診斷對治療細菌感染性疾病具有重要的意義。目前，細菌培養仍然是診斷細菌感染的金標準，但病原微生物培養通常需要24 h以上才能獲取結果，所需時間較長，干擾因素較多且陽性率低，不能滿足臨床對細菌感染的快速診斷要求[2]。研究[3]報道，降鈣素原(PCT)、超敏C反應蛋白(hs-CRP)等炎癥因子是診斷細菌感染的經典指標，但敏感性和特異性較低。核轉錄因子-κB(NF-κB)是一種極具潛力的調節炎癥反應的轉錄因子，參與感染、炎癥、免疫反應、細胞凋亡和腫瘤等病理過程，被認為是連接慢性炎癥與腫瘤的橋梁[4]。CD64是免疫球蛋白G(IgG)的Fc受體之一，當機體遭受細菌侵襲時, CD64在中性粒細胞表面大量表達，是診斷細菌性感染性疾病的重要指標[5]。本研究探討血清NF-κB、外周血CD64診斷細菌性感染的效能，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年2月—2020年2月接受治療的124例細菌性感染患者為研究組，均表現出感染相關癥狀或體征，經白細胞分類、病原學及血清學檢查確診為細菌性感染，并排除不愿意接受調查者及嚴重器官功能障礙者。124例患者中，男57例，女67例，年齡32～81歲，平均(56.53±10.26)歲。另選取同期在醫院進行體檢的78例健康人群為對照組，其中男45例，女33例，年齡30～78歲，平均(54.26±9.57)歲。2組患者性別、年齡等一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 血清NF-κB水平、CD64測定: 采集所有研究對象空腹靜脈血5 mL, 4 000 轉/min離心10 min, 收集上層血清，置于-80℃冰箱保存待測。采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定血清NF-κB水平，試劑盒購自武漢博士德生物科技有限公司，試劑盒的檢測范圍為15 pg/mL至100 ng/mL, 嚴格按照ELISA試劑盒說明書進行操作，本研究采用受試者工作特征(ROC)曲線分析確定的血清NF-κB水平臨界點在檢測范圍內。采用流式細胞術檢測所有受試者外周血CD64。

1.2.2 重度細菌感染的判斷及分組[6]: 經白細胞分類、病原學及血清學檢查確診為細菌性感染的患者出現嚴重脫水并表現出明顯的煩躁、嗜睡、面色蒼白、白細胞計數增高等癥狀定義為重度感染。本研究124例患者分為重度感染組52例和一般感染組72例。

1.2.3 資料收集: 收集細菌感染者的相關資料，包括性別、年齡、體質量指數(BMI)、吸煙史、飲酒史、糖尿病、高脂血癥?；颊呷朐?8 h內完成心率(HR)、空腹血糖(FBG)、血脂[總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)]、肌酐、尿酸(UA)、PCT、hs-CRP、血紅蛋白(Hb)、白細胞(WBC)等檢測。

1.3 統計學分析

2 結 果

2.1 研究組與對照組NF-κB、CD64比較

研究組NF-κB、CD64均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.01), 見表1。

表1 研究組與健康對照組NF-κB、CD64比較

2.2 NF-κB、CD64對細菌性感染的診斷價值

NF-κB、CD64單獨診斷細菌性感染的最佳臨界值分別為42.35 ng/mL、0.41%, ROC曲線的曲線下面積(AUC)分別為0.759(95%CI: 0.712～0.823)、0.796(95%CI: 0.732～0.846), 敏感度分別為86.54%、88.46%, 特異度分別為87.50%、88.89%; 二者聯合診斷的AUC為0.937(95%CI: 0.857～0.968)，敏感度、特異度分別為96.15%、95.83%。見表2、圖1。

表2 NF-κB、CD64對細菌性感染的診斷價值

2.3 細菌性感染患者發生重度感染的單因素分析

重度感染組與一般感染組患者在性別、年齡、BMI、吸煙史、飲酒史、糖尿病、高脂血癥、收縮壓(SBP)≥120 mmHg、舒張壓(DBP)≥90 mmHg、HR≥70次/min、FBG≥6.1 mmol/L、TC≥5.7 mmol/L、TG≥1.7 mmol/L、HDL-C≤1.2 mmol/L、LDL-C≥4.1 mmol/L、肌酐≥106 μmol/L、UA≥420 μmol/L等方面比較，差異無統計學意義(P>0.05); 重度感染組體溫≥38 ℃、PCT≥0.08 μg/L、hs-CRP≥26 mg/L、Hb≤120 g/L、NF-κB≥42.35 ng/mL、WBC≥10×109、CD64≥0.41%患者比率均高于一般感染組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

2.4 影響細菌性感染患者發生重度感染的Logistic回歸分析

將發生重度感染作為自變量，將單因素分析有統計學意義的指標作為因變量，進行Logistic回歸分析，結果顯示, NF-κB≥42.35 ng/mL、CD64≥0.41%是發生重度感染的獨立危險因素(P<0.05)。見表4。

3 討 論

感染性疾病包括細菌感染、真菌感染和病毒感染，屬于臨床常見且易誤診的疾病，其中細菌性感染是臨床中較常見的類型。近年來，條件致病菌感染以及抗生素濫用導致了耐藥菌的產生，細菌性感染發病率呈升高趨勢[7]。引起細菌性感染的細菌種類較多，且早期臨床癥狀具有不典型性和多樣性，可導致診斷難度增加，延誤治療時機，影響治療效果與預后。目前，臨床上對于細菌感染的常用診斷指標是PCT、白細胞介素-6及hs-CRP等，但這些指標在鑒別不同程度細菌性感染人群時靈敏度不高[8]。本研究多因素分析發現, PCT、hs-CRP與重度感染無相關性。

本研究中，研究組NF-κB、CD64均顯著高于對照組，提示細菌性感染者NF-κB、CD64異常。

表3 細菌性感染患者發生重度感染的單因素分析[n(%)]

表4 影響細菌性感染患者發生重度感染的Logistic回歸分析

NF-κB是近年來發現的一種重要的細胞核轉錄因子，具有普遍的生物活性，在細胞因子誘導的基因表達中起重要的調控作用，不僅可以調控免疫細胞的激活, T淋巴細胞、B淋巴細胞的發育，還廣泛參與機體的應激反應和炎癥反應[9]。NF-κB廣泛存在于機體各種組織細胞中，未受刺激前表現為失活狀態，受到刺激后胞質內NF-κB與抑制蛋白IK-BS分離并活化，進入細胞核內與靶基因啟動子內的NF-κB位點結合并進行靶基因轉錄，促使各類細胞因子及生長因子生成，誘發炎癥反應釋放白細胞介素-1、白細胞介素-6、腫瘤壞死因子等炎癥細胞因子，參與感染性疾病的發生發展[10]。王智英等[11]探討了臍血NF-κB及髓磷脂堿性蛋白檢測對早產兒腦白質損傷的早期診斷價值及其與預后的關系，發現腦白質損傷早產兒NF-κB水平顯著升高，且隨著病情程度的加重, NF-κB水平越高。李靜[12]對血清IL-16、NF-κB及糖類抗原125(CA125)檢測在子宮內膜異位癥診斷中的臨床意義進行了分析，結果顯示子宮內膜異位癥的病情越嚴重，則血清NF-κB的表達越高，且診斷價值較好。

CD64是免疫球蛋白家族成員之一，屬于Fc受體和IgG高親和受體，其表達同時受細胞因子的調節，正常生理情況下, CD64主要分布在外周靜脈血中的單核細胞、巨噬細胞等抗原呈遞細胞表面，通常在中性粒細胞表面表達較低，當其受到粒細胞集落刺激因子等刺激時會大量表達，并在CD64分子與其配體結合后，可啟動并放大免疫反應，參與感染性疾病的發生發展[13]。董玉俊[14]研究發現中性粒細胞CD64對肝癌患者化療后細菌感染的診斷價值較高。研究[15-16]表明，中性粒細胞表面分子CD64的表達有利于判斷感染嚴重程度，可作為早期診斷新生兒敗血癥及評價病情預后的指標。本研究結果顯示，重度感染組血清CD64水平顯著高于一般感染組，與李觀華等[17]研究結果一致，說明中性粒細胞CD64表達可作為細菌感染性疾病的診斷及病情判斷的可靠指標。然而, CD64除了在細菌性感染時表達可迅速升高，在病毒感染時也會升高，故需聯合其他指標以提高其診斷準確性[18]。ROC曲線分析結果顯示，血清NF-κB與CD64聯合診斷細菌性感染的敏感度及特異度更高; 單因素分析結果顯示，重度感染組體溫≥38 ℃、PCT≥0.08 μg/L、hs-CRP≥26 mg/L、Hb≤120 g/L、NF-κB≥42.35 ng/mL、WBC≥10×109、CD64≥0.41%患者比率均顯著高于一般感染組; 多因素Logistic回歸分析結果顯示, NF-κB≥42.35 ng/mL、CD64≥0.41%是導致重度感染的獨立危險因素，表明NF-κB、CD64與細菌性感染關系密切。

綜上所述，NF-κB、CD64有助于細菌性感染者的診斷及病情判斷，或可作為細菌感染性疾病診斷與治療的篩查指標。