TOLL受體4與核因子κB在子癇前期患者血清中的表達及其臨床意義

王衛強

天津市西青區婦女兒童保健計劃生育服務中心檢驗科 300380

子癇前期(PET)是一種妊娠特異性綜合征，其特征是妊娠20周后出現高血壓和蛋白尿[1]。流行病學數據顯示，全球范圍內有3%～14%的妊娠出現PET，美國有5%～8%的妊娠發生PET[2]。約75%的病例病情輕微，而約25%的病例病情嚴重。在正常妊娠期，子宮動脈的血流阻力隨著妊娠期的增加而降低，這是由于螺旋動脈的滋養細胞浸潤及其轉化為低阻力血管所造成的；滋養細胞浸潤不良是PET發生的病理生理學基礎。然而，PET不僅可導致胎盤血液灌注不足，同時可引發其他妊娠相關并發癥，如胎兒宮內生長受限(IUGR)和早產(PTD)等。因此，如何早期識別PET風險并進行有效的干預是降低PET導致的相關并發癥的關鍵[3]。

文獻報道TLR4及NF-κB在PET患者胎盤組織中表達水平明顯升高，而在正常妊娠孕婦中期陽性表達率較低[4-5]。說明TLR4及NF-κB在PET發生發展中可能發揮了重要作用。Faas等人在動物模型輸注低劑量的內毒素LPS，能夠導致高血壓、蛋白尿等癥狀，從而出現典型PET癥狀并證實TLR4 在其中發揮了重要作用[6]。NF-κB為核因子，是重要的氧化酶系統因子并參與PET的發病過程[7]。但關于外周血中TLR4、NF-κB升高是否與PET發生有關，并可作為診斷的血清學標志物鮮有報道。本文中采用回顧性分析方法探討TLR4與NF-κB在PET患者血清中的表達及其作為血清標志物診斷PET的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 病例資料 回顧性分析我中心2019年11月—2021年10月收治的PET患者(PET組)31例和健康孕婦(對照組)33例的資料。PET納入標準：(1)年齡18～40周歲；(2)PET診斷明確；(3)單胎妊娠；(4)PET患者臨床資料完整。排除標準：(1)原始病歷數據不完整；(2)雙胎或多胎妊娠；(3)合并乙肝等傳染病；(4)未進行TLR4與NF-κB檢查者。

1.2 方法

1.2.1 人口學特征收集：在我院病歷系統中調閱符合納入條件PET患者的相關數據，相關數據采集包括：(1)PET患者人口學特征，如年齡、孕產次、民族、學歷等；(2)患者生活史，如吸煙史、飲酒史等；(3)病生理史，如既往高血壓、糖尿病等病史；(4)臨床化驗數據，如血清TOLL受體4與核因子κB水平等。上述數據采用雙人摘錄，并進行交叉核對校驗。

1.2.2 賦值方法：設是否發生PET的變量Y，(Y=0, 未發生PET，Y=1，發生PET)，設可能影響PET發生的因素自變量為X，分別對相關因素進行賦值，PET發生的可能危險因素，自變量設置為X=1，PET發生的可能保護因素設自變量X=0進行賦值，具體賦值方法見表1。

表1 PET相關因素Logistic回歸賦值方法

2 結果

2.1 單因素分析PET相關因素 單因素分析提示，與PET有關的因素為年齡(OR=2.12,P<0.05)、吸煙史(OR=5.32,P<0.05)、飲酒史(OR=4.79,P<0.05)、流產史(OR=2.40,P<0.05)、血清TLR4(t=6.327,P<0.05)及NF-κB(t=6.438,P<0.05)水平，見表2。

表2 單因素分析PET相關因素

2.2 Logistic回歸分析PET獨立危險因素 Logistic 回歸分析顯示，高齡產婦(OR=1.88，P<0.05)、飲酒史(OR=1.67，P<0.05)、高血清TLR4(OR=2.11，P<0.05)及NF-κB(OR=2.23，P<0.05)水平是PET的獨立危險因素。

2.3 PET患者血清TLR4與NF-κBp水平 PET患者血清TLR4與NF-κBp水平分別為(3.71±1.31)ng/ml和(158.24±45.78)ng/ml顯著高于對照組(2.01±0.76)ng/ml和(94.23±33.12)ng/ml，且差異有統計學意義(P<0.05)，見圖1。

圖1 PET患者血清TLR4與NF-κBp水平散點圖

2.4 PET患者血清TLR4與NF-κBp相關性 Pearson相關檢驗顯示，PET患者血清TLR4與NF-κBp存在明顯的正相關(r=0.35,P<0.05)，見圖2。

圖2 PET患者血清TLR4與NF-κB相關性散點圖

2.5 血清TLR4與NF-κBp診斷PET價值 分別以血清TLR4和NF-κB為參考指標診斷子癇前期的敏感性分別為72.1%和78.2%，特異性分別為69.2%和72.4%。診斷的ROC曲線下面積分別為0.86(95%CI:0.76～0.96)和0.87(95%CI:0.77～0.98)，見圖3。

a b

3 討論

臨床流行病學研究顯示，PET發病率在所有妊娠中占3%～14%[8]。然而，PET發病確切的分子機制仍未完全明確，大多數研究認為其可能與孕婦體內炎癥因子導致的胎盤血管阻力增高有關[9]。其發病機制包括血管痙攣、血管內皮細胞激活、血管舒張因子減少等有關[10]。

近期有文獻報道TLR4參與介導的炎性反應可能與PET有密切的關系[11]。趙先蘭等人[12]應用免疫組織化學法分別檢測60例PET患者及正常孕產婦胎盤中TLR4的表達情況。研究顯示PET患者胎盤組織中TLR4蛋白的表達水平、高于正常晚孕婦女(P<0.05)。研究認為TLR4表達增高與PET發病密切相關，可能是PET的發病機制之一。本文結果也證實PET患者外周血中水平顯著高于健康孕產婦，提示TLR4可能參與了PET發生的病生理過程。文獻報道NF-κB為核因子，與氧化酶系統等共同參與PET的發病過程。王艷麗等人[4]選取50例PET患者，采用免疫組化及逆轉錄—聚合酶鏈反應(RT-PCR)法測定胎盤組織中NF-κB的表達，結果PET胎盤組織中NF-κB蛋白和mRNA的表達水平均明顯高于正常晚孕婦女，與本文結果一致。

本文結果提示，經單因素分析PET有關的因素為年齡、吸煙史、飲酒史、流產史、血清TLR4及NF-κB水平升高，說明上述因此可能與PET的發生有關。進一步的Logistic 回歸分析顯示，高齡產婦、飲酒史、高血清TLR4及NF-κB水平是PET的獨立危險因素。Pearson相關檢驗顯示，PET患者血清TLR4與NF-κBp存在明顯的正相關(r=0.35)；分別以血清TLR4和NF-κB為參考指標診斷PET的敏感性分別為72.1%和78.2%，特異性分別為69.2%和72.4%。診斷的ROC曲線下面積分別為0.86和0.87。因此，本研究認為，高齡、飲酒史及血清TLR4和NF-κBp升高是孕婦發生PET的獨立危險因素，血清TLR4和NF-κBp蛋白水平可作為診斷PET的血清學標志物。

但研究結論也存在一定的局限性，納入的PET患者為31例，樣本量相對較小，統計學效能不高；其次，單純以TLR4和NF-κB為參考診斷PET的敏感性和特異性不高。因此，后續應進行多中心前瞻性研究，進一步明確TLR4和NF-κB在PET發生中的作用及可能分子機制。