深圳不同區(qū)域草地貪夜蛾田間種群對(duì)3種殺蟲(chóng)劑的抗藥性監(jiān)測(cè)

摘要：為指導(dǎo)科學(xué)用藥防控草地貪夜蛾，本文在室內(nèi)采用浸漬法測(cè)定了采自深圳光明區(qū)、龍崗區(qū)和坪山區(qū)3個(gè)區(qū)域共5個(gè)點(diǎn)的田間草地貪夜蛾種群對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺、乙基多殺菌素和甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽的抗藥性。結(jié)果表明，深圳市草地貪夜蛾種群對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺抗性處于高水平抗性至極高水平抗性階段（110.05～290.77倍），對(duì)乙基多殺菌素抗性處于敏感水平至低水平抗性（1.75～4.80倍），對(duì)甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽抗性處于低水平抗性至中等水平抗性（8.60～15.73倍）。建議在草地貪夜蛾防治中，交替使用乙基多殺菌素和甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽，限制使用氯蟲(chóng)苯甲酰胺。

關(guān)鍵詞：深圳；草地貪夜蛾；殺蟲(chóng)劑；抗藥性

中圖分類號(hào)：S433.4 文獻(xiàn)識(shí)別碼：A 文獻(xiàn)編號(hào)：1005-6114（2024）06-046-04

草地貪夜蛾Spodoptera frugiperda （J.E.Smith）（Lepidoptera：Noctuidae），是夜蛾科灰翅夜蛾屬的一種昆蟲(chóng)，其幼蟲(chóng)以100多種不同的植物物種為食［1］，是玉米、水稻、高粱、甘蔗、花生、大豆和其他一些非糧食作物比如棉花的重要害蟲(chóng)［2］。在玉米上，草地貪夜蛾的幼蟲(chóng)主要取食鮮嫩的幼葉，影響玉米的生長(zhǎng)，降低玉米的產(chǎn)量［3］。海南、臺(tái)灣、西藏南部部分地區(qū)、云南西南部、廣西大部分地區(qū)、廣東、福建、浙江、江西、湖南東部是草地貪夜蛾的高度適生區(qū)［3］，草地貪夜蛾可以在我國(guó)北回歸線以南的熱帶、亞熱帶地區(qū)以及中南半島大部分地區(qū)進(jìn)行周年繁殖［4］，并且該蟲(chóng)在我國(guó)形成季節(jié)性南北遷飛，已成為一種常發(fā)性害蟲(chóng)［5］。

為了減輕草地貪蛾蟲(chóng)害造成的損失，許多農(nóng)民會(huì)使用化學(xué)殺蟲(chóng)劑進(jìn)行防治。長(zhǎng)期使用單一化學(xué)殺蟲(chóng)劑使草地貪夜蛾的抗藥性水平提高，而為了達(dá)到理想防治效果，農(nóng)民會(huì)增加農(nóng)藥的使用次數(shù)及提高用藥量，這更會(huì)加快草地貪夜蛾的抗性水平，同時(shí)也加重農(nóng)產(chǎn)品的農(nóng)藥殘留及對(duì)環(huán)境的污染。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，草地貪夜蛾已對(duì)41種殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生了不同程度的抗性，包括有機(jī)磷類、擬除蟲(chóng)菊酯類、雙酰胺類、多殺菌素等［6，7］。Gutiérrez-Moreno等2019年發(fā)現(xiàn)美國(guó)波多黎各田間草地貪夜蛾種群已對(duì)多種新型作用機(jī)制殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生了高水平抗性，如氟苯蟲(chóng)酰胺（500倍）和氯蟲(chóng)苯甲酰胺（160倍），對(duì)乙基多殺菌素（14倍）也顯示出了中等水平抗性，對(duì)多殺菌素（8倍）、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（7倍）和阿維菌素（7倍）均處于低水平抗性階段［8］。

深圳位于我國(guó)華南地區(qū)，屬于亞熱帶季風(fēng)氣候，十分適合草地貪夜蛾終年繁殖，深圳市周年種植玉米，生產(chǎn)的玉米多為鮮食玉米，為減少農(nóng)藥殘留，保證玉米的安全性，很有必要定期、系統(tǒng)地監(jiān)測(cè)深圳不同地方草地貪夜蛾對(duì)常用藥劑的抗性水平，為指導(dǎo)田間科學(xué)用藥和開(kāi)展草地貪夜蛾抗藥性治理提供依據(jù)。本研究采用浸漬法，測(cè)定了深圳市3區(qū)5個(gè)不同地點(diǎn)草地貪夜蛾對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺、乙基多殺菌素和甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽3種常用殺蟲(chóng)劑的抗藥性。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)ハx(chóng)

草地貪夜蛾幼蟲(chóng)于2023年11月，分別從深圳市的龍崗區(qū)袁隆平院士深圳創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)基地（袁隆平基地）、坪山區(qū)深圳市農(nóng)業(yè)科技促進(jìn)中心試驗(yàn)示范場(chǎng)（促進(jìn)中心）、光明區(qū)華盛光明北農(nóng)業(yè)基地（華盛）、光明區(qū)工業(yè)科技勞動(dòng)教育基地（教育基地）和光明區(qū)光明奶牛飼養(yǎng)隊(duì)（光明牛奶場(chǎng)）5個(gè)不同地方的玉米地采回高齡幼蟲(chóng)，并在室內(nèi)人工氣候箱內(nèi)進(jìn)行飼養(yǎng)，飼養(yǎng)條件為溫度27℃±2℃、相對(duì)濕度70%±5%、光照周期L∶D=16 h∶8 h。飼養(yǎng)一代后，挑選蟲(chóng)齡一致的2齡幼蟲(chóng)進(jìn)行測(cè)定。

1.2 供試藥劑

200 g/L氯蟲(chóng)苯甲酰胺懸浮劑（美國(guó)富美實(shí)公司，市售）；25%乙基多殺菌素水分散粒劑（科迪華農(nóng)業(yè)科技有限公司，市售）；1.14%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽乳油（山東瑞星生物有限公司，市售）。

1.3 試驗(yàn)方法

根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)，將氯蟲(chóng)苯甲酰胺配置為40、20、10、5、2.5、1.25 mg/L的6個(gè)系列濃度；乙基多殺菌素配置為5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625 mg/L的6個(gè)系列濃度；甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽配置為1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125 mg/L的6個(gè)系列濃度，備用。

將人工飼料切成長(zhǎng)1.1 cm，寬0.8 cm，厚0.4 cm小片，分別將小片在不同濃度的藥液中浸泡10 s后，放在濾紙上陰干后置于1.8×2.3×2.3 cm戴蓋的小盒中。每盒放入一小片經(jīng)藥液處理的人工飼料，并接入5頭2齡幼蟲(chóng)，每個(gè)重復(fù)2盒，共10頭蟲(chóng)。每處理重復(fù)4次，每個(gè)處理不少于40頭幼蟲(chóng)。以清水處理人工飼料作為對(duì)照。

將上述小盒放入27℃±2℃、相對(duì)濕度為70%±5%、光照周期L∶D=16 h∶8 h的培養(yǎng)箱中，于96 h后統(tǒng)計(jì)各組的死亡蟲(chóng)數(shù)。用毛筆輕觸幼蟲(chóng)無(wú)反應(yīng)則視為死亡。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用DPS數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算藥劑毒力回歸方程、LC50值及95%置信限和相關(guān)系數(shù)，并以LC50的95%置信限是否重疊作為判斷不同地方草地貪夜蛾對(duì)同一種殺蟲(chóng)劑的抗性是否差異顯著的標(biāo)準(zhǔn)。

抗性倍數(shù)（RR）=所測(cè)種群LC50/敏感種群LC50。

抗性水平分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：參考Gutiérrez-Moreno等（2019）的研究設(shè)定抗性水平劃分標(biāo)準(zhǔn)［8］：抗性倍數(shù)lt;3.0為敏感水平；3.1～10.0為低水平抗性；10.1～40.0為中等水平抗性；40.1～200.0為高水平抗性；抗性倍數(shù)gt;200為極高水平抗性。

3種殺蟲(chóng)劑的相對(duì)敏感基線：氯蟲(chóng)苯甲酰胺為0.0075 mg/L［9］；乙基多殺菌素為0.025 mg/L［10］；甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽為0.0015 mg/L［9］。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺的抗性

深圳市不同地區(qū)草地貪夜蛾對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺的抗性在110.05～290.77倍之間，其中深圳市促進(jìn)中心、華盛和光明牛奶場(chǎng)的草地貪夜蛾種群對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺抗性倍數(shù)分別為110.05倍、163.07倍和135.55倍，均屬高水平抗性，袁隆平基地和教育基地的草地貪夜蛾種群對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺抗性倍數(shù)分別為208.24倍和290.77倍，屬于極高水平抗性（表1）。從LC50置信限來(lái)看，深圳市不同區(qū)草地貪夜蛾種群對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺的抗性差異不顯著。

2.2 對(duì)乙基多殺菌素的抗性

深圳市不同地區(qū)草地貪夜蛾對(duì)乙基多殺菌素的抗性在1.75～4.80倍之間，除袁隆平基地草地貪夜蛾種群對(duì)乙基多殺菌素抗性倍數(shù)為4.80倍，屬低水平抗性外，其它4個(gè)地方草地貪夜蛾種群對(duì)乙基多殺菌素抗性倍數(shù)在1.75～2.48倍之間，屬于敏感水平（表2）。從LC50置信限來(lái)看，深圳市不同地區(qū)草地貪夜蛾種群對(duì)乙基多殺菌素的抗性差異不顯著。

2.3 對(duì)甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽的抗性

深圳市不同地區(qū)草地貪夜蛾對(duì)甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽的抗性在8.60～15.73倍之間，深圳光明區(qū)的華盛和牛奶場(chǎng)草地貪夜蛾種群對(duì)甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽抗性倍數(shù)分別為9.40倍和8.60倍，屬低水平抗性；促進(jìn)中心、袁隆平基地和教育基地3個(gè)地方草地貪夜蛾種群對(duì)甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽抗性倍數(shù)分別為10.47倍、12.27倍和10.47倍，屬中等水平抗性（表3）。不同地方草地貪夜蛾種群對(duì)甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽抗性差異不大，從LC50置信限來(lái)看，抗性差異不顯著。

3 結(jié)論與討論

我國(guó)對(duì)草地貪夜蛾的防控主要是施用化學(xué)殺蟲(chóng)劑來(lái)進(jìn)行防治，但由于我國(guó)地域廣闊，草地貪夜蛾遷入蟲(chóng)源不同且不同地區(qū)草地貪夜蛾的發(fā)生情況、用藥品種和用藥頻次存在差異，導(dǎo)致不同地區(qū)草地貪夜蛾種群對(duì)不同殺蟲(chóng)劑的抗藥性也存在差異。因此加強(qiáng)不同地區(qū)草地貪夜蛾對(duì)常用殺蟲(chóng)劑抗藥性水平監(jiān)測(cè)，對(duì)于指導(dǎo)不同地區(qū)因地制宜地合理用藥具有重要意義。氯蟲(chóng)苯甲酰胺是較早登記用于防治草地貪夜蛾的化學(xué)農(nóng)藥，因?qū)[翅目害蟲(chóng)具有良好防效，是防治草地貪夜蛾主要化學(xué)農(nóng)藥，但多年的連續(xù)使用使得草地貪夜蛾已對(duì)其產(chǎn)生極高抗藥性；乙基多殺菌素是大環(huán)內(nèi)酯類殺蟲(chóng)劑，其殺蟲(chóng)機(jī)理主要作用于煙堿型乙酰膽堿受體（nicotinic acetylcholine receptor，nAchR）和γ–氨基丁酸受體（γ-amino-hutyric acid receptor，GABA），通過(guò)刺激害蟲(chóng)的神經(jīng)系統(tǒng)引起興奮，導(dǎo)致蟲(chóng)體非功能性的肌肉收縮、顫抖、衰竭和麻痹等，最終致其死亡［11，12］，正是由于乙基多殺菌素獨(dú)特的殺蟲(chóng)作用機(jī)理，導(dǎo)致草地貪夜蛾不易產(chǎn)生抗藥性；甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽作用于昆蟲(chóng)神經(jīng)元突觸或神經(jīng)肌肉突觸的γ-氨基丁酸（GABA）受體和谷氨酸氯離子通道受體，刺激神經(jīng)末梢釋放大量的GABA和調(diào)節(jié)特異性谷氨酸門控氯離子通道、GABA敏感的氯離子通道，增加細(xì)胞膜對(duì)氯離子的通透性，從而使大量氯離子進(jìn)入神經(jīng)細(xì)胞，使細(xì)胞功能喪失，擾亂神經(jīng)傳導(dǎo)，最終導(dǎo)致蟲(chóng)體麻痹不能取食死亡［13］。本試驗(yàn)結(jié)果表明，深圳市草地貪夜蛾種群對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺抗性處于高水平抗性至極高水平抗性階段（110.05～290.77倍），對(duì)乙基多殺菌素抗性處于敏感水平至低水平抗性（1.75～4.80倍），對(duì)甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽抗性處于低水平抗性至中等水平抗性（8.60～15.73倍）。建議在深圳市草地貪夜蛾防治過(guò)程中，交替輪換使用乙基多殺菌素和甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽，限制使用氯蟲(chóng)苯甲酰胺，以延緩草地貪夜蛾抗藥性的產(chǎn)生。

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