噬菌體治療在水產養殖動物細菌性疾病中的研究現狀

○劉海榮

（鄄城縣水產服務中心 山東鄄城 274600）

據實證資料分析可得，噬菌體在食源性病原微生物的應用效果顯著。在水產養殖領域的多種菌群等引起的細菌性疾病中，以噬菌體為主要介質的治療成效明顯，也充分彰顯了噬菌體在水產養殖的廣闊前景。

一、防控水產養殖動物細菌性病害的優勢

第一，針對性強。在以往運用抗生素治療疾病時，也會殺死水產動物的消化系統中正常細菌和有益菌，進而影響自身機能的微生態平衡，從而引起其他有益的耐受菌群的生長，由此造成腹瀉、胃腸道感染等癥狀，并會導致因機體抵抗力降低引起疾病感染。噬菌體因其自身的繁殖特性與作用效益，能夠針對特定的菌株進行毀滅處理，再利用時又不至于給其中的其他有益菌種群造成定性損害，最大化保障其中微生態的穩定運行。

第二，應用基數少。噬菌體繁殖能力較強，具備指數式增殖的能力，僅需極小量就可以殺死一定的病原菌，起到了防止或減少細菌性感染的效果。

第三，篩選分離快，在應用治療中的保存我物質消耗低。其物種豐度較大，在生物界中具有指定細菌相對應的噬菌體，較易分離，并可在常溫下儲存，方便于運用流通和使用。

第四，給藥的方法多樣，且效果持久。噬病毒體的給藥途徑有很多種，包括皮下注射、口服、外用以及身體外用藥物等。在預防細菌性疾病過程中，噬病毒體既可以單一使用，也可以與成群基數以上的噬病毒體共同使用，也可以與抗菌素共同使用以增強防治效果，而且還因為噬病體的自身繁殖作用，也可以繁殖和傳播，并通過對生物體的自身加以治愈而效果持久。

第五，無藥品的殘留。大量應用抗菌素容易導致藥品在飼養動物身上的殘留，而噬病毒體環境高度依賴于相應的微生物，會因為微生物宿主的消失而死去，嫌少殘留至生物體內。如表1為部分應用試驗結果。

表1 水產養殖動物噬菌體治療應用試驗

二、噬菌體治療在水產養殖動物中的應用研究

1.節肢動物養殖中的噬菌體治療

現階段，由于諸多養殖過程中節肢動物的差異化的疾病頻頻出現，則會導致水產養殖業出現巨大的經濟損失。以弧菌病為代表的細菌性疾病是近年來引起蝦養殖業損失最為慘重的主要致病菌，其染病致死概率為百分之百。由副溶血性弧菌引起細菌性疾病也是東南亞區域中最為盛行且導致損失慘重的病癥之一。

Jun等人研究噬菌體對治療急性肝胰壞死病的效果，基于實驗發現，以噬病毒體pVp-1為主要的治療介質對患有染副溶血性弧菌引起病變的南美白對蝦其治療效益顯著，并且能極大程度保護其存活。以喂養為治療實行手段的實驗組其死亡率高達百分之五十，而且采用浸浴法的實驗組其累積死亡率約為1/4和1/2，由此可得，pVp-1在病菌預防方面比治療方面的效果更為顯著。

Vinod等也基于試行用噬菌體治療在蝦群體上產生的發光病。據實驗結果表明，在十七天的試驗時間內，對照組中的斑節對蝦僅有17%的蝦群存活，噬菌體介入治療的存活率可高達86%，與應用抗生素進行治療的觀察組的存活率相比有顯著的差異，其治療效果顯著，并且伴隨著濃度的提升，其存活率也成正向表現。

2.軟體動物養殖中的噬菌體治療

基于近年來的水產養殖情況而言，弧菌致病菌給予養殖業帶來不可逆性的影響，同時也造成不同程度的損壞，制約水產規模化養殖的多元化發展。

胡蝶等以質量分數1g/kg噬菌體添加到飼料中投喂方斑東風螺，基于試驗的結果表明，從對照組的數據顯示，其中宿主細菌數量有效降低96%，水體中宿主菌有效減少至72%。由此表明微膠囊的應用最大化控制宿主弧菌的平均基數，從而降低了水產養殖動物弧菌病的暴發。而柏仕杰等人認為當土壤和水域中都存在著相當含量的噬病毒體時，可將其平均基數不斷減少至相對較低濃度，且能長時間內達到持續抑制的治療效果，并有效減少其弧菌病的暴發。

李太武等人應用噬病毒體，對河流弧菌II型引起的皺紋盤鮑膿皰病開展了應用調查研究。結果顯示，應用了相應含量的噬病體能夠有效地防止或推遲由膿皰病造成的盤鮑凋亡過程，并使盤鮑的成活率提升50%以上。

3.棘皮動物養殖中的噬菌體治

療腐皮綜合癥已是水產養殖中普遍常見的疾病，其中以刺參為疾病高發生物集群，并且其中造成的經濟損失極高，在一定程度上制約該行業的優化發展。

Zhang等從某市場的排水管中噬菌體PVA1和PVA2，并制備成噬菌體雞尾酒，溶液濃度分別為105、106、107PFU/mL。試驗對象刺參基于浸泡處理，并由數據對比得出，空白對照組僅有3%的存活率，且其中三種濃度的存活率分別為47%、50%、73%。與卡那霉素組相比，其試驗結果并無明顯差距。

Li等在刺參養殖池水中篩選出對嗜環弧菌的噬菌體Vc1，并通過口服和靜脈注射的差異化給藥方法對其抑疫效應進行細致化探討。試驗結果顯示，以60天為周期進行飼料投喂后，刺參生存概率為81%，同對照組比增長63%；但在進行注射給藥處理后，刺參的存活率卻只有58%。數據表明，基于刺參的治療而言，口服能直觀地彰顯其治療效益。

4.脊索動物養殖中的噬菌體治療

Verner-Jeffreys等將噬菌體O，R和B制備成混合制劑，對大西洋鮭魚進行腹腔注射，從數據表明可以有效緩解細菌對其的死亡侵害。攻毒后及時注射混合制劑的魚群其死亡速率明顯慢與對照組，但最終的死亡結果并無顯著差異。

Silva等篩選出殺鮭氣單胞菌的噬菌體AS-A。在實際試驗中，采用浸浴的方法給藥，在3天內對照組累積死亡率為36%，而對照組的累積死亡為零。據實驗結果表示，在進行浸浴法給藥后，其對病原菌的抵抗力明顯提高。并也從發現，在宿主微生物存活的前提下添加噬病毒體，影響效果趨向平緩。所以，噬菌體在娃娃魚繁殖環境中，能有效而安全地防治癤瘡病。

綜上所述，噬菌體治療在水產養殖業中也初顯成效，但由于現階段對大規模用于細菌病毒感染的有效防治方法尚不完善，因此關于噬病體的各種研究也持續進行。而作為抗菌藥，由于噬病體具備的多重特性，使之可以作為抗生素的有力替代品，而所有可作為有效治療的噬病體都應該具備有效配方，以及更多的臨床實驗結果及其詳細的噬病體制劑使用方式。和早期的噬病體療法比較，現階段對噬病體有了更廣泛的認識，也為其多元化的療法提供新的發展機遇。