轉鐵蛋白修飾的姜黃素脂質體的制備及體外抗腫瘤活性

季 珂，韓 華，韓 冰，梁綠圓，祝俠麗，關延彬*

轉鐵蛋白修飾的姜黃素脂質體的制備及體外抗腫瘤活性

季 珂1，韓 華1，韓 冰1，梁綠圓2，祝俠麗1，關延彬1*

1. 河南中醫藥大學藥學院，河南 鄭州 450040 2. 河南中醫藥大學兒科醫學院，河南 鄭州 450040

制備轉鐵蛋白（transferrin，Tf）修飾的姜黃素（curcumin，Cur）脂質體（Tf-Cur-Lip），并研究其理化性質和體外抗腫瘤活性。采用薄膜分散法制備Tf-Cur-Lip，對其形態、粒徑、多分散性指數、包封率、載藥量、體外釋放等進行表征；以人前列腺癌DU154細胞為模型進行細胞抑制率實驗與細胞攝取實驗。所制得的Tf-Cur-Lip呈類球形，大小分布均勻，平均粒徑為（68.27±0.36）nm，多分散指數為0.194±0.050，平均包封率與載藥量分別為（98.13±0.38）%與（2.94±0.38）%。體外釋放研究表明，Tf-Cur-Lip相比游離姜黃素具有一定緩釋效果。MTT實驗結果表明Tf-Cur-Lip對DU145細胞的抑制作用顯著高于游離姜黃素，與非靶向姜黃素脂質體（Cur-Lip）相比，轉鐵蛋白的修飾明顯增加了DU145細胞對脂質體的攝取效率。成功制備了Tf-Cur-Lip，該脂質體能夠提高腫瘤靶向性，具有一定的抗腫瘤活性。

姜黃素；轉鐵蛋白；脂質體；抗腫瘤活性；薄膜分散法；靶向性

前列腺癌是全世界男性癌癥死亡率最高的原因之一，大多數前列腺癌患者后期會發展為抗去勢前列腺癌（castration resistant prostate cancer，CRPC），目前，對CRPC缺乏有效的治療方法[1]。常規治療方式包括化療、雄激素剝奪、分子靶向、免疫療法等，但其臨床療效及預后仍不理想，一些患者出現耐藥抵抗及嚴重不良反應[2]。

姜黃素（curcumin，Cur）是從姜黃L.植物根莖中提取的一種生物活性化合物，臨床前研究已經證實姜黃素具有抗抗炎、抗氧化和抗腫瘤活性。體內外研究表明，姜黃素具有抑制前列腺腫瘤細胞增殖和細胞周期進展并誘導細胞凋亡發揮腫瘤的作用，能夠通過多種機制阻止或延緩前列腺癌的病情進展，對CRPC也有良好的治療效果。目前，部分已完成的臨床試驗結果顯示，姜黃素對不同惡性腫瘤患者的治療具有安全性和有效性，其中姜黃素抗腫瘤效應最有前景的是姜黃素聯合其他抗腫瘤化療藥物或使用新型藥物遞送方式[3]。但由于其水溶性差、代謝快、吸收低、使攝入的姜黃素不能充分發揮其作用，限制了姜黃素的臨床使用[4-6]。

納米遞藥系統在癌癥治療方面比傳統的化療具有更多的優勢。脂質體具有防止藥物降解，增強藥物穩定性，控制藥物釋放，改善藥物藥代動力學等優勢。但傳統脂質體缺乏特異性和選擇性。為了解決這個問題，利用多種靶向配體對脂質體進行表面修飾，通過識別細胞表面過表達的受體來提高脂質體對腫瘤細胞的定向傳遞，已經被廣泛應用[7-8]。轉鐵蛋白受體（transferrin receptor，TfR）在惡性腫瘤細胞中表達顯著增強。轉鐵蛋白（transferrin，Tf）與腫瘤細胞表面的TfR的親和力是正常細胞表面的10～100倍，故將Tf為靶向功能基團與脂質體相連，可有效實現抗腫瘤的靶向治療作用[9]。

本研究目的是設計一種尺寸合適、包封效率高、具有緩釋特性和靶向性好的Tf修飾的姜黃素脂質體（transferrin modified curcumin liposomes，Tf-Cur- Lip），對其理化性質進行表征。并選取前列腺腫瘤細胞DU145細胞系，進一步考察其體外細胞毒性和細胞攝取能力，以期提高姜黃素的生物利用度，提高其在臨床應用中的抗腫瘤療效。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Waters E2695型高效液相色譜儀，美國沃特式公司；OSB-2100型真空旋轉蒸發儀，上海愛朗儀器有限公司；NaNo-ZS90型激光粒度分析儀，英國Malvern公司；JY92-11N型超聲波細胞粉碎機，寧波生物科技股份有限公司；Primovert Olympus倒置熒光顯微鏡，日本奧林巴斯株式會社；Tecnai G2型透射電子顯微鏡（SEM），美國Fei公司。

1.2 試藥

姜黃素對照品，批號B20614，質量分數≥98%，上海源葉生物科技有限公司；姜黃素原料藥，批號M13GS148382，質量分數＞95%，科密歐化學試劑有限公司；大豆卵磷脂，批號s30870，上海源葉生物科技有限公司；二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（DSPE-PEG 2000）、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-轉鐵蛋白（DSPE-PEG 2000-Tf），批號RD0200814、RD0200908，西安瑞禧生物科技有限公司；泊洛沙姆F127（Pluronic F127，F127），批號9003-11-06，西安悅來醫藥科技有限公司；辛基-瓊脂糖凝膠CL-4B，批號20180928，北京索萊寶科技有限公司；BCA蛋白濃度測定試劑盒，批號20190227，南京建成生物工程研究所；噻唑藍（MTT），批號2019325，Amersco公司；1640培養液，批號20210927，北京索萊寶科技有限公司；DU145細胞株均購于中國科學院上海細胞庫。

2 方法與結果

2.1 姜黃素脂質體（curcumin liposome，Cur-Lip）和Tf-Cur-Lip的制備

基于前期試驗[10]，采用薄膜水化法制備Cur- Lip，稱取處方量的脂質材料磷脂-膽固醇物質的量比6∶3于250 mL圓底燒瓶中，加入4 mL氯仿溶解；姜黃素溶于1 mL的無水乙醇，加至圓底燒瓶，脂質材料與藥物質量比（脂藥比）10∶1，45 ℃下減壓旋蒸，使成為均勻的薄膜。水合過程加入15 mL溶于pH 6.5 PBS（含1% F127），水化2 h。冰浴下探超4 min，4 ℃下冷藏備用。精密稱取一定量DSPE-PEG 2000-Tf溶于氯仿中，在茄形瓶中減壓蒸發成膜，除去有機溶劑，置于真空干燥器中過夜，使其充分干燥，加入適量PBS水化，制備成DSPE- PEG 2000-Tf膠束。分別將Cur-Lip與DSPE-PEG 2000-Tf膠束混合（脂質材料與膠束物質的量比500∶1），于恒溫振蕩器下，37 ℃下避光反應1 h，反應后溶液過PBS平衡的CL-4B瓊脂糖凝膠柱（20 cm×1 cm）除去游離的DSPE-PEG 2000-Tf，得到Tf-Cur-Lip[11-14]，洗脫曲線見圖1。

2.2 姜黃素含量測定

2.2.1 色譜條件 色譜柱為Dikma C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相為甲醇-0.5%冰醋酸水溶液（75∶25）；體積流量1.0 mL/min；柱溫30 ℃；檢測波長424 nm。

2.2.2 對照品溶液的制備 精密稱取姜黃素對照品12.5 mg置于25 mL量瓶中，加入無水乙醇溶解定容，作為母液。精密吸取1 mL母液置10 mL量瓶中，無水乙醇稀釋至刻度，配制質量濃度50 μg/mL姜黃素對照品儲備液，避光保存。

圖1 Tf-Cur-Lip洗脫曲線

2.2.3 供試品溶液的制備 精密吸取Tf-Cur-Lip溶液0.2 mL，加入甲醇至4 mL，超聲破乳，離心取上清液0.5 mL，加入無水乙醇稀釋定容至5 mL量瓶中，得Tf-Cur-Lip供試品溶液。

2.2.4 線性關系考察 將50 μg/mL姜黃素對照品溶液用PBS（pH 6.5）溶液依次稀釋為0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 μg/mL的系列質量濃度對照品溶液，12 000 r/min離心（離心半徑6.0 cm）10 min，取上清液進樣檢測，以峰面積對質量濃度進行線性回歸處理，得標準曲線方程＝180 401－22 984，2＝0.999 7，結果表明姜黃素在0.2～2.0 μg/mL線性關系良好。

2.2.5 精密度試驗 將0.2、1.2、2.0 μg/mL的對照品溶液各5份，分別于1 d內連續進樣3次，連續3 d，計算日內和日間精密度。結果表明低、中、高3個質量濃度的日內、日間精密度RSD值均小于5%，表明該儀器精密度良好。

2.2.6 重復性試驗 按“2.2.3”項方法制備5份Tf-Cur-Lip供試品溶液，在“2.2.1”項色譜條件下測定峰面積，計算姜黃素質量濃度，結果顯示，姜黃素質量濃度的RSD為1.37%，表明該方法重復性良好。

2.2.7 穩定性試驗 按“2.2.3”項方法制備Tf- Cur-Lip供試品溶液，分別于制備后 0、2、4、8、12、24 h取樣，在“2.2.1”項色譜條件下進行HPLC分析，結果顯示姜黃素峰面積的RSD為0.95%，表明供試品溶液24 h內穩定性良好。

2.2.8 加樣回收率試驗 精密量取已測定姜黃素含量的Tf-Cur-Lip供試品溶液9份，各1 mL，分別加入低、中、高3種質量濃度的姜黃素對照品溶液，在“2.2.1”項色譜條件下進行HPLC分析，計算加樣回收率。結果顯示，低、中、高質量濃度姜黃素對應的加樣回收率分別為（99.70±0.67）%、（105.50±2.40）%和（103.20±0.52）%，RSD分別為1.67%、0.77%、0.38%。

2.3 包封率與載藥量的測定

取適量脂質體混懸液過0.22 μm的微孔濾膜，精密吸取0.2 mL濾液，加入甲醇至4 mL，超聲破乳，離心取上清液0.5 mL，稀釋后HPLC測得姜黃素質量濃度（1），代入標準曲線計算得姜黃素質量（1）。另取0.2 mL未過濾膜脂質體混懸液，同法破乳處理，測得質量濃度（2），制備脂質體的膜材與藥物總質量（2）。

包封率＝1/2

載藥量＝1/2

結果表明，Cur-Lip與Tf-Cur-Lip包封率分別為（93.83±0.41）%、（98.13±0.38）%（＝3），RSD值分別為0.43%、0.65%；載藥量分別為（3.14±0.08）%、（2.94±0.38）%（＝3），RSD值分別為2.40%、1.26%。

二喹啉甲酸法（bicinchoninic acid，BCA）測量經CL-4B柱濾過的蛋白濃度，及未經純化的蛋白質量濃度，兩者比值作Tf偶聯脂質體的偶聯率[15]，結果為（29.28±1.15）%（＝3），RSD值為3.92%。

2.4 脂質體的表征

2.4.1 形態 取2種脂質體混懸液適量稀釋，滴至覆有支持膜的銅篩網上，用2%磷鎢酸染色4 min，自然干燥后，使用SEM觀察形態。結果見圖2，可知，Cur-Lip呈均一球形且圓整度較好，Tf-Cur-Lip形態規則，呈類球狀，磷脂雙分子層較清晰可見，推測蛋白分子或穿插于類脂膜中。

2.4.2 粒徑與分布 取2種脂質體混懸液適量稀釋，采用馬爾文激光粒度測定儀檢測其粒徑分布。結果見圖3，可知，Cur-Lip與Tf-Cur-Lip平均粒徑分別為（83.13±1.59）、（68.27±0.36）nm，多分散指數（polydispersity index，PDI）值分別為0.205±0.030、0.194±0.050，表明脂質體粒徑大小均一，分布均勻。

圖2 姜黃素脂質體的TEM圖

圖3 姜黃素脂質體粒徑分布

2.5 脂質體的體外釋放實驗

采用反相透析法研究Cur-Lip及Tf-Cur-Lip的體外釋藥行為。精密吸取5 mL姜黃素原料藥混懸液（姜黃素組）、Cur-Lip混懸液及Tf-Cur-Lip混懸液（姜黃素含量約1 mg），分別置于45 mL含1%聚山梨酯80的PBS釋放介質中，精密吸取3 mL釋放介質于預先處理好的透析袋中（截留相對分子質量500），兩端夾緊，于37 ℃，100 μg/mL恒溫水浴搖床震蕩，分別在0.5、1、2、4、8、12、18、24、36、72 h時間點下精密吸取透析袋內0.2 mL樣品并補充等體積空白釋放介質，無水乙醇適當稀釋后HPLC測定，使用DDSolver軟件繪制計算體外累積釋放率，并對其進行體外釋藥動力模型擬合。由圖4可知，姜黃素組、Cur-Lip組和Tf-Cur-Lip組在72 h累積釋放率分別為70.89%、63.27%、62.54%。與原料藥相比較，2種脂質體制劑顯示了出一定的緩釋特征。分別采用零級動力學方程、一級動力學方程、Higuchi方程對姜黃素組、Cur-Lip組和Tf-Cur- Lip組于0～72 h的體外累積釋放率進行擬合，以相關系數（）值望大以及均方誤差（MSE）望小為最佳擬合，由表1結果可知，姜黃素組的釋放曲線較符合零級動力學釋藥模型，制劑組體外釋放行為更符合Higuichi動力學模型。

圖4 姜黃素與不同制劑的體外釋放曲線

表1 姜黃素與不同制劑體外釋放度模型擬合

Table 1 Curcumin and its preparations invitro released in various models

樣品數學模型擬合方程k0k1kHrMSE 姜黃素0級F＝k0t0.60 0.8637.73 1級F＝100 (1－ek1t) 0.03 0.23351.03 HiguichiF＝kHt1/2 10.210.59184.73 Cur-Lip0級F＝k0t1.14 0.44254.73 1級F＝100 (1－ek1t) 0.02 0.70135.71 HiguichiF＝kHt1/2 8.510.9332.51 Tf-Cur-Lip0級F＝k0t1.07 0.56181.10 1級F＝100 (1－ek1t) 0.02 0.75103.78 HiguichiF＝kHt1/2 7.910.9617.78

2.6 脂質體穩定性實驗

2.6.1 長期穩定性實驗 將2種脂質體放置在低溫、避光的條件下，于0、3、7、10、15 d測定其泄漏率及粒徑，評價其穩定性。結果見圖5-A。結果表明4 ℃下避光存放15 d脂質體中藥物泄漏率超過10%，因此，后續考慮通過引入穩定劑或添加凍干保護劑進行冷凍干燥等方式提高制劑穩定性、使其更宜長期儲存。

泄漏率＝儲存后泄露到介質中的藥物質量/儲存前包封的藥物質量

2.6.2 血漿穩定性實驗 采用10%胎牛血清模擬血漿環境，分別將加入2種脂質體的10%胎牛血清置于37 ℃的恒溫搖床中放置48 h，定時取樣測定粒徑。結果見圖5-B，可知，Cur-Lip與Tf-Cur-Lip在血漿中放置48 h，粒徑有所增大，但仍在100 nm左右，表明其血漿穩定性良好。

A-4 ℃下儲存15 d的泄漏率 B-10%胎牛血清中粒徑變化

2.7 姜黃素脂質體體外抗腫瘤研究

2.7.1 樣品溶液的配制 精密稱取9.2 mg姜黃素，溶于1 mL二甲基亞砜中，用1640培養基稀釋配制濃度為10、20、30、40、50 μmol/L；將適量Cur-Lip混懸液和Tf-Cur-Lip混懸液用1640培養基稀釋配制濃度10、20、30、40、50 μmol/L。將空白脂質體混懸液按照上述樣品方法進行同步稀釋。

2.7.2 MTT細胞實驗方法 將復蘇的DU145細胞接種到1640培養基中（含10%胎牛血清、100 μg/mL 鏈霉素100 U/mL青霉素），在37 ℃、5% CO2飽和濕度條件下培養。隔天傳代。取處于對數生長期的DU145細胞制備成單細胞懸液，以5000個/孔的細胞密度接種于96孔板。待細胞貼壁后，再加入200 μL不同濃度梯度的樣品（空白脂質體、姜黃素、Cur-Lip、Tf-Cur-Lip）至96孔板中（設4個復孔，其中空白組沒種細胞，只加培養液，對照組種細胞，只加培養液），姜黃素終濃度分別為10、20、30、40、50 μmol/L，分別培養24、48、72 h。在終止培養4 h前，取出96孔板，每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL），于平板震蕩儀上以100 r/min輕輕震蕩3 min，使MTT溶液充分混勻。終止培養后，使用平板離心機2500 r/min離心（離心半徑9 cm）10 min使甲瓚結晶與培養液分離，使用移液槍沿壁小心吸棄培養液。每孔加入150 μL二甲基亞砜溶液，震蕩2 min，使用酶標儀在490 nm處檢測每個孔的吸光度（）值，計算細胞存活率，SPSS 17.0計算半數致死濃度（IC50）。

細胞存活率＝(藥物－空白)/(陰性對照－空白)

結果如圖6所示，前列腺腫瘤細胞正常培養72 h，空白載體在與加藥組相同濃度范圍內，細胞存活率均大于90%，表明空白脂質體對2種細胞均無明顯毒性作用。圖7表明，姜黃素組、Cur-Lip組及Tf-Cur-Lip組對DU145細胞增殖均具有抑制作用，且隨著給藥時間和給藥濃度的延長，特別是濃度超過30 μmol/L后，各制劑對前列腺腫瘤細胞的抗增殖能力均優于姜黃素，且Tf-Cur-Lip效果又優于Cur-Lip。在72 h時，Tf-Cur-Lip的IC50值最小，為15.58 μmol/L，對前列腺腫瘤細胞增殖抑制效果是游離姜黃素的（2.07±0.28）倍，而Cur-Lip抑制效果是游離姜黃素的（1.55±0.12）倍。

圖6 空白脂質體對細胞活性的影響(, n = 3)

2.7.3 細胞攝取實驗 取處于對數生長期的DU145細胞制備成單細胞懸液，接種到12孔培養板中，細胞密度控制為1×105/孔，置于37 ℃，5% CO2細胞培養箱中培養，待細胞貼壁，棄去培養基，PBS清洗后，分別加入含姜黃素、Cur-Lip、Tf-Cur-Lip的培養基，各組姜黃素終濃度分別為10、20、30、40 μmol/L，避光孵育1 h。棄去培養基，用PBS清洗，加入200 μL 1%細胞裂解液Triton X-100，4 ℃下避光充分裂解細胞后，細胞懸液轉移至離心管并反復凍融3次。12 000 r/min離心（離心半徑6.0 cm）10 min，精密量取上清液100 μL，甲醇300 μL，充分渦旋混勻后，HPLC進樣測定姜黃素含量。采用激光共聚焦顯微鏡觀察姜黃素及其脂質體制劑使用Hoechst 33342染色液標記的DU145細胞，觀察相同孵育時間下，姜黃素及其脂質體制劑在DU154細胞的分布情況。

圖7 姜黃素與不同制劑組對DU145細胞活性的影響 (, n = 3)

如圖8所示，Tf-Cur-Lip組與Cur-Lip組細胞攝取量在實驗濃度范圍內均高于姜黃素組，且靶向的Tf-Cur-Lip組細胞攝取量要高于Cur-Lip組，Cur-Lip組在給藥濃度10、20、30、40 μmol/L下，體外細胞攝取量分別是姜黃素組的1.4、2.8、2.5、4.1倍。而Tf-Cur-Lip組分別是姜黃素組的1.7、3.1、2.7、5.1倍。激光共聚焦顯微鏡的觀察結果與此一致（圖9），姜黃素不僅分布于細胞膜及胞漿中，而且可以進入細胞核中，其中姜黃素組、Cur-Lip組、Tf-Cur- Lip組的共定位皮爾森相關系數分別為0.50、0.52、0.61，Manders相關系數分別為0.77、0.80、0.86，說明Tf的修飾增強了DU145細胞對姜黃素脂質體的攝取，并且可以釋放更多藥物進入細胞核中。

與姜黃素組比較：*P＜0.05 **P＜0.01

3 討論

姜黃素在水中溶解度極小、體液不穩定、體內代謝快，導致其口服生物利用度低，嚴重影響了其臨床應用。此外，姜黃素在生理條件下具有極其敏感的水解降解作用[14]。目前多種納米遞藥系統，包括脂質體，膠束等已被用于增加姜黃素的水溶性和穩定性[13-14,16]。

研究表明，Pluronic F127修飾的脂質體可以改善脂質體的粒徑及穩定性[17-18]，因此，在制備脂質體過程中，水化介質中加入了一定比例的Pluronic F127用以調節，制備得到的Cur-Lip平均粒徑在83.13 nm，而前期實驗中沒有加入Pluronic F127制備的Cur-Lip平均粒徑在151.1 nm左右[10]，表明加入一定比例的Pluronic F127確實可有效降低脂質體的粒徑，究其原因可能是Pluronic F127可選擇性插入或吸附在脂質體雙分子層中，使脂質體排列的更致密。而且研究發現Pluronic F127包裹的納米粒能有效克服胃腸道黏液屏障提高藥物的跨膜吸收[18]。因其能在納米粒表面形成疏松的網狀結構層，有效屏蔽納米粒表面的電荷，且具有較強的親水性，可以減少納米粒與黏液層之間的靜電作用和疏水作用。后續實驗會進一步考察Tf-Cur-Lip的小腸吸收機制，為探討姜黃素口服納米靶向制劑的研究提供理論依據

。

圖9 姜黃素與不同制劑處理DU145細胞激光共聚集顯微鏡圖像

釋放度實驗表明，Cur-Lip及Tf-Cur-Lip具有相似的釋藥行為，說明Tf的結合對姜黃素脂質體釋放行為無明顯影響，表明姜黃素可以從2種脂質體中緩慢釋放，在到達腫瘤組織之前有利于減少血液循環中的藥物滲漏，有效提高藥物的穩定性。有研究認為，Pluronic F127插入脂質體膜，增加膜的穩定性，也可能會阻止藥物從脂質體中釋放起到長效作用[13]。

脂質體的包載明顯提高了前列腺腫瘤細胞對姜黃素的攝取，而且Tf-Cur-Lip相較于普通Cur-Lip能夠更多的被DU145細胞攝取。研究證實轉鐵蛋白修飾脂質體可通過受體介導的內吞作用進入腫瘤細胞[20-21]，說明Tf-Cur-Lip的靶向性可能與TfR修飾的內吞作用有關，使更多的姜黃素進入腫瘤組織，實現了Tf修飾的納米靶向脂質體對前列腺腫瘤細胞的高效親和力及轉運能力。本實驗發現如果在細胞攝取實驗中，提前加入150 μg/mL的游離Tf孵育細胞30 min，再加入Tf-Cur-Lip處理細胞，與沒有加入Tf孵育的Tf-Cur-Lip實驗組相比較，細胞攝取量會降低，分別為（2.45±0.27）、（3.25±0.52）μg/mL。通過競爭性抑制實驗說明Tf-Cur-Lip被細胞所攝取與細胞表面的轉鐵蛋白受體介導的內吞作用有關，但具體內吞機制還有待進一步說明。細胞毒性實驗結果與此一致, 說明載藥脂質體對腫瘤細胞增殖抑制作用可能與腫瘤細胞對Tf-Cur-Lip的攝取增加有關。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Preparation and anti-tumor activityof transferrin modified curcumin liposomes

JI Ke1, HAN Hua1, HAN Bing1, LIANG Lyu-yuan2, ZHU Xia-li1, GUAN Yan-bin1

1. School of Pharmacy, Henan University of TCM, Zhengzhou 450040, China 2. School of Pediatrics, Henan University of TCM, Zhengzhou 450040, China

To prepare transferrin (Tf) modified curcumin (Cur) liposomes (Tf-Cur-Lip) and evaluate its physicochemical properties and antitumor activity.The Tf-Cur-Lip was prepared by thin film dispersion method, followed by characterization of the morphology, particle size, polydispersity index (PDI), encapsulation efficiency, drug loading amount andrelease.The anti-proliferative effect and cellular uptake of Tf-Cur-Lip were studied in DU145 cells.The prepared Tf-Cur-Lip showed spherical morphology, and the average particle size was (68.27 ± 0.36) nm and uniform distribution with narrow PDI was (0.194 ± 0.050). The encapsulation efficiency and drug loading amount were (98.13 ± 0.38)% and (2.94±0.38)%, respectively. Therelease studies showed that Tf-Cur-Lip has a sustained-release property compared with free Cur. MTT assay showed that the inhibitory effect of Tf-Cur-Lip on DU145 cells was significantly higher than that of free Cur. Tf-Cur-Lip showed significantly increased cellular uptake than curcumin-loaded liposomes (Cur-Lip) in DU145 cells.Tf-Cur-Lip were successfully prepared , which can improve tumor targeting capability with enhanced anti-tumor activity.

curcumin; transferrin; liposome; anti-tumor activity; thin film dispersion method; targeting

R283.6

A

0253 - 2670(2022)18 - 5649 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.18.007

2022-04-01

國家自然科學基金資助項目（81803740）；河南省科技攻關項目（182102310096）；河南省高等學校重點科研項目（18B360002）；河南省中醫藥科學研究專項課題（20-21ZY2150）；河南省高校國家級大學生創新創業訓練計劃項目（202110471009）

季 珂，碩士研究生，主要從事藥物新劑型研究。Tel: 18738607939 E-mail: 1789271688@qq.com

關延彬，教授，主要從事中藥新劑型與新技術研究。Tel: (0371)65962746 E-mail: guanyanbin96@126.com

[責任編輯 鄭禮勝]