TILs 在LuminalB 型、Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌中表達差異及與預后的關系

馬曉明 劉斌

1.徐州醫科大學研究生學院，江蘇徐州 223001；2.徐州醫科大學附屬醫院腫瘤外科，江蘇徐州 221006

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，隨著對乳腺癌的深入研究，其分類已從形態學進入分子分型的階段，并用于指導臨床治療[1-3]。但目前現有的分子分型等方法尚無法完全概括不同類型乳腺癌的的預后特征、臨床治療反應性，亟需尋求更多的預后、療效預測指標，以用于指導個體化治療[4]。腫瘤浸潤淋巴細胞（tumor infiltrating lymphocytes，TILs）為存在于腫瘤癌巢內、間質中的以淋巴細胞為主的異質性淋巴細胞群體，不同類型乳腺癌腫瘤組織中TILs 水平存在較大差異[5]。乳腺癌組織內TILs 比例與乳腺癌患者的預后相關[6]。目前臨床對于TILs 與乳腺癌關系研究均集中于三陰型、人表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，Her-2）陽性[激素受體（hormone receptor，HR）陰性]兩種分子分型的乳腺癌患者[7-8]，對于LuminalB 型、Her-2 陽性（HR 陽性）型兩型研究較少。本研究重點探究LuminalB 型、Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌患者原發灶TILs 的浸潤程度及其與預后關系，旨為這兩型治療方案的選擇提供思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2015 年1 月至2016 年2 月徐州醫科大學附屬醫院確診并接受乳腺癌手術治療的59 例LuminalB 型和46 例Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌患者標本，并對所有研究對象的臨床資料進行回顧性分析。本研究經我院醫學倫理委員會批準同意（批號：AF-35/06.1）。

1.1.1 納入標準 ①經病理學診斷為LuminalB 型或Her-2 陽性（HR 陽性）型[9]；②女性；③年齡＞18 歲；④術后配合治療及檢查；⑤臨床資料完整。

1.1.2 排除標準 ①合并其他惡性腫瘤；②雙側乳腺癌；③術前接受放療、化療及內分泌等有關治療；④心肝腎等重要臟器功能障礙；⑤妊娠或哺乳期女性；⑥合并精神疾病或認知功能障礙；⑦合并免疫系統或血液系統疾病；⑧中途退出或失訪者。

1.2 TILs 測定方法

所收集的乳腺癌標本均用福爾馬林固定，經常規石蠟包埋制成蠟塊，切片后采用蘇木精-伊紅染色方法對乳腺癌組織進行染色，光學顯微鏡（型號：BTM-23R，上海巴拓儀器有限公司）下評估TILs 浸潤水平。判定標準TILs 的判定標準[10]：TILs 的浸潤水平＜10%為無浸潤或低浸潤，10%～39%為中等浸潤，＞39%為高浸潤；并依據浸潤程度分為TILs 低/中等浸潤、TILs 高浸潤。

1.3 預后隨訪

隨訪5 年，采用電話、門診等方式對LuminalB型、Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌患者進行隨訪，隨訪截至2021 年10 月31 日，統計患者復發情況；并依據患者術后是否復發分為復發組和未復發組。

1.4 資料收集

收集影響LuminalB 型、Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌患者預后的臨床資料，主要包括年齡、體重指數（body mass index，BMI）、腫瘤大小、腫瘤分期、是否發生淋巴結轉移、雌激素受體（estrogen receptor，ER）表達、孕激素受體（progesterone receptor，PR）表達、是否絕經、Ki67 表達及TILs 浸潤程度。

1.5 統計學方法

采用SPSS 25.0 軟件對數據進行統計分析，計量資料采用均數±標準差（±s）表示，比較采用t 檢驗；計數資料例數和百分比，比較采用χ2檢驗。兩計數資料相關性采用列聯相關性分析。繪制Kaplan-Meier復發曲線。以P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 LuminalB 型、Her-2 陽性（HR 陽性）乳腺癌患者TILs 的浸潤水平

LuminalB 型、Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌患者TILs 的浸潤水平分別為（39.74±4.85）%、（35.21±4.06）%，Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌患者TILs 的浸潤水平低于LuminalB 型（t=5.093，P ＜0.001）。

2.2 TILs 與LuminalB 型乳腺癌患者預后的關系

LuminalB 型乳腺癌復發組腫瘤分期為T3～T4期占比、TILs 低/中等浸潤占比均高于未復發組（P ＜0.05）；經列聯相關性分析，LuminalB 型乳腺癌復發情況與腫瘤分期、TILs 浸潤程度存在關聯；TILs 浸潤程度為低/中等浸潤的LuminalB 型乳腺癌患者與高浸潤患者復發曲線比較，差異有統計學意義（P ＜0.05）。見表1、圖1。

圖1 LuminalB 型乳腺癌患者癌組織TILs 不同浸潤程度復發曲線

表1 TILs 與LuminalB 型乳腺癌患者預后的關系[例（%）]

2.3 TILs 與Her-2 陽性（HR 陽性）乳腺癌患者預后差異分析

Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌復發組腫瘤分期為T3～T4期占比、TILs 低/中等浸潤占比高于未復發組（P ＜0.05）；經列聯相關性分析，Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌復發情況與腫瘤分期、TILs 浸潤程度具有相關性；TILs 浸潤程度為低/中等浸潤的Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌患者與高浸潤患者復發曲線比較，差異有統計學意義（P ＜0.05）。見表2、圖2。

圖2 Her-2 陽性（HR 陽性）乳腺癌患者癌組織TILs 不同浸潤程度復發曲線

表2 TILs 與Her-2 陽性（HR 陽性）乳腺癌患者預后的差異分析

3 討論

乳腺癌是一種高度異質性的腫瘤，不同乳腺腫瘤對治療的反應及預后具有很大的差別[11]。2019 年中國臨床腫瘤學會乳腺癌指南對原來的LuminalB 型分型進一步調整，分為LuminalB 型和Her-2 陽性（HR陽性）型，但對兩型治療方案未提出明確改變，而臨床大量數據顯示原來LuminalB 型預后差異明顯[12-14]。本研究通過對TILs 浸潤程度在LuminalB 型、Her-2 陽性（HR 陽性）型表達程度及與預后關系的關系進行分析，對協助判斷患者預后、制訂治療方案等提供一定的理論指導。

本研究結果顯示，LuminalB 型和Her-2 陽性（HR陽性）型乳腺癌患者TILs 的浸潤水平存在一定的差異。既往有研究表明[15-17]，TILs 的浸潤水平在不同類型乳腺癌腫瘤組中存在較大差異，其水平與HR 表達、淋巴結受累等因素有關。腫瘤發生后，機體可產生針對腫瘤抗原的適應性免疫應答，Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌患者TILs 的浸潤水平低于LuminalB 型，可能是與LuminalB 型乳腺癌患者乳腺癌細胞具有較強的免疫原性，可較大程度地激活機體的免疫反應有關。正常情況下，人體免疫系統與免疫細胞維持著一定的動態平衡，若平衡被打破，可導致腫瘤的發生發展，并可在一定程度上影響治療效果及預后[18-19]。TILs 為腫瘤微環境中多種免疫細胞的統稱，可反映機體的抗腫瘤反應能力[20-22]。截至隨訪結束，LuminalB 型、Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌患者未復發率分別為84.75%、60.87%；經列聯相關性分析，LuminalB 型、Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌5 年復發情況與腫瘤分期、TILs 浸潤程度具有相關性。TILs 浸潤程度為低/中等浸潤的LuminalB 型、Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌患者未復發率分別為72.73%、46.43%；TILs 浸潤程度為高浸潤的LuminalB 型、Her-2 陽性（HR 陽性）型乳腺癌患者未復發率分別為91.89%、83.33%；LuminalB 型、Her-2 陽性（HR 陽性）型兩種分型乳腺癌患者TILs 浸潤程度均與預后具有一定的相關性。高TILs 浸潤可能更有利于從激發腫瘤免疫機制的治療中獲益，推測高TILs 浸潤對腫瘤抗原的免疫應答較高，并可通過更好地從術后治療中獲益，近而可降低乳腺癌患者的復發率[23-28]。

綜上所述，LuminalB 型乳腺癌患者TILs 浸潤水平高于Her-2 陽性（HR 陽性）患者，且兩種分型乳腺癌患者TILs 浸潤程度均與預后具有一定的相關性；臨床中通過對LuminalB 型、Her-2 陽性（HR 陽性）兩種分型乳腺癌患者TILs 浸潤水平進行檢測，有利于評估患者預后情況。