犬細小病毒病的診斷與防治

劉國芹，王彥勇，煙玉華，王利月，白換力

（邯鄲科技職業(yè)學(xué)院，河北邯鄲 056046)

犬細小病毒病由細小病毒科細小病毒引起的以嘔吐、 拉稀等胃腸道癥狀為主的急性傳染病，幼齡犬只感染嚴重，死亡率高。 斷奶、飲食和環(huán)境改變、寒冷應(yīng)激、寄生蟲感染等都可以成為發(fā)病誘因，未免疫的2～6 月齡的幼犬高發(fā)，如不治療，死亡率可達50%～100%［1］。 盡管有細小病毒引起心肌炎的報道，在臨床中很少遇到，因為，心肌細胞只有在快速復(fù)制時才受到感染，此時正值胎兒在子宮內(nèi)發(fā)育期和出生后前2 周，接種過疫苗的母犬，可以把抗體傳遞給胎兒，因此，很少見到心肌炎病例。

1 病原學(xué)

犬細小病毒 （CPV） 為單鏈DNA 病毒，約5000 個堿基對，體積很小，無囊膜。 可感染所有犬科動物，VP2 基因組容易發(fā)生突變， 突變體CPV-2a、CPV-2b、CPV-2c 等亞型， 能更高效地在犬宿主體內(nèi)復(fù)制。在室內(nèi)室溫條件下病毒可存活2 個月，在室外，沒有陽光照射和消毒劑破壞可以存活5 個月。 病毒對許多消毒劑沒有抵抗力，次氯酸鈉、 β-丙內(nèi)酯可以殺死該病毒。

患病犬在出現(xiàn)癥狀前4～5 天、 發(fā)病期和康復(fù)后10 天內(nèi)都可以排毒［2］。 口腔黏膜接觸到細小病毒后，可在局部淋巴管內(nèi)復(fù)制，借助淋巴管和血液迅速擴散到全身，可導(dǎo)致全身性感染。 與病犬的嘔吐物、排泄物直接和間接接觸都可能被傳染，據(jù)有關(guān)資料統(tǒng)計，病毒康復(fù)動物的糞便可存活數(shù)年，人和一些蒼蠅及犬類的寄生蟲都可以成為帶毒者［3］。6 周齡至2 周歲未免疫的犬，初次接觸細小病毒都有可能被傳染。

2 流行病學(xué)

1978 年澳大利亞和加拿大學(xué)者首次從患病犬腸道中分離出犬細小病毒，此后，該病毒很快在全世界暴發(fā)， 我國在1982 年首次報道了犬細小病毒病［4］。 近些年來，我國寵物犬的養(yǎng)殖量不斷增加，疫苗免疫日益完善，從農(nóng)村到城市，隨著免疫密度的升高，發(fā)病率逐級下降，在一線城市的寵物醫(yī)院接診病例中，犬細小病毒病的發(fā)病率明顯偏低，而縣級的寵物診療機構(gòu)中細小病毒病常常是發(fā)病率最高的疾病。

免疫抗體的存在與臨床癥狀和治愈率有直接關(guān)系， 幼犬通過采食母乳可獲得母源抗體，在幾周內(nèi)可以得到保護，6 周齡至6 月齡的犬，如果沒有免疫或免疫不全，則隨著母源抗體的下降易感性增加，品種犬比雜種犬感染率高，癥狀也更嚴重。 據(jù)邯鄲市某寵物醫(yī)院統(tǒng)計，2021 年全年共接診犬細小病毒病例126 例，其中約有95.2%（120/126）的病例發(fā)生在6 月齡以下。 發(fā)病犬只中未免疫犬只約占76.2%（96/126），免疫不完全犬只約占23.8%（30/126），這一統(tǒng)計結(jié)果跟許多文獻資料基本一致，細小病毒病集中發(fā)生在6 月齡以下未完全免疫的犬只。在這126 例細小病毒病例治療過程中， 死亡犬只約占14.2%（18/126），18 只死亡病例中有15 只是從來沒有接種過疫苗的犬，相反，接種過疫苗的3 只犬臨床癥狀較輕，沒有發(fā)生大量便血的現(xiàn)象，治療周期短，恢復(fù)比較快。

細小病毒病沒有明顯的流行季節(jié)，一年四季都有發(fā)生，母犬多集中于春秋兩季發(fā)情，所以，春末、冬初幼犬?dāng)嗄毯螅患皶r打疫苗，容易造成疾病的暴發(fā)和流行。

3 臨床癥狀

細小病毒的潛伏期4～14 天，病程一般7 天左右， 快速分裂生長的細胞是細小病毒的靶細胞，因此，病毒主要感染和損害迅速分裂的腸腺上皮細胞、增生的淋巴組織和骨髓［5］，引起嚴重的白細胞減少癥，出血性腹瀉，患病犬多表現(xiàn)拉稀、嘔吐和白細胞下降。臨床上，犬感染細小病毒時多以嘔吐癥狀開始，主人常常認為是喂食過多或飼喂不當(dāng)造成的，之后，會因犬只精神狀態(tài)變差，食欲廢絕而就診，患犬病初體溫多數(shù)不升高，相反，有些患犬因延誤就診時間而表現(xiàn)脫水和體溫下降。 病犬多在發(fā)病1～2 天后，出現(xiàn)小腸性腹瀉，糞便惡臭有血腥味。 也有部分犬只在發(fā)病后期體溫升高，往往與敗血癥有關(guān)，死亡風(fēng)險升高。出現(xiàn)低血容量性休克的患犬可視黏膜黏膜蒼白，皮膚彈性差，毛細血管再充盈時間延長，死亡概率上升。死亡犬只剖檢可見，胃腸道脹氣、腸黏膜出血、腸壁變薄等癥狀，極少數(shù)犬只可發(fā)生腸套疊現(xiàn)象。

4 診斷

目前，在基層獸醫(yī)臨床中，犬細小病毒診斷主要采用ELISA 試劑盒檢測抗原， 這種試劑盒易存放，成本低、操作簡便得到了廣泛應(yīng)用，這種試劑盒的特異性比較高，敏感性各不相同。 較早使用的有韓國安捷的試劑盒，現(xiàn)在國產(chǎn)的多種試劑盒檢測結(jié)果也是可以信賴的。檢測方法基本相同，用棉試子從患犬的直腸中采集樣本，加入稀釋液稀釋，靜置取上清液幾滴加入膠體金試劑盒的加樣孔中，幾分鐘后肉眼觀察，檢測線T 區(qū)處如果顯色，即為陽性。 只是，在臨床操作時，有時會發(fā)現(xiàn)試劑盒的檢測線或隱或現(xiàn)，不能明確判斷結(jié)果，給臨床診斷帶來困擾。 造成ELISA 檢測結(jié)果不明確或假陰性的原因，可能與患病動物在拉稀時，腸道內(nèi)有大量的中和抗體結(jié)合了糞便中的抗原有關(guān)。另外，用這種試劑盒檢測時，可以檢測到接種疫苗后4～10 天內(nèi)的疫苗病毒， 造成假陽性結(jié)果。

診斷細小病毒最準確的方法是利用糞便樣本進行PCR 檢測，具有更高的靈敏性，尤其是對于ELISA 試劑盒檢測陰性的疑似病例， 需要用PCR 確診。只是PCR 檢測成本偏高，尤其是在縣級寵物醫(yī)院中，PCR 儀的普及率更低。 據(jù)了解，恒溫擴增PCR 技術(shù)，可以降低設(shè)備和試劑成本，便于基層推廣，期待能通過科研盡快應(yīng)用于臨床實踐。

另外，在細小病毒診療過程中，通過血細胞細胞計數(shù)，對疾病的診斷、治療和預(yù)后都有重要的參考作用。 對于白細胞持續(xù)下降，沒有升高趨勢的病例、淋巴組織發(fā)育不良的病例、出現(xiàn)貧血癥狀的病例多預(yù)后不良［5］。 所以，在治療過程中應(yīng)持續(xù)進行血液常規(guī)分析，白細胞的變化規(guī)律通常與病犬的外觀癥狀也是相一致的，一旦白細胞下降，應(yīng)增強抗生素使用，減少菌血癥的發(fā)生。在康復(fù)病例治療過程中，白細胞計數(shù)通常有逐漸下降繼而再上升的變化規(guī)律。

下表為4 月齡雜種犬在治療過程中的血細胞變化記錄，該犬未免疫，在出現(xiàn)嘔吐癥狀第2天就診，經(jīng)ELISA 試劑盒檢測為細小病毒感染，治療期間經(jīng)過多次糞便檢查， 未發(fā)現(xiàn)寄生蟲感染，對癥治療后，在發(fā)病第7 天，白細胞數(shù)量明顯上升，患犬可少量采食，精神好轉(zhuǎn)，之后未再進行血常規(guī)檢查，2 天后采食增加，大便成型，隨即出院。 這一變化趨勢是很多康復(fù)犬具有的共同特征，從血常規(guī)檢查結(jié)果中可見，該犬紅細胞沒有明顯下降，數(shù)值低于參考值，跟幼齡犬只有關(guān)，表中所列的參考范圍均是成年犬的紅細胞參考范圍，幼犬的正常紅細胞數(shù)量會低于成年犬，跟品種也有一定關(guān)系。 但是，在細小病毒病例中當(dāng)紅細胞數(shù)量和紅細胞壓積顯著降低時，需要考慮輸血治療。 另外，從嚴格意義上講，白細胞計數(shù)，是通過五分類血細胞分析儀對淋巴細胞和粒細胞進行分類計數(shù)分析，只是，五分類血細胞分析儀價格較高，基層使用率低，可以采用人工分類方法進行分類計數(shù)，從大量的臨床病例看，白細胞總數(shù)變化趨勢基本上反應(yīng)出細小病毒病的發(fā)生和發(fā)展過程，一般來說，在生病的第4 天時，白細胞總數(shù)達到最低值，之后，會緩沖和轉(zhuǎn)歸，如果，低谷值低于0.2，或者之后繼續(xù)下降，預(yù)后都要謹慎。總之，白細胞計數(shù)分析，是臨床治療過程中對動物體征的重要的實時檢測。

某細小病毒病犬6 日內(nèi)血細胞計數(shù)

5 治療

細小病毒病的治療主要依靠積極的支持和對癥治療，主要包括液體補充、止吐、止血、消炎控制繼發(fā)感染、營養(yǎng)支持等。

5.1 補液治療

嘔吐、腹瀉以及不能進食進水，會導(dǎo)致患病動物嚴重脫水，需要評估脫水程度給予平衡液體補充，這是細小病毒病治療的金標準，首先要安放留置針建立靜脈輸液通路，對于脫水嚴重的病例，留置針安放也是很大的挑戰(zhàn)，一般采用頭靜脈，實在幼小的犬只，可考慮頸靜脈。病初需盡快以生理鹽水或乳酸林格氏液補充血容量，輸液速度可保持20～25 毫升/千克體重， 盡快恢復(fù)血容量，之后，再慢慢補充組織脫水量，建議24 小時持續(xù)緩慢輸液，可5～10 毫升/千克體重輸液速度維持，并根據(jù)嘔吐、拉稀、尿液量適當(dāng)調(diào)整輸液速度和輸液量。對于拉稀嚴重，低蛋白動物，應(yīng)補充白蛋白、血漿等膠體溶液，當(dāng)患犬血清蛋白濃度低于2.0 克/分升時，死亡率會增加。 同時，當(dāng)膠體滲透壓過低時，繼續(xù)輸入晶體液，容易引起皮下、肺水腫，嚴重的肺水腫導(dǎo)致動物死亡。補液量不足，低血容量可引起患犬腎衰竭和胰腺炎的發(fā)生，不利于疾病治療，所以，細小病毒病治療中，液體補充必不可少，同時還要不斷評估機體水合狀況，恰當(dāng)補液，正確補液。

5.2 離子及血糖補充

嘔吐拉稀易造成離子丟失，鉀離子的丟失，造成低鉀癥， 使心肌收縮力和心輸出量下降，還可造成麻痹性腸梗阻［6］，所以，血氣分析，在細小病毒治療過程中具有重要的指導(dǎo)意義，結(jié)合血氣分析結(jié)果，可以判斷患犬的體液狀況，是否有離子和酸堿的不平衡，是否有低血糖等癥狀。 低血糖也是細小病毒病的常見并發(fā)癥，小型犬中更常見，可參考血氣分析指標給予補充，一旦出現(xiàn)低血糖， 應(yīng)先使用25%的葡萄糖1～2 毫升/千克靜脈輸入， 之后給予2.5%～5%的葡萄糖晶體液維持血糖濃度。 鉀離子補充可使用10%的氯化鉀補充，濃度不超過0.3%。

5.3 止吐、止血

止吐可用鹽酸馬羅匹坦1 毫克/千克， 每日1 次皮下注射，馬羅匹坦是一種神經(jīng)激肽-1 受體拮抗劑， 除了中樞止吐作用，還可起到內(nèi)臟鎮(zhèn)痛作用，可緩解細小病毒引起的腸炎腹痛。還可以使用甲氧氯普胺0.5 毫克/千克，每8小時靜脈注射一次，也可減少嘔吐次數(shù)。如果有胃腸道潰瘍和返流的病例可口服硫糖鋁，犬0.5～1 克，還可口服質(zhì)子泵抑制劑如奧美拉唑0.5～1毫克/千克體重，每日1～2 次。止血可用酚黃乙胺、凝血酶等。

5.4 藥物治療

由于細小病毒對動物腸道的損傷，可導(dǎo)致細菌移位，造成膿毒血癥，選擇敏感性抗菌素是非常必要的，藥物敏感性檢測簡易試劑盒在市場上已經(jīng)有應(yīng)用，比較方便快捷，一次檢測成本一百元左右，如果不做檢測可根據(jù)經(jīng)驗使用廣譜抗革蘭氏陰性菌和厭氧菌的藥物， 如三代頭孢類藥物、氟奎諾酮類藥物等在臨床中可起到較好的作用， 但大型犬的幼犬應(yīng)避免使用氟奎諾酮類藥物。在腎灌注量不足時不建議使用氨基糖苷類抗生素，以免造成腎臟危害，也不建議使用非甾體類藥物，造成消化道潰瘍。在細小病毒病例中，混合寄生蟲感染的現(xiàn)象比較多見，如蛔蟲、球蟲、絳蟲、賈第鞭毛蟲等都是比較常見的，當(dāng)動物可以接受口服給藥時，應(yīng)及時給予驅(qū)蟲藥，控制寄生蟲的混合感染，利于動物盡快康復(fù)。 為維持腸道正常菌群，可以口服益生菌。有研究表明，對于出血拉稀嚴重的患畜，可以采集健康動物的糞便進行腸內(nèi)移植，可以幫助患犬恢復(fù)腸道微生態(tài)。

5.5 生物制品的應(yīng)用

從理論上講，高免血清治療是一種可行的策略，單克隆抗體在臨床上也有不少應(yīng)用，但是，沒有足夠的研究數(shù)據(jù)支持。已證明早期腸內(nèi)注射細小病毒抗體可有效減緩臨床癥狀［8］。 犬干擾素的使用，可增加犬的免疫力，人粒細胞集落刺激因子可增加粒細胞的釋放，在白細胞明顯降低的患病動物中可以試用，目前，都還沒有權(quán)威的資料支持。

5.6 盡早飼喂

最新研究表明，盡早給予患畜食物，可以促進腸道正常收縮，減輕疼痛，減少梗阻發(fā)生。食物可以促進腸內(nèi)健康上皮細胞恢復(fù)和黏膜再生，可以使胃腸道保持更健康的黏膜屏障，減少細菌移位，提高動物的免疫力［9］。 喂食還能縮短患病動物的惡心持續(xù)時間，減少嘔吐次數(shù)。總之，控食控水的傳統(tǒng)療法已不可取，低脂食物，少食多餐，逐漸加量，更有利于病畜的恢復(fù)。

5.7 預(yù)防免疫

從細小病毒的發(fā)生和治療過程中，不難看出機體內(nèi)中和抗體的存在對于抵抗疾病發(fā)揮了巨大的作用，所以有效預(yù)防細小病毒的方法還是免疫接種。目前使用較多的是美國輝瑞公司和英特威的四聯(lián)疫苗。細小病毒疫苗被列為犬的核心疫苗，根據(jù)小動物獸醫(yī)協(xié)會（WASAVA）疫苗注射指導(dǎo)， 幼犬疫苗注射的最后一次應(yīng)在16～18 周接種，此時，母源抗體抗體會完全消失，將不再影響免疫效果。 在犬類繁殖基地，由于病毒可能難以清除，可給1 月齡左右幼犬注射細小病毒和犬瘟熱二聯(lián)疫苗，可突破母源抗體的干擾，從臨床上看，也可以起到有效的保護作用。 一旦發(fā)生細小病毒病，在半年內(nèi)，不建議在原環(huán)境中繼續(xù)喂養(yǎng)沒有免疫的幼犬，新養(yǎng)犬只，要注意保暖，少洗澡，不亂喂食，定期驅(qū)蟲，按照免疫程序接種疫苗。

（ 項目基金： 河北省高等學(xué)校科學(xué)技術(shù)研究項目”基于酶促恒溫擴增技術(shù)的細小病毒核酸快速檢測技術(shù)研究”（ZC2022075 ） 邯鄲市科技局項目：畜禽常用抗菌素藥敏檢測簡易試劑盒的研究21422012025）