干燥綜合征患者抗SSA/SSB抗體及IgG與唇腺活檢病理的關系*

陳軍，王敬亞，卜東明，楊增

(1.蕪湖市第二人民醫院 風濕免疫科, 安徽 蕪湖 241000；2.中南大學湘雅醫院, 湖南 長沙 410008)

干燥綜合征(sjogren's syndrome，SS)屬慢性炎癥性自身免疫疾病，其臨床表現以眼口干燥為主。目前SS發病機制尚不清楚，認為可能與遺傳、病毒感染、環境及自身免疫等有關[1]；并認為該病若不及時進行有效治療，可誘發肺間質病變、橋本甲狀腺炎等一系列并發癥。針對SS，臨床普遍認為免疫功能紊亂是導致該病發生發展的主要基礎，加之受炎癥因子的影響，進一步刺激了機體的免疫功能，即表現出抗SSA、SSB抗體水平顯著升高；也有相關研究表示，抗SSA、SSB抗體水平升高受唇腺腺體破壞和組織形態學改變影響[2]；另外，在抗SSA、SSB抗體水平升高的影響下，IgG蛋白含量也會隨之增加。目前關于抗SSA、SSB抗體及IgG表達與唇腺病理關系的文獻報道頗少，尚不清楚唇腺病理是否會直接影響抗SSA、SSB抗體、IgG表達。據此，本研究選取85例疑似SS患者作為研究對象，探討SS患者抗SSA/SSB抗體及IgG與唇腺活檢的關系，結果如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2018年1月—2021年12月診治的85例疑似SS患者，按照唇腺病理活檢(labial salivary gland biopsy，LSGB)結果分為陽性組(LSGB≥3級，n=53)與陰性組(LSGB<3級，n=32)，并根據陽性組的SS唇腺病理損傷程度分為輕度組(n=23)和重度組(n=30)。SS診斷標準：符合干燥綜合征診斷及治療指南中的診斷標準[3]，經臨床病理確診。納入標準：(1)認知功能正常;(2)>18 歲;(3)愿意接受病理活檢。排除標準：(1)合并系統性紅斑狼瘡;(2)患有惡性腫瘤;(3)伴有腦卒中、顱內感染等疾病。

1.2 研究方法

1.2.1基礎資料調查 設計統一的病例調查表，由專業醫師收集受試者臨床資料，包括抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG及唇腺活檢病理結果。

1.2.2血清指標測定 于入院次日采集患者空腹靜脈血3 mL，經3 000 r/min離心10 min，取上清液。選擇免疫散射比濁法,采用貝克曼庫爾特特定蛋白分析系統及配套IgG試劑盒測定IgG，歐蒙免疫印跡法自動操作儀測定抗SSA抗體、抗SSB抗體，試劑盒購于德國歐蒙公司。

1.2.3病理活檢 對受試者唇部進行常規消毒，行局部麻醉后于下唇黏膜距離一側口角和下頜前庭溝分別為1 cm和0.5 cm交界處做一切口，取唇腺3～5 枚，縫合切口后將腺體標本置于10%甲醛溶液中固定，包埋、切片、行蘇木素伊紅(hematoxylin and eosin，HE)染色，病理切片總面積≥4 mm2，制片后下顯微鏡下觀察。根據Chisholm標準和按照淋巴細胞(lymphocytes，LC)浸潤程度將唇腺病理變化分為0～4 級：0 級表示無LC浸潤，1 級表示輕度LC浸潤，2 級表示中度LC浸潤、但未形成灶性，3 級表示4 mm2有一個淋巴細胞浸潤灶；4 級表示4 mm2有一個以上淋巴細胞浸潤灶，其中每個浸潤灶含有50 個淋巴細胞和組織細胞,計數唇腺標本淋巴細胞灶數目；LSGB≥3級為陽性、LSGB<3級為陰性[4]。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 SS陽性率

85例疑似SS患者經唇腺活檢確診為SS陽性(LSGB≥3級)53例，陽性率為62.35%;陰性32例，陰性率37.65%；其中陽性病例中，根據Chisholm標準和按照LC程度劃分為輕度組23例(43.40%)、重度組30例(56.60%)。

2.2 臨床資料

陽性組與陰性組的性別、年齡、BMI等一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)；輕度組與重度組SS患者的性別、年齡、BMI等一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 SS陽性組與陰性組、SS輕度組與重度組的一般資料比較

2.3 抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG

SS陽性組和陰性組抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG比較，陽性組>陰性組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 SS陽性組和陰性組抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG水平比較

2.4 logistic回歸分析

以LSGB結果為因變量(賦值：陽性=1、陰性=2)，以抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG為協變量，經二元logistic回歸分析顯示，抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG升高會對唇腺病理損傷產生影響(P<0.05)。見表3。

表3 LSGB與抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG的關系

2.5 唇腺病理表現

85例疑似SS患者中，LSGB陰性32例，LSGB 0～2級，表現為腺泡大小基本正常、無萎縮、導管無擴張，且導管上皮細胞無增生、間質無或有少量淋巴細胞浸潤。LSGB陽性53例，其中輕度唇腺損害病理，LSGB 3級，表現為腺體輕度萎縮、腺泡呈不規則、大小不等，間質及導管周圍可見少量淋巴細胞浸潤灶，導管擴張，導管上皮細胞無增生；重度唇腺損害病理，LSGB 4級，表現為腺體萎縮明顯、腺泡大小不等，導管擴張、導管上皮細胞增生，間質內伴有彌散性淋巴細胞浸潤，多個灶性淋巴細胞浸潤。見圖1。

注：A為LSGB 0～2級，B為LSGB 3級，C為LSGB 4級。

2.6 唇腺損傷程度與抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG水平

輕度組和重度組SS患者抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG水平比較，輕度組<重度組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 兩組SS患者抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG水平比較

2.7 抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG水平與唇腺損傷病理程度的相關性

Spearman相關性分析結果顯示，抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG水平與唇腺損傷病理嚴重程度呈正相關，差異有統計學意義(P<0.05)。見表5。

表5 抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG與唇腺損傷病理程度的相關性

3 討論

經流行病學調查發現，SS患病率約為0.29%～0.77%，且以女性多見[5]。據數據統計，男女性別之比約為1∶9或1∶10[6]。目前臨床上對于該病發病原因尚未完全闡明，僅認為該病是一種以浸潤炎性細胞和破壞腺體組織為主而引起生理功能減退、器官損傷的彌漫性結締組織病，即隨著病情發展可侵犯淚腺、唾液腺等外分泌腺體，同時也會引起B淋巴細胞異常增殖、組織淋巴細胞浸潤，進而引發口唇干燥、口渴飲水不止、無法進食干硬食物、腮腺腫大、舌質干裂等一系列臨床表現。其中，唇腺組織為反映分泌功能減弱的內分泌腺，在正常情況下具有清潔口腔、潤濕及抗炎的作用，但在SS患者中，受組織淋巴細胞浸潤影響，常導致外分泌腺的腺體及導管上皮萎縮、破壞，進一步引起口干、眼干等癥狀[7]。目前臨床主要是依賴唇腺腺體破壞表現診斷SS，譬如在病理組織形態見外分泌腺腺體萎縮，且LSGB≥1個淋巴細胞浸潤灶，周圍見高度淋巴細胞聚集及淋巴濾泡樣生長中心形成。但由于其屬有創檢查，部分患者依從性相對較差，臨床無法常規開展，加之標本采集時間及方法各異，可能會影響檢測結果的準確性[8]。抗SSA、SSB抗體為臨床用于輔助診斷SS的常用生物標志物，除出現SS患者血清中，也常出現在系統性紅斑狼瘡、自身免疫性肌炎等其他免疫性疾病中[9]。在本研究結果中可見，確診為陽性SS患者，其血清抗SSA抗體、抗SSB抗體水平顯著高于陰性，說明上述抗體在SS患者中呈高表達樣。針對其作用機制分析，可能與唇腺炎性浸潤上皮細胞，通過促進B細胞轉化為漿細胞和激活B細胞，引起B淋巴細胞亢進有關，通過產生大量的抗體，如抗SSA、SSB抗體等，誘發SS疾病[110]。另外，在本研究結果中發現，抗SSA、SSB抗體水平會隨著唇腺損傷程度而發生顯著改變，即重度唇腺損傷患者的抗SSA抗體、抗SSB抗體水平顯著高于輕度組，提示監測抗SSA、SSB抗體在診斷唇腺病理損害進展中具有重要價值[11-12]。據相關研究表示，SS患者因機體存在多種自身抗體，其免疫球蛋白可出現異常增高現象，其中以lgG含量升高最為常見[13]。在本研究結果中可見，陽性組的IgG含量顯著高于陰性組，針對其升高機制分析，可能與其是免疫應答中產生抗體的主要成分有關，因此在臨床上監測SS患者的IgG表達十分必要[14]。

基于對抗SSA、SSB抗體及IgG蛋白的研究，發現這些指標水平會隨著唇腺受累程度而發生改變，即上述已說的抗SSA、SSB抗體會隨著唇腺損傷程度發生改變，而IgG蛋白含量也會受多種自身抗體和細胞因子調控異常而發生改變[15]。故在研究結果中可見，重度組IgG水平明顯高于輕度組。但對于上述結果仍不能確切說明抗SSA、SSB抗體及IgG蛋白表達水平是受唇腺損傷嚴重程度而發生顯著的異常升高[16]。因此本研究將SS患者唇腺損傷病理程度和抗SSA、SSB抗體、IgG納入Spearman相關性模型中檢驗，結果顯示抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG與唇腺損傷病理嚴重程度呈正相關，證實了抗SSA、SSB抗體及IgG水平會隨唇腺損傷程度而變化說法的可靠性。同時也提示臨床可通過觀察上述指標水平為臨床判斷唇腺損傷程度提供重要參考[17-18]。

綜上所述，SS患者的唇腺損傷病理程度與抗SSA抗體、抗SSB抗體及IgG水平相關，臨床可通過動態監測抗SSA抗體、抗SSB抗體、IgG水平，為臨床診治提供指導。