免疫相關指標水平變化在結直腸癌患者中的臨床意義研究*

邱麗湞 吳 博 曾宇婷 劉宇平 劉鈺君

廣州醫科大學附屬第四醫院1 健康管理中心 2 檢驗科 3 病理科，廣東省廣州市 511300

作為臨床上人類的高發癌癥，結直腸癌現今的發病機制還未明確，研究認為多與不良生活環境和飲食習慣、遺傳和基因突變等多種因素協同作用導致。近年有研究結果提示，結直腸癌患者其病情的出現與發展均離不開體內免疫系統的紊亂，同時還有研究結果證明患者機體內的炎癥反應亦可影響結直腸癌患者的病情[1]。作為調節患者機體內免疫細胞中調節免疫的重要細胞，是細胞間傳遞信息的重要物質[2]。本研究主要探討血清免疫相關因子、外周血T淋巴細胞亞群及自然殺傷細胞(NK細胞)在結直腸癌患者中的水平變化，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性選取本院2019年1月—2020年12月收治的42例結直腸癌患者為腸癌組，慢性腸炎患者40例為良性組，另選同期35例健康體檢者為健康組。腸癌組男27例，女15例；平均年齡(55.62±8.89)歲。良性組男27例，女13例；平均年齡(54.67±8.21)歲。健康組男24例，女11例；平均年齡(53.74±7.82)歲。腸癌組均經病理學確診，臨床病理分期(TNM)Ⅳ期6例，Ⅲ期8例，Ⅱ期17例，Ⅰ期11例。診斷標準：腸癌組的病理診斷標準參照《腫瘤病理診斷規范(結直腸癌)》[3]，臨床分期參照AJCC癌癥分期指南第8版。良性組納入標準參照《內科學》第8版中的診斷標準。排除標準：肝腎功能嚴重不全者；存在其他部位腫瘤者；生命體征不穩定者等。所用標本為常規診療完成后的剩余空腹靜脈血標本，凍存時間不超過30d內備用，均征得患者知情同意及符合醫院倫理要求。

1.2 方法 T淋巴細胞亞群CD4+、CD3+、CD8+CD28-、CD8+以及外周血NK細胞含量采用流式細胞儀檢測。血清免疫相關因子指標包括腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-2(IL-2)、干擾素-γ(IFN-γ)、白介素-22(IL-22)，白介素-8(IL-8)，取2ml外周血標本以3 000r/min離心12min后取上清液，采用酶聯免疫吸附法測定各指標水平。

1.3 觀察指標 (1)比較三組受試者的T淋巴細胞亞群(CD4+、CD3+、CD8+CD28-、CD8+)及外周血NK細胞含量。(2)比較三組受試者血清免疫相關因子：(包括血清IL-22、TNF-α、IL-2、IL-8、IFN-γ)水平。(3)比較不同臨床分期結直腸癌患者T淋巴細胞亞群(CD4+、CD3+、CD8+CD28-、CD8+)及外周血NK細胞含量。(4)比較不同臨床分期的結直腸癌患者的血清免疫相關因子水平。

2 結果

2.1 各組T淋巴細胞亞群及外周血NK細胞含量比較 患者的外周血CD8+、CD8+CD28-含量均以腸癌組最高，良性組次之，健康組最低；NK細胞、CD3+、CD4+含量均以腸癌組最低，良性組次之，健康組最高；各組間差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

2.2 各組血清免疫相關因子指標水平比較 血清TNF-α、IL-22、IL-8水平以腸癌組最高，良性組次之，健康組最低；而血清IL-2、IFN-γ水平以腸癌組最低，良性組次之，健康組最高；各組間差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表1三組T淋巴細胞亞群及外周血NK細胞含量比較

2.3 外周血NK細胞和T淋巴細胞亞群含量在不同臨床分期結直腸癌患者間比較 患者外周血CD8+、CD8+CD28-含量顯示Ⅰ期<Ⅱ期<Ⅲ期<Ⅳ期；患者外周血NK細胞、CD3+、CD4+含量顯示Ⅰ期>Ⅱ期>Ⅲ期>Ⅳ期；各分期間差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表2三組血清免疫相關因子水平比較

表3外周血NK細胞和T淋巴細胞亞群含量在不同臨床分期結直腸癌患者間比較

2.4 不同臨床分期的結直腸癌患者血清免疫相關因子水平比較 患者血清TNF-α、IL-22、IL-8水平顯示Ⅰ期<Ⅱ期<Ⅲ期<Ⅳ期；IL-2、IFN-γ水平顯示Ⅰ期>Ⅱ期>Ⅲ期>Ⅳ期；各分期間差異有統計學意義(P<0.05)，見表4。

表4血清免疫相關因子水平在不同臨床分期結直腸癌患者間的對比

3 討論

早期結直腸癌并無明顯癥狀，嚴重時可致使患者生存周期縮短。有研究發現腫瘤的發生和發展既與細胞內基因表達失調密切相關，更與細胞本身所處的腫瘤微環境具有密切關系。構成腫瘤細胞微環境的重要因素之一就包括腫瘤宿主的免疫狀況，而T淋巴細胞是能反應腫瘤宿主免疫狀況的指標之一。

T細胞中CD8+細胞對于機體內的殺傷細胞(細胞毒T細胞)及免疫細胞(CD8+CD28-調節性T細胞)均具有一定的表達作用，CD3+是成熟T細胞，代表了人體的總免疫狀態；CD4+在機體內多用于輔助機體進行關于腫瘤的免疫性問答[4-5]。NK細胞同樣作用于抗腫瘤的免疫問答，其可通過殺傷腫瘤細胞從而發揮抗腫瘤作用，當其水平越低則對患者體內腫瘤細胞的作用越弱，從而致使結直腸癌患者病情加重。本研究結果顯示，腸癌組外周血CD8+CD28-、CD8+含量較健康組和良性組相比更高，NK細胞、外周血CD3+、CD4+含量則較低，TNMⅠ～Ⅳ期結直腸癌患者外周血CD8+、CD8+CD28-含量均逐漸升高，NK細胞、CD3+、CD4+含量均逐漸下降，提示檢測機體T淋巴細胞可輔助預測及診斷結直腸癌患者的病情，進而為臨床治療提供依據，與張帆[6]研究結果一致。IFN-γ可通過增強機體內腫瘤細胞對應標記抗體的攝取功能，還可通過提升抗原呈遞細胞的功能，從而產生免疫調節作用。IL-22主要由CD4+細胞中的Th22細胞分泌的細胞免疫因子，可通過活化分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路，促進腫瘤的發生發展，因此當機體內IL-22水平過高時可與相關受體結合轉導活化信號，促使機體內腫瘤細胞的增殖分化，致使結直腸癌患者病情加重。IL-8是Th2細胞克隆分泌，可抑制Th1細胞對IFN-γ和IL-2的合成和分泌，目前發現，其與支氣管原位癌、肺癌等多種惡性腫瘤的發生發展密切相關。本研究結果顯示，腸癌組血清TNF-α、IL-22、IL-8水平高于良性組和健康組，血清IL-2、IFN-γ水平則較低，結直腸癌患者TNMⅠ～Ⅳ IFN-γ、IL-2水平均逐漸下降，血清TNF-α、IL-8、IL-22水平則逐漸升高，提示檢測機體免疫相關因子可有效預測及診斷結直腸癌患者的病情嚴重程度，與郭小艷[7]研究結果一致。

綜上所述，NK細胞、CD3+、CD4+含量和血清IL-2、IFN-γ水平越低；外周血CD8+、CD8+CD28-含量和血清TNF-α、IL-22、IL-8水平越高，均提示患者發生結直腸癌的可能性越大，臨床可通過檢測外周血NK細胞、CD3+、CD4+、CD8+、CD8+CD28-含量及血清TNF-α、IL-22、IL-8、IL-2、IFN-γ水平的變化對結直腸癌患者的病情進行有效的預測及診斷，有利于在該病初期即進行相應的有效干預，可能對提高結直腸癌患者預后具有積極的臨床作用和意義。