王張敏 張 澤 張穎聰 于洪偉 高宏民 常 東△
(1上海市浦東醫院-復旦大學附屬浦東醫院檢驗科 上海 201399;2復旦大學附屬華山醫院檢驗科 上海 200040)
病原菌是各種感染性疾病的病原體之一,臨床常見的病原菌有金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌、大腸埃希菌、鼠傷寒沙門氏菌等。實驗室檢測病原菌主要通過兩類方法,第一類是傳統方法,包括涂片鏡檢、分離培養、免疫學檢測等,第二類是分子檢測技術,包括PCR、基因測序、基因芯片、質譜等。傳統方法靈敏度低、易漏檢,分子檢測技術則花費高昂、對操作人員和實驗室設備的要求高。因此,急需開發快速、簡單、成本低、靈敏度高的檢測方法。基于納米材料構建的適配體傳感器具有靈敏度高、特異性好、操作簡便、價格低廉等優勢,有望替代傳統診斷工具檢測和量化病原菌。本文介紹了適配體傳感器常用的納米材料的特性和優勢,以及基于比色法、熒光法和電化學法構建的適配體傳感器檢測各種病原菌的研究進展,對于拓展適配體相關的認識有積極意義。
傳統生物傳感器的識別元件是抗體和酶,由于分子生物學和基因工程的巨大進步,識別元件進一步擴展到核酸分子。1990年Tuerk等[1]發現噬菌體的T4 DNA聚合酶可與兩種特定的RNA序列結合,其一是在噬菌體mRNA中發現的野生型序列,這種RNA被定義為噬菌體T4 DNA聚合酶特異的RNA適配體。適配體由單鏈寡核苷酸(ssDNA或ssRNA)經折疊形成,長度通常為20~60個堿基,可由指數富集的配體系統進化技術(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)選擇得到。……