呋喃唑酮代謝物人工抗原的制備與鑒定

吳 萌， 吳海濤， 圣志存， 陳曉蘭， 蘇棪華， 柳青青

(江蘇農牧科技職業學院，江蘇泰州 225300)

呋喃唑酮(furazolidone)，學名3-(5-硝基糠醛縮氨基)-2-唑烷酮，又名痢特靈，屬于硝基呋喃類藥物，具有廣譜的抗菌作用；現代藥理毒理試驗研究表明，呋喃唑酮在機體內代謝周期短、易衰減，主要代謝物為3-氨基-2-唑酮(AOZ)，分子結構式，結果見圖1-A，AOZ可與機體內組織蛋白緊密結合，從而殘留數周，對人體具有潛在的致癌、致突變作用。因此，我國相關法規明確規定嚴禁動物性食品中添加包括呋喃唑酮在內的硝基呋喃類藥物。但在實際生產中，由于呋喃唑酮預防和治療細菌性感染效果顯著且價格低廉，所以仍存在非法使用的情況。因此，建立快速、簡便的檢測方法自然尤為重要。由于呋喃唑酮衰減原因，研究者們大多以AOZ作為標志物檢測呋喃唑酮是否非法使用。

目前，檢測呋喃唑酮代謝物AOZ殘留常用的方法為液相色譜-串聯質譜法(LC-MS/MS)，具有檢測靈敏度高、結果準確性好等優點，但存在前樣處理復雜、檢測時間長、成本昂貴等問題，尤其不適合大批量樣品的快速篩查。免疫分析法因靈敏度高、特異性強、簡便、樣品高通量及成本低等優點也成為檢測呋喃唑酮代謝物的一種重要手段，其建立的關鍵是獲得免疫學特性優良的抗體，而抗體獲得的前提條件為制備待測物的免疫原。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

試驗于2020年12月于江蘇農牧科技職業學院生物制藥技術實驗室完成。SPF級BALB/c小鼠(6周齡，雌性)，購自揚州大學比較醫學中心。……