sRNA STnc290對鼠傷寒沙門菌侵染細胞及致病力的影響

寧程程，李 娜，郭 蘊，季春輝，王立霞，李志遠，喬 軍，孟慶玲，才學鵬

(1.石河子大學動物科技學院，新疆 石河子 832003；2. 中國獸藥監察所，北京 100081)

【研究意義】鼠傷寒沙門菌(Salmonellatyphimurium，STM)是一種革蘭氏陰性人獸共患病原菌，STM感染人后可引起人類腸炎和敗血癥[1]，感染家畜后可導致家畜急性胃腸炎以及懷孕母畜流產，同時可引起家禽、犬、貓及實驗動物等發生副傷寒，表現為胃腸炎或者敗血癥[2-3]。STM主要的感染途徑是消化道，進入體內后可通過其致病島表達多種毒力因子，在宿主胞內寄生和繁殖[4]，不僅給畜牧業的發展帶來了極大的經濟損失，而且對人類的公共衛生帶來嚴重的威脅。【前人研究進展】細菌小RNA(small RNA，sRNA)是一類長度在40～500 nt[5]，能夠通過轉錄后調控mRNA的非編碼RNA(no-coding RNA，ncRNA)[6]。sRNAs的合成受到多種因素的調控，通常與特定的環境脅迫或應激條件的誘導有關[7]。研究發現，大多數sRNAs可通過與mRNA堿基互補配對發揮其生物學功能，參與細菌的代謝、環境應激、生物被膜形成及毒力等的調控[9]。【本研究切入點】至今，在STM中已經鑒定出280個sRNA分子，但大部分sRNA對毒力是否有調控作用尚不清楚[8]。研究發現，在STM侵染小鼠巨噬細胞的條件下，sRNASTnc290基因的表達量顯著上調[10]，但對STnc290的生物學功能至今尚未深入研究。因此，本研究通過分析STnc290基因的分子特征，利用λ-Red同源重組構建STnc290基因缺失株及回補株，通過細胞侵染及小鼠致病性試驗檢測STnc290基因對STM的影響。【擬解決的關鍵問題】本研究為深入揭示STnc290基因調控STM的分子機制奠定了基礎。

1 材料與方法

1.1 菌株、質粒和試劑

鼠傷寒沙門菌(STM)野毒株SL1344，λ-Red同源重組相關質粒pKD46、pKD3、pCP20、pBR322及小鼠巨噬細胞RAW264.7均由本實驗室保存。……