I-FABP、Gln及CBG在新生兒壞死性小腸炎中表達(dá)及臨床意義*

杜會(huì)蒙 李 欽 張園園 高香花

鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院 河南省兒童醫(yī)院 鄭州兒童醫(yī)院新生兒外科，河南省鄭州市 450000

新生兒壞死性小結(jié)腸炎(Neonatal necrotizing colitis，NEC)在近20年來發(fā)病率有逐漸上升的趨勢，與NICU、早產(chǎn)兒存活率增加有關(guān)[1]。大多數(shù)患者在確診時(shí)腸道壞死明顯，對患者預(yù)后造成不良影響[2]。腸型脂肪酸結(jié)合蛋白(Intestinal fatty acid binding protein，I-FABP)僅在胃腸道黏膜中存在，特異性較高，在以往文獻(xiàn)研究中發(fā)現(xiàn)，在腸缺血性疾病中I-FABP表達(dá)明顯升高[3]。谷氨酰胺(Glutamine，Gln)作為人體中含量豐富的氨基酸，Gln缺乏在多種疾病中發(fā)揮著重要的作用，其濃度變化可能與NEC發(fā)生密切相關(guān)[4]。在以往文獻(xiàn)研究中認(rèn)為，β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase，CBG)濃度變化比腸道組織學(xué)變化更早，可作為腸道缺損性損傷的重要生化指標(biāo)[5]。為了解上述指標(biāo)在NEC中的臨床意義，本研究收集2016—2020年本院收治的NEC患者臨床資料，通過對比分析進(jìn)一步討論I-FABP、Gln及CBG與NEC的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年2月—2020年2月在本院新生兒科收治的NEC患兒111例設(shè)為觀察組，其中男58例，女53例，胎齡 27+2～40+1周，平均胎齡(37.59±1.88)周，平均體重(2 867±559)g，參考《實(shí)用新生兒學(xué)》[3]分期：Ⅰ期29例，Ⅱ期58例，Ⅲ期24例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)臨床檢查、影像學(xué)檢查等確診；(2)患兒監(jiān)護(hù)人知曉并同意本次研究，簽署相關(guān)知情同意書；(3)符合《實(shí)用新生兒學(xué)》[3]中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)住院時(shí)間低于24h；(2)存在先天性消化道疾病患兒；(3)存在免疫性或血液疾病者。另選取本院同期出生健康新生兒105例作為對照組，入選經(jīng)體檢顯示身體健康，無其他影響本研究疾病存在。其中男51例，女54例，胎齡27+2～40+1周，平均胎齡(37.89±1.16)周，平均體重(2 922±560)g。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 I-FABP、Gln及CBG檢測方法 患兒在確診后24h內(nèi)空腹采血，健康新生兒則在同期取頭或上肢靜脈血5ml，處理后進(jìn)行檢測。I-FABP使用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行檢測，所使用試劑由上海酶聯(lián)生物研究所提供，實(shí)驗(yàn)步驟均按照試劑所配套說明書進(jìn)行。Gln使用反向高效液相色譜法進(jìn)行檢測，使用儀器由瑞士BUCHI公司所提供的Sepcore X50反相高效液相色譜儀，試劑為儀器配套，實(shí)驗(yàn)步驟均按照試劑所配套說明書進(jìn)行。CBG使用酶聯(lián)免疫吸附進(jìn)行測定，試劑由上海希美生物科技有限公司提供。

1.3 觀察指標(biāo) 對比不同人群以及不同分期NEC者中I-FABP、Gln及CBG表達(dá)水平，并分析I-FABP、Gln及CBG對NEC診斷價(jià)值。

2 結(jié)果

2.1 兩組I-FABP、Gln及CBG水平比較 觀察組患者I-FABP、CBG水平明顯高于對照組，Gln水平則明顯低于對照組(P<0.05)，見表1。

表1兩組I-FABP、Gln及CBG水平比較

2.2 NEC不同分期患者I-FABP、Gln及CBG水平比較 I期NEC患兒I-FABP、CBG水平明顯低于Ⅱ期、Ⅲ期，Gln則明顯高于Ⅱ期、Ⅲ期(P<0.05)，見表2。

表2NEC不同分期患者I-FABP、Gln及CBG水平比較

2.3 I-FABP、Gln及CBG對NEC診斷價(jià)值分析 ROC結(jié)果顯示，I-FABP、Gln及CBG對NEC單獨(dú)檢測AUC分別為0.854、0.809、0.841，聯(lián)合(同時(shí)檢測I-FABP+Gln+CBG)診斷為0.886，明顯高于單獨(dú)診斷(P<0.05)。見表3及圖1。

表3I-FABP、Gln及CBG對NEC診斷價(jià)值分析

圖1I-FABP、Gln及CBG單項(xiàng)及聯(lián)合診斷ROC曲線圖

3 討論

NEC隨著患者病情進(jìn)展，在晚期會(huì)有腸道缺血、壞死、穿孔等表現(xiàn)，可引發(fā)急性腹膜炎，嚴(yán)重威脅患兒生命健康。因此，尋找NEC診斷、預(yù)后評估、病情評估的血清學(xué)標(biāo)志物是臨床研究熱點(diǎn)。

3.1 I-FABP、Gln及CBG水平在NEC的表達(dá)及意義 I-FABP在小腸單層柱狀上皮中分泌，屬于水溶性蛋白質(zhì)，由于其只在腸道黏膜中存在，組織來源特異性高。在以往文獻(xiàn)研究中顯示，I-FABP水平與脂代謝存在相關(guān)性，在腸道中脂肪酸攝取多的部位I-FABP表達(dá)峰度也明顯增高，脂肪酸攝取少的則表達(dá)較低[6]。I-FABP也有較強(qiáng)的組織特異性，在小腸、陷窩表皮、結(jié)腸黏膜微絨毛頂端中表達(dá)水平明顯增加，在成人中只在十二指腸、胃部表達(dá)豐富。在出現(xiàn)腸道缺血性后，會(huì)累及腸黏膜上皮細(xì)胞，從而刺激小腸單層柱狀上皮細(xì)胞分泌出I-FABP，隨后由門靜脈系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)到外周血周。

Gln作為一種氨基酸，機(jī)體中所有的細(xì)胞內(nèi)均含有Gln酶，起可合成Gln。在目前臨床中認(rèn)為，如果機(jī)體出現(xiàn)某種特定的感染、高代謝的話機(jī)體中所產(chǎn)生的Gln就無法滿足機(jī)體的基本需求，這時(shí)候Gln就屬于必需的氨基酸，因此Gln也是條件需要氨基酸。在相關(guān)文獻(xiàn)中表明，在新生兒中低出生體重、早產(chǎn)兒機(jī)體所合成的Gln酶活力低下，并不能滿足機(jī)體的需求，且嬰幼兒生長發(fā)育快，對Gln需求高于成年人，因此，其血漿中的濃度也低于成年人，患病率較高。CBG可在機(jī)體組織出現(xiàn)早期損傷時(shí)就迅速上升，敏感性佳，在腸道中分布可達(dá)80%以上，提示CBG水平變化對腸道缺血損傷具有較高的特異性。在此基礎(chǔ)上，有研究顯示，血清中CBG的水平變化，發(fā)現(xiàn)在早期腸道損傷中CBG水平會(huì)明顯增加，且隨著缺血的時(shí)間推移，其濃度也會(huì)進(jìn)一步增加[7]。

3.2 I-FABP、Gln及CBG水平對NEC的診斷價(jià)值 在本研究中NEC患兒血液中I-FABP、CBG水平明顯升高，Gln則明顯降低，且隨著患兒病情進(jìn)展，I-FABP、CBG水平呈逐漸上升趨勢，Gln呈逐漸下降趨勢。提示：I-FABP、CBG及Gln可為NEC早期診斷提供參考，且三者水平變化與患者病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。進(jìn)一步行ROC曲線分析結(jié)果顯示，三者聯(lián)合診斷NEC時(shí)，AUC面積為0.886，明顯高于各項(xiàng)單獨(dú)診斷，提示三者聯(lián)合可為臨床診斷提供更全面參考信息，在一定程度可提高NEC早期診斷率。

綜上所述，NEC患兒中I-FABP、CBG水平明顯上升，而Gln水平明顯降低，三者水平變化可為患者病情評估提供參考，且三者聯(lián)合在NEC診斷中有較高的使用價(jià)值。但本研究樣本例數(shù)較少，可能對結(jié)論產(chǎn)生一定影響，可進(jìn)一步擴(kuò)大研究，分析三者對NEC患者預(yù)后評估價(jià)值。