QuECHERS前處理法測定生鮮乳中六種氨基甲酸酯農藥殘留

黃 波 福建省農產品質量安全檢驗檢測中心 福州 350003

氨基甲酸酯類農藥具有選擇性強、高效、廣譜、對人畜低毒、易分解和殘毒少的特點，在農業、林業和畜牧業等方面得到廣泛應用。經食物鏈傳播及獸藥中非法添加農藥，動物源食品中也存在嚴重的殘留現象。研究表明，氨基甲酸酯農藥在胃內酸性條件下容易與食物中的亞硝酸鹽生成亞硝基化合物而呈現誘變性、致突、致畸和致癌作用，嚴重影響人類的健康。

食品安全規定生鮮乳中涕滅威、涕滅威砜、涕滅威亞砜、甲萘威、霜霉威和滅多威六種氨基甲酸酯農藥殘留限量為（MRL）10.0～50.0 μg/kg[1-4]。生鮮乳中氨基甲酸酯農藥殘留檢測比較常用的方法是固相萃取法，該方法處理過程比較繁瑣、耗費的試劑比較多。QuECHERS前處理法具有操作簡便、靈敏度高、定性定量準確、試劑用量少等優點[5-6]。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 牛乳（市購澳牛鮮牛乳）；超高效液相色譜-串聯質譜儀（UPLC-MS/MS），Waters公司；電子天平（奧豪斯儀器（常州）有限公司）；高速離心機（湖南湘儀）；渦旋混合器（IKA）；QuECHERS前處理包（艾杰爾科技有限公司）。涕滅威、涕滅威砜、涕滅威亞砜、甲萘威、霜霉威和滅多威農藥標準溶液對照品（農業部天津環保所）；甲醇（默克）、乙腈（默克）、氯化鈉（國藥）、純凈水（屈臣氏）、甲酸（阿拉丁）、乙酸銨（阿拉丁）。

1.2 標準溶液配制 準確吸取100 μg/mL六種氨基甲酸酯農藥標準儲備液1 mL至10 mL容量瓶中，用甲醇定容。試樣上機時再配制成質量濃度為2.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、20.0 ng/mL、50.0 ng/mL、100.0 ng/mL的標樣曲線工作溶液。

1.3 色譜條件 色譜柱C18（100 mm×2.1 mm，內徑1.7 μm）；流動相：A相-色譜級甲醇，B相-甲酸乙酸銨溶液（10 mmol/L），梯度洗脫條件見表1。流動相流動速度：0.3 mL/min；色譜柱溫度：40℃；試樣進樣體積：1 μL。離子源類型：電噴霧（ESI＋）；毛細管電壓：1.0 kV；離子源溫度：150℃；霧化氣：0.345 MPa；輔助加熱器：0.345 MPa；碰撞氣體類型：氬氣；采集類型：MRM。多反應監測相關農藥離子對及其錐孔電壓和碰撞能量條件見表2。

表1 流動相洗脫程序

表2 六種農藥的質譜參數

1.4 試樣分析步驟 稱量10 g（精確到0.01 g）新鮮牛乳于50 mL離心管中（塑料），準確加入20 mL乙腈溶液，渦旋震蕩5 min，加入5 g氯化鈉，蓋好蓋子后用力振搖3 min，7 500 r/min高速離心5 min。取5 mL上清液于10 mL塑料離心管中，加入QuECHERS前處理包（內含0.75 g無水硫酸鎂、125 mg PSA、25 mg GCB及125 mg C18）渦旋1 min后，7 500 r/min高速離心5 min，取上清液過0.2 μm微孔有機濾膜于1.5 mL進樣瓶中，供超高效液相色譜-串聯質譜測定。

1.5 檢出限與定量限測定 在空白牛乳中添加六種標準品的方法，以特征離子色譜峰的S/N＞3倍信噪比為方法檢出限，以S/N＞10信噪比為方法定量限。牛乳中六種氨基甲酸酯農藥檢出限均為2 μg/kg，定量限均為4 μg/kg。10 μg/kg空白牛乳添加六種農藥的特征離子質量色譜圖見圖1。

圖1 10 μg/kg空白牛乳添加六種農藥的特征離子質量色譜圖

2 結果與討論

QuECHERS方法是在樣品提取液中直接加入固相吸附劑，吸附及凈化樣品的干擾物。PSA吸附糖類和酸類物質，C18吸附脂肪，GCB吸附色素、甾醇物質。結果表明，本分析方法重復性好、結果準確，六種氨基甲酸酯類農藥標準品在2～100 μg/kg具有良好線性相關性。線性相關系數均在R2=0.995以上，加標回收率在78.67%～104.12%，見表3。表明該方法具有簡便、快捷、靈敏度高、定性定量準確等優點，可滿足畜產品安全檢測相關法規的要求。

表3 牛乳中六種氨基甲酸酯農藥的回歸方程、相關系數、添加回收率及相對標準偏差（n=6）