基于多酶輔助信號放大的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇高靈敏免疫檢測方法的建立

陳 斌， 曾 昆， 吳琴燕， 楊 健， 顧鑫凱

(1.江蘇大學(xué)環(huán)境與安全工程學(xué)院，江蘇鎮(zhèn)江 212013； 2.江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，江蘇鎮(zhèn)江 212013)

真菌毒素是真菌產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物，極易在作物生長、收獲及糧食儲(chǔ)藏過程中產(chǎn)生。在我國，由于人們的傳統(tǒng)飲食規(guī)律，谷物食用比例遠(yuǎn)高過西方國家，使得真菌毒素危害十分明顯。其中，脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol，DON)是從被禾谷鐮刀菌污染的玉米中分離出的一種真菌毒素，并且是糧食作物中常見的污染毒素之一，因其能夠引起嘔吐，故又稱嘔吐毒素。DON能夠直接污染農(nóng)作物，然后通過農(nóng)作物進(jìn)入到人或動(dòng)物體內(nèi)，能夠誘發(fā)嘔吐，導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)厭食、胃腸炎、腹瀉、生長緩慢，甚至還會(huì)產(chǎn)生免疫抑制或血液病等。有研究表明，90%感染真菌毒素的樣本里均含有DON。我國規(guī)定谷物及其制品中DON的限量標(biāo)準(zhǔn)為1 mg/kg，聯(lián)合國食品添加劑專家委員會(huì)規(guī)定人體對DON及其衍生物每日最大耐受攝入量為1 μg/kg。郭紅衛(wèi)等在對我國河南地區(qū)及上海市赤霉病流行年份與非流行年份小麥中鐮刀菌污染情況進(jìn)行調(diào)査時(shí)，發(fā)現(xiàn)DON含量的中位數(shù)分別為933.0、14.2 mg/kg，遠(yuǎn)高于我國規(guī)定的限量標(biāo)準(zhǔn)。常規(guī)真菌毒素檢測以儀器分析方法為主，包括高效液相色譜法、液質(zhì)聯(lián)用等技術(shù)，盡管靈敏度高、準(zhǔn)確性好，但這些儀器分析均需要專業(yè)技術(shù)人員操作，且儀器設(shè)備成本高，前處理過程復(fù)雜，不能滿足大規(guī)模樣本快速分析需求。免疫分析方法具有靈敏度高、特異性好等優(yōu)點(diǎn)，適用于大量樣本的現(xiàn)場篩查，已廣泛應(yīng)用于食品安全、環(huán)境監(jiān)測、臨床診斷等領(lǐng)域。……