燒傷整形患者血清Toll樣受體4和髓樣細胞觸發受體1表達水平及影響因素分析

華 振，趙卓偉，段策中，霍君藝

(空軍軍醫大學唐都醫院燒傷整形科，陜西 西安 710038)

人體燒傷組織會出現缺損、增生，嚴重影響外觀，并造成不同程度的功能障礙，患者生理和心理負擔沉重。燒傷后整形能夠改善甚至完全恢復外觀和功能，隨著醫學技術的發展和實踐經驗的積累，燒傷整形手術日漸成熟[1]。但由于燒傷通常創面較大，手術切口多，損傷組織皮瓣對外界病原菌抵抗能力較差，相對于其他整形手術，其術后發生感染等并發癥的風險較高[2-3]。燒傷患者體內存在大量微生物及其代謝產物，能夠激活全身性炎癥反應，這對整形手術而言也是較大的挑戰[4]。炎癥反應在燒傷患者傷后、整形手術中具有至關重要的作用，其中Toll樣受體4(Toll-like receptor 4，TLR4)[5]、髓樣細胞觸發受體1(Triggering receptor expressed on myeloid cell 1，TREM1)[6]是目前發現的兩種重要的促炎癥因子，可引起機體組織和器官損傷。但目前關于燒傷整形患者TLR4和TREM1表達的研究較少。鑒于此，本研究探討燒傷整形患者血清TLR4和TREM1水平及影響因素，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2019年2月至2022年2月期間本院燒傷整形科收治的燒傷整形患者58例(燒傷整形組)和健康體檢者50例(健康對照組)作為研究對象。燒傷整形組男性37例，女性21例；年齡19～65歲，平均(37.16±5.83)歲；平均燒傷面積(59.29±11.73)cm2；燒傷部位中，頭面部19例，四肢24例，背部13例，胸腹部2例；燒傷原因中，熱液燒傷21例，火焰燒傷19例，電燒傷14例，其他5例。健康對照組男性32例，女性18例；年齡22～68歲，平均(37.86±6.28)歲。兩組性別構成及年齡比較差異無統計學意義(均P>0.05)。納入標準：燒傷整形組患者在本院接受燒傷治療整形；臨床資料完整；知情同意。排除標準：合并重大器質性疾病；妊娠期、哺乳期女性；急危重癥燒傷；中途退出及失訪者。本研究已通過醫院倫理委員會審批。

1.2 研究方法

1.2.1 資料收集：收集并記錄患者年齡、性別、體重、身高、基礎疾病(高血壓和糖尿病)、創面瘢痕、整形手術時間、抗菌藥物種類、術區殘留瘢痕、術區殘留創面、術后感染等。根據體重和身高計算體重指數(BMI)。感染診斷標準參照《醫院感染診斷標準(試行)》[7]中切口感染診斷標準。

1.2.2 實驗室檢測：采集研究對象晨起空腹靜脈血5 ml，室溫靜置1 h后3000 r/min離心10 min，分離血清。分別采用人TLR4酶聯免疫吸附(ELISA)試劑盒(批號：ab277392，英國Abcam公司)和人TREM-1 ELISA試劑盒(批號：ab270884，英國Abcam公司)檢測血清TRL4和TREM1水平。每個樣本均重復檢測3次，以平均值作為該樣本TRL4和TREM1含量。

2 結 果

2.1 燒傷整形組與健康對照組血清TRL4和TREM1表達水平比較 見表1。燒傷整形組血清TRL4和TREM1表達水平顯著高于健康對照組(均P<0.05)。

表1 燒傷整形組與健康對照組血清TRL4和TREM1表達水平比較(ng/ml)

2.2 燒傷整形患者血清TRL4和TREM1表達水平的相關性 見圖1。Perason分析結果表明，燒傷整形患者血清TRL4和TREM1水平呈正相關(r=0.613，P<0.05)。

圖1 燒傷整形患者血清TRL4和TREM1表達水平的相關性

2.3 燒傷整形患者血清TLR4和TREM1表達水平影響因素單因素分析 見表2。單因素分析發現，增生性瘢痕、整形手術時間、抗菌藥物種類、術區殘留瘢痕、術區殘余創面、術后感染是影響燒傷整形患者血清TLR4表達水平的重要因素，而增生性瘢痕、整形手術時間、術區殘余創面、術后感染是影響燒傷整形患者血清TREM1表達水平的重要因素(均P<0.05)。

2.4 燒傷整形患者血清TLR4和TREM1表達水平影響因素Logistic回歸分析 見表3、4。分別以燒傷整形患者血清TLR4和TREM1表達水平作為因變量，以增生性瘢痕、整形手術時間、抗菌藥物種類、術區殘留瘢痕、術區殘余創面、術后感染作為自變量，進行多元Logistic回歸分析，結果表明增生性瘢痕、整形手術時間≥180 min、抗菌藥物種類>2種、術區殘余創面、術后感染是燒傷整形患者血清TLR4表達水平的獨立危險因素，而增生性瘢痕、整形手術時間≥180 min、術區殘余創面、術后感染是燒傷整形患者血清TREM1表達水平的獨立危險因素(均P<0.05)。

表3 燒傷整形患者血清TLR4表達水平影響因素Logistic回歸分析

表4 燒傷整形患者血清TREM1表達水平影響因素Logistic回歸分析

3 討 論

燒傷是臨床常見的一種復雜的皮膚損傷性疾病，可造成不同程度的生理紊亂、組織壞死，皮膚損傷后病原微生物極易侵入體內引起感染，嚴重者甚至發生全身性炎癥反應和膿毒癥，引起患者死亡[8-9]。燒傷后皮膚外觀通常不佳，患者心理壓力較大；四肢燒傷和面部燒傷可能造成部分生理功能缺損，給患者正常生活、工作造成嚴重不良影響，通過整形能夠改善患者外觀和生理功能，是目前燒傷后治療的重要組成部分[10]。在燒傷患者治療和康復過程中炎性因子一直貫穿始終，成為影響預后的關鍵因素。因此，近年來逐漸有學者關注燒傷整形患者炎性程度及相關的生物標志物[11]。

本研究發現，與健康對照組相比，燒傷整形患者血清TLR4和TREM1表達水平顯著增加。TLR4是非特異性免疫細胞、T淋巴細胞和B淋巴細胞表面的一種跨膜蛋白，胞外區富含亮氨酸，能夠和CD14分子中的亮氨酸重復序列結合進而介導蛋白間反應，胞內區為高度保守序列，能夠與白細胞介素(IL)-1受體結合進而誘導下游信號通路、蛋白激酶發揮免疫活性[12-13]。燒傷患者血液中含有較多的細菌代謝產物，其中以細菌脂多糖激發機體炎癥反應的能力最強，脂多糖與TLR4胞外區結合后，跨膜信號能夠通過胞內區激活轉錄因子，進而促進各種炎癥因子表達[14]。TREM1是免疫球蛋白超家族的成員，是一種中性粒細胞、單核細胞、巨噬細胞表面表達的髓系細胞表面受體，能夠應答內源性和外源性信號因子。TREM1也是炎癥反應的上游因子，細菌和脂多糖均能夠促進TREM1表達水平增加，在膿毒癥中TREM1表達水平增加后可促進肺等組織和全身炎癥損傷[15-16]。本研究還發現，燒傷整形患者血清TLR4和TREM1表達水平呈正相關，與劉燕等[17]研究結果一致。已有研究[18]發現，Toll樣受體中各種配體亞型都能夠明顯上調TREM1表達水平，單核細胞TREM1與其抗體結合后在TLR4、TLR3等配體協同作用下放大促炎因子產生。

本研究進一步發現，增生性瘢痕、整形手術時間≥180 min、術區殘余創面、術后感染是影響燒傷整形患者血清TLR4和TREM1表達水平的獨立危險因素，抗菌藥物種類>2種是影響患者血清TLR4表達水平的獨立影響因素。增生性瘢痕是一種較為嚴重的皮膚纖維化疾病，其形成與免疫、遺傳、細胞凋亡等密切相關。有研究[19]發現，細菌感染和長時間炎癥反應在增生性瘢痕具有關鍵性作用。邱榮等[20]研究發現，燒傷患者增生性瘢痕組織中TLR4表達水平及IL-6、IL-8等炎性因子水平均顯著高于正常皮膚組織，且TLR4表達水平與炎性細胞因子水平間存在顯著的正相關性。燒傷創面及整形手術創面愈合過程中發生的炎癥反應可引起損傷皮膚組織代謝改變，在較長時間的炎性微環境下炎性因子持續表達，刺激TLR4和TREM1表達，進而引起成纖維細胞代謝異常，胞外基質蛋白過度沉積，最終引起增生性瘢痕[21]。

手術時間過長將造成創面長期暴露，提高了細菌侵入概率，增加了感染風險；術區創面有殘余時，容易滋生病原微生物，引起感染；圍手術期抗生素使用超過2種可能存在抗生素濫用，患者容易出現耐藥性，既無法取得良好的預防感染效果，還可能增加術后感染風險。對于燒傷整形患者，需要從以下幾方面減少炎癥反應和感染風險，以降低血清TLR4和TREM1表達水平，進而縮短炎癥反應持續時間：①術前做好準備，盡量縮短手術時間，避免創面長時間暴露，同時對手術室、器械進行嚴格消毒；②合理使用抗生素，一方面應通過病原菌鑒定和耐藥檢測針對性地選擇抗菌藥物，另一方面應盡量縮短用藥時間；③燒傷整形術前應對瘢痕褶皺和殘余創面進行徹底清潔，去除污垢和壞死組織，術后應認真檢查是否存在殘余創面。

綜上所述，血清TLR4和TREM1表達水平能夠反映燒傷整形患者全身炎癥程度，并與多種因素密切相關，應控制整形手術時間，提高創面愈合，預防術后感染，合理使用抗生素。但本研究未對燒傷整形患者TLR4和TREM1相互作用機制進行深入探討，且由于納入病例較少，結果可能存在一定偏倚，仍需進行大樣本量和基礎性研究來確定燒傷整形患者TLR4和TREM1表達水平的臨床應用價值及影響因素。