中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白在診斷腎性貧血及評估病情中的應用價值

李曉亮, 張 黎

(1.安徽醫科大學附屬巢湖醫院 輸血科, 安徽 巢湖, 238001;2.江蘇省疾病控制中心 分子診斷組, 江蘇 南京, 210009)

腎性貧血(RA)是慢性腎臟病的常見并發癥，是由促紅細胞生成素(EPO)缺乏、鐵代謝異常、骨髓造血功能抑制等因素引起的[1]。早期RA可無任何癥狀，但其進展與臨床預后和生存質量相關[2]。目前，中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)已用于急性腎損傷(AKI)和慢性腎臟病(CKD)的早期發現和療效評估[3], 但有關血NGAL在RA中的應用研究則較少[4]。本研究分析血NGAL水平在CKD合并不同程度貧血患者中的變化情況及其與貧血指標的相關性，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年12月—2021年10月安徽醫科大學附屬巢湖醫院收治的CKD合并貧血患者86例，所有患者均符合《中國腎性貧血診治臨床實踐指南》[5]中的診斷標準。納入標準: ① 初治患者，年齡>15周歲，一般臨床資料及實驗室數據完整; ② 血常規提示男性血紅蛋白(Hb)<130 g/L, 非妊娠期女性Hb<120 g/L, 妊娠期女性Hb<110 g/L; ③ 患者未合并其他導致貧血的疾病。依據中國貧血診斷標準[6], 將86例患者按照貧血程度分為輕癥組(Hb≥90 g/L)54例、中重癥組(Hb<90 g/L)32例; 另選取同期CKD未合并貧血患者36例作為對照組。所有患者均符合CKD診斷標準[7]。本研究經本院倫理委員會批準(編號: KYXM-202201-002)。

1.2 儀器、試劑及檢測方法

全自動生化分析儀(SIEMENS，型號ADVIA Chemistry XPT)，試劑購自SIEMENS公司，采用肌氨酸氧化酶法檢測血肌酐(Scr), 脲酶法檢測血尿素氮(BUN); 全自動化學發光儀(北京熱景，型號C2000), 試劑購自九強生物技術有限公司，采用磁微粒化學發光免疫分析法檢測血NGAL; 全自動血細胞分析儀(SYSMEX, 型號xn-2800), 試劑購自SYSMEX公司，檢測紅細胞(RBC)、紅細胞壓積(HCT)、Hb。

所有患者均于清晨空腹8 h狀態下抽取7 mL靜脈血，其中5 mL置于黃色抗凝管，并以1 500 g離心5 min, 取上清用于血NGAL、Scr和BUN檢測; 剩余2 mL置于EDTA-2K抗凝管中充分混勻，用于RBC、HCT和Hb檢測。

1.3 統計學分析

采用SPSS 20.0軟件進行數據統計分析。符合正態分布的計量資料以均數±標準差表示，不符合正態分布的計量資料采用中位數(四分位數間距)表示; 應用Kruskal-Wallis秩和檢驗進行多組間差異比較; 采用Spearman進行指標間相關性分析; 多組間比較及受試者工作特征(ROC)曲線均應用GraphPad Prism8進行繪圖分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 各組CKD患者一般資料

在納入的122例CKD患者中，男65例，女57例，男、女比例為1.14∶1, 患者平均年齡為(63.6±14.3)歲; 按年齡段將患者劃分為青少年(≤40歲)8例，中年(41～65歲)59例，老年(≥66歲)55例。各組患者性別分布及年齡比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組CKD患者一般資料[n(%)]

2.2 各組CKD患者血NGAL、Scr和BUN水平比較

中重癥組血NGAL、Scr、BUN水平高于輕癥組和對照組，輕癥組血NGAL、Scr、BUN水平高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見圖1。

A: 各組血NGAL水平比較; B: 各組Scr水平比較; C: 各組BUN水平比較。

2.3 CKD合并貧血患者血NGAL與各項檢測指標的相關性分析

Spearman相關分析顯示，CKD合并貧血患者的血NGAL與RBC、HCT和Hb呈顯著負相關(P<0.05), 與Scr和BUN呈顯著正相關(P<0.05)。見表2。

表2 CKD合并貧血患者血NGAL與各檢測指標的相關性分析

2.4 血NGAL在RA中的診斷價值

ROC曲線分析結果顯示，血NGAL水平診斷RA的曲線下面積(AUC)為0.729, 靈敏度為80.2%(95%CI: 70.6～87.3), 特異度為61.1%(95%CI: 44.9～75.2), 最佳臨界值為134.62 ng/mL。見圖2。

圖2 血NGAL診斷RA的ROC曲線

3 討 論

RA在慢性腎臟病中普遍存在，各期均可出現，且多表現為輕度至中度貧血[8]。一項橫斷面調查[9]顯示, CKD患者的貧血患病率高達51.5%, 且隨著病情發展，患病率會逐漸增高。隨著貧血程度的不斷加重, RA患者會發生心血管并發癥、貧血并發癥以及腎衰竭，甚至會導致死亡[10]。

NGAL是脂質沉積蛋白超家族中的一種25 kDa蛋白，這種蛋白在各種病理狀態下由免疫細胞、肝細胞和腎小管細胞表達和分泌[11]。研究[12]表明，血NGAL與貧血有關聯，是其重要的調控因素。本研究中, CKD合并貧血患者的血NGAL水平顯著高于未合并貧血患者，且貧血患者的血NGAL水平隨著貧血程度的加重而顯著升高，提示血NGAL水平升高是導致RA的關鍵因素，其水平高低與貧血輕重程度密切相關。血NGAL作為一種鐵代謝調節因子，長期升高可通過抑制RBC生長和破壞鐵穩態而導致貧血的產生[13]。當機體出現貧血時，會上調NGAL的表達，導致骨髓前體中NGAL增多，進一步抑制RBC的生成，從而加重貧血[14]。本研究發現, RA患者的Scr和BUN水平顯著升高，且隨著貧血程度的加重而逐步上升，提示患者貧血程度加重不僅受血NGAL水平上升影響，還受腎功能減退的影響。YIN P等[15]報道CKD患者發生貧血的同時會出現腎功能損傷。醫學調查[16]顯示, CKD患者貧血會加劇腎功能惡化，而腎功能惡化又會加重貧血。RA的發生發展與血NGAL水平和患者腎功能情況有著密切的聯系，其可能機制是CKD患者患病初期出現腎功能損傷，腎臟局部炎癥刺激腎小管細胞分泌NGAL, 進而導致貧血的發生。隨著病情逐漸發展，腎小管上皮不斷受損并大量分泌NGAL, NGAL通過抑制RBC生成、破壞鐵穩態等方式加重貧血。隨著腎功能的不斷減退，患者容易出現惡心、嘔吐、食欲減退等癥狀，導致造血原料攝入不足; 此外，尿毒癥患者體內產生的毒素會干擾紅細胞的正常代謝，抑制骨髓造血，也會進一步加重貧血。

YANG H等[17]研究顯示, NGAL是一種可以評價腎功能損傷程度的生物學標志物。本研究也發現血NGAL與Scr和BUN呈正相關，表明血NGAL水平能間接反映患者的腎功能損傷情況。從目前RA的臨床診斷情況來看，其診斷指標有Hb、RBC、HCT等，但多數CKD患者在透析前或發病早期忽視了血常規檢測，且患者早期Hb未出現明顯異常，因此經常被忽視。有學者[18]提出，血NGAL對評估CKD貧血有一定的價值，且其在CKD常規檢測中應用較廣，或可用于CKD非透析患者的貧血篩查。本研究中, ROC曲線分析發現血NGAL對RA有良好的診斷能力，血NGAL診斷RA的最佳臨界值為134.62 ng/mL, 臨床上可以通過檢測血NGAL水平來輔助診斷RA。

本研究仍存在一定的不足，例如調研時間較短、樣本數量偏少，尤其是重度貧血患者數量較少; 患者多為中老年人，青少年人群較少，年齡分布不夠平衡。因此，后續研究應進一步擴大范圍、均衡年齡后進行深入論證。

綜上所述，血NGAL是RA發生和病情發展的關鍵因素，其水平與貧血程度密切相關，血NGAL對RA有良好的診斷能力，動態監測血NGAL水平可為RA的臨床診斷和病情評估提供參考依據。