北京市豐臺(tái)區(qū)冠心病患者CYP2C19基因多態(tài)性分析

劉功文，李 敏，李世紅，邢國(guó)征，馬 莉

(北京航天總醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100076)

冠心病是指冠狀動(dòng)脈因動(dòng)脈粥樣硬化或伴隨痙攣所致、以心肌缺血為主要特征的心臟病[1]。冠心病發(fā)病率逐年增長(zhǎng)[2]，而臨床上由于抗血小板藥物氯吡格雷的廣泛使用，導(dǎo)致氯吡格雷抵抗的現(xiàn)象出現(xiàn)。患者在使用氯吡格雷治療時(shí)，自身對(duì)藥物吸收和代謝存在差異，而造成這種差異的一個(gè)關(guān)鍵決定性因素就是CYP2C19基因多態(tài)性[3]。臨床藥物遺傳學(xué)實(shí)施指南提出，根據(jù)個(gè)體對(duì)氯吡格雷的代謝不同，將CYP2C19基因代謝表型分為超快代謝型(*1/*17、*17/*17)、快代謝型(*1/*1)、中間代謝型(*1/*2、*1/*3、*2/*17、3/*17)和慢代謝型(*2/*2、*2/*3、*3/*3)[4]。作者對(duì)北京市豐臺(tái)區(qū)冠心病患者CYP2C19基因多態(tài)性分布特點(diǎn)及情況進(jìn)行研究，以為本地區(qū)冠心病患者的抗血小板治療個(gè)體化用藥提供更充分的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2021年1—12月因診斷冠心病到本院心內(nèi)科住院同時(shí)要服用藥物氯吡格雷治療的患者731例作為研究對(duì)象。其中，男400例，女331例，患者年齡為30～96歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：已明確診斷為冠心病且醫(yī)囑中需要服用藥物氯吡格雷的本地區(qū)患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：處于妊娠期或者哺乳期；患有嚴(yán)重的肝功能或腎功能障礙；患有惡性腫瘤；患有嚴(yán)重凝血功能障礙；有藥物氯吡格雷服用禁忌證。本研究通過了醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。患者對(duì)此研究知情并同意。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑 上海宏石熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增儀(SLAN-96P型)；西安天隆自動(dòng)核酸提取儀(NP968-C型)；武漢海吉力CYP2C19基因檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)；西安天隆自動(dòng)核酸提取純化試劑盒。

1.2.2檢測(cè)方法 抽取患者2 mL全血，以乙二胺四乙酸二鉀抗凝，利用自動(dòng)核酸提取儀及配套的自動(dòng)核酸提取試劑提取患者全血基因組DNA。在已配好的擴(kuò)增試劑中分別加入患者的DNA及陰、陽性對(duì)照物并進(jìn)行擴(kuò)增。擴(kuò)增完成后按照基因多態(tài)性檢測(cè)結(jié)果判定表判定基因分型結(jié)果。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1患者CYP2C19基因型分布情況 731例檢測(cè)標(biāo)本中，CYP2C19的基因型*1/*1、*1/*2、*2/*2、*1/*3、*2/*3、*1/*17、*2/*17、*3/*17、*3/*3、*17/*17的頻率分別為43.78%、35.16%、9.71%、5.34%、2.87%、2.05%、0.68%、0.27%、0.14%、0。見表1。

表1 基因型分布頻率(n=731)

2.2冠心病患者CYP2C19等位基因分布情況 731例檢測(cè)標(biāo)本中CYP2C19的等位基因*1、*2、*3、*17的頻率分別為64.98%、29.14%、4.38%、1.50%，見表2。

表2 等位基因分布頻率

2.3冠心病患者CYP2C19代謝型分布情況 731例檢測(cè)標(biāo)本中CYP2C19的代謝型快代謝型(*1/*1)、中間代謝型(*1/*2、*1/*3、*2/*17、3/*17)、慢代謝型(*2/*2、*2/*3、*3/*3)、超快代謝型(*1/*17、*17/*17)的頻率分別為43.78%、41.45%、12.72%、2.05%，見表3。其中所占比例最多的是快代謝型和中間代謝型。結(jié)合表1與表3，快代謝型只包含*1/*1；中間代謝型中以*1/*2為主，其次為*1/*3，*2/*17與3/*17所占比例較少；慢代謝型中以*2/*2與*2/*3為主，*3/*3所占比例較少；超快代謝型以*1/*17為主，*17/*17極少，頻率為0。

表3 代謝表型分布頻率

2.4不同性別冠心病患者CYP2C19代謝型頻率分布 731例冠心病患者按性別分為男、女2個(gè)組。結(jié)果顯示，男、女冠心病患者CYP2C19代謝型分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.264,P=0.353)，見表4。

表4 不同性別代謝型頻率[n(%)]

2.5不同年齡段冠心病患者CYP2C19代謝型頻率分布 將731例冠心病患者按年齡分為2個(gè)組，分別是30～65歲和大于65～100歲。結(jié)果顯示，不同年齡的冠心病患者CYP2C19代謝型分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.028,P=0.567)，見表5。

表5 不同年齡段代謝型頻率分布[n(%)]

3 討 論

氯吡格雷是無活性的藥物，其在小腸吸收后需要經(jīng)肝CYP450酶系兩步代謝才能轉(zhuǎn)化為活性狀態(tài)，進(jìn)而發(fā)揮作用[3]。由于CYP2C19基因在此過程中起到重要作用，所以CYP2C19基因多態(tài)性會(huì)造成氯吡格雷在不同患者體內(nèi)吸收和代謝出現(xiàn)差異，呈現(xiàn)出不同的治療效果。CYP2C19基因位于人類染色體中的第10號(hào)染色體，其含9個(gè)外顯子和8個(gè)內(nèi)顯子，可以編碼氨基酸490個(gè)，其編碼的蛋白酶位于肝微粒體內(nèi)[5]。基因型*1/*1為CYP2C19基因的野生型，其所編碼的酶有完整活性，使氯吡格雷在患者體內(nèi)能正常吸收和代謝，從而達(dá)到治療效果。等位基因*2和*3普遍存在于我國(guó)人群中，其編碼的酶活性降低，使氯吡格雷在患者體內(nèi)的吸收和代謝減弱，影響治療效果[6]。等位基因*17可增加酶的活性，加快氯吡格雷在患者體內(nèi)吸收和代謝速度，增強(qiáng)抗血小板功能，但容易發(fā)生出血或出血不止等現(xiàn)象。因此，應(yīng)該根據(jù)不同的CYP2C19基因個(gè)體給予合適劑量的氯吡格雷，實(shí)現(xiàn)真正的個(gè)體化治療。

對(duì)本地區(qū)731例冠心病患者進(jìn)行CYP2C19基因檢測(cè)，結(jié)果顯示，發(fā)生突變的等位基因*2、*3、*17的頻率分別為29.14%、4.38%、1.50%。其中等位基因*2和*3的頻率分別為29.14%和4.38%，與文獻(xiàn)中報(bào)道的亞洲人CYP2C19*2和CYP2C19*3頻率分布(29%～35%[7]和2%～9%)相符[1]。CYP2C19基因型檢測(cè)結(jié)果顯示*1/*1和*1/*2的頻率所占比例較多，分別為43.78%(320/731)和35.16%(257/731)，與相關(guān)文獻(xiàn)得出的結(jié)論相符[8]。CYP2C19代謝型檢測(cè)結(jié)果顯示，快代謝型、中間代謝型、慢代謝型和超快代謝型的頻率分別為43.78%、41.45%、12.72%、2.05%。快代謝型患者的藥物代謝較快，不良反應(yīng)發(fā)生情況相對(duì)較少，但是藥物在慢代謝型患者體內(nèi)代謝相對(duì)較慢，使得藥物在體內(nèi)蓄積，從而導(dǎo)致不良反應(yīng)發(fā)生[9]。因此，對(duì)于快代謝及特快代謝型患者，可給予標(biāo)準(zhǔn)劑量的氯吡格雷治療；對(duì)于超快代謝型患者，必要時(shí)可考慮降低氯吡格雷的劑量；對(duì)于中間型患者，大部分情況可以按照標(biāo)準(zhǔn)劑量治療，但是需要密切關(guān)注；對(duì)于慢代謝型患者，則可通過增加劑量或者改用其他二磷酸腺苷(ADP)受體拮抗劑(如替格瑞洛)來代替[10]。本研究通過對(duì)本地區(qū)不同性別和不同年齡段冠心病患者CYP2C19代謝型分布頻率進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)CYP2C19代謝型分布頻率與性別、年齡無關(guān)，這與其他文獻(xiàn)結(jié)果相似[11]。其他文獻(xiàn)中還發(fā)現(xiàn)，不同地區(qū)和民族的患者CYP2C19代謝型分布頻率有較大差異[12]，但是在本次研究中未對(duì)其進(jìn)行分析研究。本研究中標(biāo)本數(shù)量只有731例，不能代表整個(gè)豐臺(tái)區(qū)的分布趨勢(shì)，可能會(huì)造成一定的偏差，后續(xù)研究中有待繼續(xù)補(bǔ)充更多數(shù)據(jù)和內(nèi)容。

本研究通過對(duì)北京市豐臺(tái)區(qū)部分冠心病患者CYP2C19基因的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了研究分析，可為該地區(qū)冠心病患者抗血小板治療的個(gè)體化用藥提供更可靠的依據(jù)。