氣相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)蔬菜水果中4種農(nóng)藥殘留量

付 彤，宋純艷，呂 峰，張雪瑛

（1.濟(jì)寧市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，山東濟(jì)寧 272100；2.濟(jì)寧市任城區(qū)住房和城鄉(xiāng)建設(shè)局，山東濟(jì)寧 272100）

隨著社會(huì)的進(jìn)步，人們消費(fèi)水平的提高，消費(fèi)者對(duì)食品安全問題的重視程度也在不斷提升，建立準(zhǔn)確、高效、快速的農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法至關(guān)重要[1-2]。仲丁威、五氯硝基苯、六氯苯和七氯等均是蔬菜水果種植中較常使用的農(nóng)藥，本文在GB 23200.113—2018 的基礎(chǔ)上，改進(jìn)了QuEChERS 聯(lián)用氣相色譜-質(zhì)譜儀對(duì)蔬菜水果中4種農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè)的方法，使檢測(cè)結(jié)果更為快速、準(zhǔn)確[3-5]。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

農(nóng) 殘 試 劑：仲 丁 威（100 μg·mL-1）、六 氯 苯（100 μg·mL-1）、七氯（100 μg·mL-1）以及五氯硝基苯（100 μg·mL-1）；內(nèi)標(biāo)物質(zhì)：環(huán)氧七氯（100 μg·mL-1）；正己烷（色譜純）；乙腈（色譜純）。

氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀；超聲波清洗機(jī)；電子分析天平；漩渦混合器；離心機(jī)。

1.2 儀器條件

1.2.1 色譜條件

色譜柱：DB-1701（30 m×0.25 mm，0.25 μm）石英毛細(xì)管柱；色譜柱溫度程序：40 ℃保持1 min，然后以30 ℃·min-1程序升溫至130 ℃，再以5 ℃·min-1升溫至250 ℃，再以10 ℃·min-1升溫至300 ℃，保持5 min；載氣為氦氣，純度≥99.999%；流速：1.2 mL·min-1；進(jìn)樣口溫度：290 ℃；進(jìn)樣量：2 μL；進(jìn)樣方式：無分流進(jìn)樣。

1.2.2 質(zhì)譜條件

電子轟擊源：70 eV；離子源溫度：230 ℃；GC-MS 接口溫度：280 ℃；選擇離子監(jiān)測(cè)。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

1.3.1 內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備溶液

準(zhǔn) 確 吸 取 環(huán) 氧 七 氯 標(biāo) 準(zhǔn) 溶 液（100 μg·mL-1）0.5 mL 于10 mL 容量瓶中，用正己烷定容至刻度線，配制成5.00 μg·mL-1的內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液。

1.3.2 混標(biāo)溶液

準(zhǔn) 確 吸 取 仲 丁 威（100 μg·mL-1）、 六 氯 苯（100 μg·mL-1）、五氯硝基苯（100 μg·mL-1）以及七氯標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 μg·mL-1）各0.5 mL 于10 mL 容量瓶中，用正己烷定容至刻度線，配制成濃度為5.00 μg·mL-1的混標(biāo)溶液。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制

分別吸取混標(biāo)溶液（5.00 μg·mL-1）0 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL 和1.0 mL 于10 mL 容量瓶中，用正己烷定容至刻度線，混合均勻，配制成濃度分別為0 μg·mL-1、0.1 μg·mL-1、0.2 μg·mL-1、0.3 μg·mL-1、0.4 μg·mL-1和0.5 μg·mL-1的農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

1.4 前處理方法

取均質(zhì)好的樣品10 g 于50 mL 離心管中，加10 mL 乙腈和20 μL 環(huán)氧七氯內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，渦旋1 min，超聲提取10 min，添加提取鹽試劑包（6 g MgSO4+1.5 g NaOAc）， 渦 旋1 min， 并 于6 000 r·min-1離心5 min，將上清液轉(zhuǎn)移到d-SPE 凈化管（900 mg MgSO4+150 mg PSA）中，渦旋30 s，再于6 000 r·min-1離心5 min，取上清液，并用0.22 μm有機(jī)膜過濾，上機(jī)檢測(cè)。

1.5 儀器檢測(cè)

1.5.1 定性測(cè)定

用0.1 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行上機(jī)檢測(cè)，根據(jù)1.2 的要求設(shè)置氣相色譜-質(zhì)譜儀的工作條件，并在50 ～550 nm 的波長，分別對(duì)仲丁威、五氯硝基苯、六氯苯和七氯標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行全波段掃描，然后通過檢測(cè)得到的質(zhì)譜圖和各農(nóng)藥對(duì)應(yīng)的定性離子與定量離子來確定4種農(nóng)藥和內(nèi)標(biāo)（環(huán)氧七氯）的保留時(shí)間。

1.5.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

將配制好的4種農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)液按次序放在進(jìn)樣盤中，在氣相色譜-質(zhì)譜儀最佳的工作條件下，進(jìn)樣器精確吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液系列（0 μg·mL-1、0.1 μg·mL-1、0.2 μg·mL-1、0.3 μg·mL-1、0.4 μg·mL-1和0.5 μg·mL-1）2 μL 注入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀的檢測(cè)器中進(jìn)行檢測(cè)，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積比為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.5.3 回收率和精密度實(shí)驗(yàn)

在樣品中添加3個(gè)水平的混標(biāo)溶液，即準(zhǔn)確吸取0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL 的農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別加入樣品中，按照1.4 的方法對(duì)樣品和加標(biāo)試樣進(jìn)行前處理，將處理好的試樣上機(jī)測(cè)定，每個(gè)樣品測(cè)定兩次。

1.6 分析結(jié)果的表述

試樣中各種農(nóng)藥的含量按公式（1）計(jì)算。

式中：X為試樣中某農(nóng)藥的含量，mg·kg-1；C為試樣溶液中某農(nóng)藥的質(zhì)量濃度，μg·mL-1；V為試樣中加入的提取液的體積，mL；m為試樣稱樣量，g。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜分析

4種農(nóng)藥和內(nèi)標(biāo)（環(huán)氧七氯）的出峰時(shí)間如圖1 所示，檢測(cè)結(jié)果顯示4種農(nóng)藥（仲丁威、五氯硝基苯、六氯苯和七氯）以及內(nèi)標(biāo)（環(huán)氧七氯）的保留時(shí)間分別為12.50 min、15.27 min、14.22 min、17.85 min 及20.98 min，且色譜峰的分離度良好，符合氣相色譜法定量分析的要求。

圖1 0.1 μg·mL-1 標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

仲丁威、五氯硝基苯、六氯苯和七氯4種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線分別為Y=5.519 32X、Y=0.794 84X、Y=10.079 6X 以及Y=3.391 83X，其相關(guān)系數(shù)分別為R2=0.997 8、R2=0.999 4、R2=0.998 1 和R2=0.998 4，且4種農(nóng)藥在0 ～0.5 μg·mL-1線性關(guān)系良好。

2.3 回收率和精密度實(shí)驗(yàn)

按1.5.3 方法在稱取的樣品中分別添加3個(gè)水平（0.1 μg·mL-1、0.2 μg·mL-1、0.3 μg·mL-1）的 混 合標(biāo)準(zhǔn)溶液。結(jié)果顯示，采用QuEChERS 法進(jìn)行前處理后，仲丁威、五氯硝基苯、六氯苯和七氯4種農(nóng)藥的加標(biāo)回收率分別為97.63%～103.51%、103.62% ～ 109.53%、87.48% ～ 99.30%、93.24% ～98.88%，RSD 分 別 為0.47% ～1.03%、0.41%～2.10%、2.94%～4.57%、0.29%～4.15%，詳見表1。

表1 加標(biāo)回收率和精密度

3 討論

3.1 試劑的優(yōu)化

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制時(shí)使用的定容試劑會(huì)影響上機(jī)的檢測(cè)結(jié)果。國家標(biāo)準(zhǔn)GB 23200.113—2018 中建議使用乙酸乙酯作為定容試劑，本次實(shí)驗(yàn)在1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制中則采用正己烷作為定容試劑。乙酸乙酯極易揮發(fā)，容易造成樣品含量的波動(dòng)，當(dāng)樣品數(shù)量較多時(shí)，會(huì)降低測(cè)定的準(zhǔn)確度；正己烷溶液的氣味較為微弱，毒性相對(duì)較小，對(duì)人體的傷害也較小，且使用正己烷作為定容試劑時(shí)對(duì)樣品中農(nóng)藥含量檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性影響不大，因此本實(shí)驗(yàn)使用正己烷作為定容試劑。

3.2 提取條件的優(yōu)化

將10 mL 乙腈加入稱取好的待測(cè)樣品中，用于提取樣品中的農(nóng)藥，為了使乙腈的提取效果更好，本實(shí)驗(yàn)使用超聲系統(tǒng)來促進(jìn)農(nóng)藥的溶出，將加乙腈與外標(biāo)的樣品于20 ℃的條件下超聲10 min，可以起到強(qiáng)化農(nóng)藥分離提取的效果，不僅節(jié)省了時(shí)間，還提高了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度。

此外，本實(shí)驗(yàn)還采用了WondaPak QuEChERS 前處理試劑包，將一些高效的提取試劑和凈化處理試劑制成可直接使用的混合品，填裝在離心管中，通過簡(jiǎn)單的離心操作，將目標(biāo)組分與樣品基質(zhì)快速分離，進(jìn)一步簡(jiǎn)化了提取步驟，縮短了前處理時(shí)間。

3.3 儀器條件的優(yōu)化

與國家標(biāo)準(zhǔn)方法GB 23200.113—2018 相比，本實(shí)驗(yàn)對(duì)色譜柱的程序升溫模式、進(jìn)樣口的溫度、進(jìn)樣量以及傳輸線溫度等都進(jìn)行了不同程度的優(yōu)化，這些優(yōu)化在保證儀器靈敏度和樣品分離度的情況下，減少了實(shí)驗(yàn)對(duì)儀器的損耗，有效延長了相關(guān)配件和離子源的使用壽命。

4 結(jié)論

本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，改進(jìn)后的QuECHERS 前處理方法能夠進(jìn)一步簡(jiǎn)化提取步驟、縮短前處理時(shí)間，還可以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，可在今后的日常實(shí)驗(yàn)中推廣使用。