誘導性抗-S聯合抗-Wra抗體致疑難配血分析*

熊玉琪，董 珀，鄒 昕，虞 茜，楊紅梅△

江蘇省常州市中心血站：1.檢測中心；2.輸血研究室，江蘇常州 213003

天然產生的抗-A和抗-B是人血清或血漿中唯一規則存在的紅細胞抗體，其他所有抗體均稱為“紅細胞意外抗體”(不規則抗體)。紅細胞不規則抗體已成為影響輸血安全、血型鑒定及交叉配血不合的重要原因之一。我國僅少數血站將獻血者不規則抗體篩查列為常規檢測項目。本文對1例誘導性抗-S聯合抗-Wra抗體致疑難配血進行了分析。

1 資料與方法

1.1一般資料 患者，男，年齡65歲，無輸血史及藥物史，因肝門膽管惡性腫瘤、梗阻性黃疸入院，入院查體血紅蛋白80 g/L，總膽紅素208.1 μmol/L，直接膽紅素179.6 μmol/L。交叉配血不合、直接抗人球蛋白試驗陽性送至本血站進行特殊配血；兩個月后因嚴重貧血，血紅蛋白47 g/L再次送檢，申請特殊配血。

1.2儀器與試劑 久保田KA-2200血清學專用離心機，37 ℃恒溫水浴箱。單克隆抗-A、抗-B(批號：20190814)，抗-C(批號：20193001)，抗-c(批號：20193101)，抗-E(批號：20203201)，抗-e(批號：20193301)，抗-S(批號：20191102)，抗-IgG+C3d(批號：20195001)，抗-IgG(批號：20195101)，抗-C3d(批號：20195201)，國產譜細胞(批號：20207011)，以上試劑均來自上海血液生物醫藥有限責任公司；酸放散試劑(上海申型醫學科技公司，批號：20192103)，抗人球蛋白檢測卡(強生公司，批號：AHC156H)，進口抗篩細胞(匈牙利REAGENS，批號：702007)，進口譜細胞1(匈牙利REAGENS，批號：732007)，進口譜細胞2(Sanquin，批號：8000450711)，凝聚胺試劑盒(珠海貝索，批號：A191003)。

1.3方法 采用試管法進行ABO及Rh分型鑒定，Coombs試驗，抗體鑒定試驗及酸放散試驗進行特異性抗體鑒定，在鹽水、凝聚胺介質和經典抗人球法進行交叉配血，所有實驗嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》及試劑說明書進行。

2 結 果

2.1血型鑒定及抗人球實驗結果 患者血型為O型，Rh表型為CcDEe。Coombs實驗結果見表1，患者血清中含有IgG類不規則抗體，其特異性有待進一步鑒定。

表1 Coombs實驗結果

2.2抗體鑒定

2.2.1初次鑒定 使用進口譜細胞1進行初次不規則抗體鑒定。受自身抗體影響，凝聚胺介質下及放散液與各譜細胞均有強凝集；強生卡中各細胞反應凝集強弱不同，但無清晰格局，無法確認不規則抗體類型。考慮本站實驗條件有限，將患者標本送至上海市血液中心檢測，結果反饋不規則抗體無特異性。

2.2.2再次鑒定 兩個月后再次送檢，抗體特異性鑒定使用進口譜細胞2?；颊哐逶诳谷饲蚪橘|中1、3、5、7、10、11、12、15號細胞反應，對照格局表分析得出患者血清存在IgG和IgM類抗-S抗體，同時5號和16號細胞反應陽性說明患者血清同時存在抗-Wra抗體。

2.3配血方案 首次鑒定不規則抗體無特異性，進行同型配血。選取O型，Rh分型為CcDEe血液進行鹽水、凝聚胺和抗人球介質配血，結果均有凝集(強度1+)，配血不合；進一步分析反應格局表，抗人球介質中有部分反應較強的篩選細胞，選取與上述篩選細胞無反應或反應弱的ccDEE表型O型紅細胞進行交叉配血，鹽水、抗人球介質下配血反應均為陰性，凝聚胺介質下為陽性(強度1+)。因抗體特異性不明，鹽水和抗人球介質相合的血液僅供緊急輸血(首次鑒定獻血者未輸注紅細胞)。再次送檢時不規則抗體鑒定格局清晰，選取抗-S陰性、ABO、Rh同型紅細胞進行配血。雖存在自身抗體干擾使凝聚胺介質下反應呈陽性(強度2+)，排除特異性抗體的同型血液可應用于糾正患者貧血。

3 討 論

MNSs血型是臨床重要性僅次于Rh的血型系統。有研究報道，在中國S抗原的陰性率為93.44%，為多態性抗原[1]。抗-S抗體大多為免疫產生，與輸血、妊娠相關，是經抗原刺激后產生的同種抗體[2]，很少為自然產生?？?S引起輸血性溶血和新生兒溶血均有報道，臨床意義較大[3]。Wra屬于Digeo血型系統，在中國人中陽性率<0.01%，且與對偶抗原Wrb無多態性分布，均為Wrb純合子。Wra雖為低頻抗原但其抗體為常見抗體，且多為非免疫性抗體。既往文獻報道中抗-Wra多與其他不規則抗體共同出現，自身溶血性貧血患者約1/3含有抗-Wra抗體，也可單獨引起輸血性溶血和新生兒溶血反應[4-5]。這提示，即使為低頻抗原在臨床輸血及鑒定中也應高度重視。

不規則抗體的產生和鑒定一直是輸血安全的重要課題。除妊娠、異體輸血等免疫途徑外，也有部分不規則抗體為自然產生。此外，部分疾病患者可因病毒感染、藥物治療或免疫性疾病進展產生不規則抗體。病程進展與不規則抗體的產生、鑒定的相關性目前尚無研究。本文患者無明顯的輸血史等免疫刺激，血清中檢測出IgM和IgG型抗-S和抗-Wra抗體，推測患者可能受環境中類似抗原刺激，機體在免疫亢進狀態下產生相應抗體；也可能是疾病導致患者S抗原減弱?；颊呤状芜M行抗體鑒定時，檢測出自身抗體及未知同種抗體，可能是患者免疫調節異常導致。此外，因實驗方法對抗體濃度的要求無法排除首次鑒定時抗-S及抗-Wra抗體并未產生[6]。再次檢測時，抗體反應格局清晰，且反應強度增強。對比前后兩次的實驗結果不難發現抗體檢測濃度與患者疾病的進展相關，其是否有助于判斷疾病的進程需要進一步的擴大樣本研究。同時，建議臨床患者的不規則抗體鑒定可通過不同間隔期抗體鑒定進行明確。

為保障輸血安全，不規則抗體篩查是必不可少的環節。有研究報道，不規則抗體多見于實體瘤和血液病患者，可能與異體輸血、藥物治療及免疫功能紊亂有關[7-9]。對于不規則抗體篩查陽性患者，部分明確抗體類型的應使用同型無相應抗原且配血相合的紅細胞；部分未知同種抗體的患者則盡量不輸血。確實需要輸血治療的患者在配血時建議ABO、Rh(D、C、E、c、e)同型配血，可規避絕大多數同種抗原[10]。同時結合譜細胞反應格局，規避與格局相近抗原，為疑難配血的緊急用血配合積累經驗。

綜上所述，對擬行輸血治療患者開展不規則抗體篩查十分重要，尤其是實體瘤、血液病等患者。在遇到低頻抗體時，需評估其臨床意義盡量規避抗原輸注。實體瘤等免疫功能異?；颊叩牟灰巹t抗體鑒定時間和間隔期值得進一步研究。遇到未知抗體的疑難配血，可緊密結合譜細胞反應格局多做分析嘗試。