琥珀酸在哌柏西利片中的應用研究

錢進，霍立茹，*，張倩倩（.徐州醫科大學，江蘇 徐州 000；.南京濟群醫藥科技股份有限公司，南京 00）

哌柏西利片是治療乳腺癌晚期的主要藥物。其片劑因主藥含量大，可壓性及流動性不佳而較難制劑化，且主藥在pH 4.5介質中溶解度差而難以產業化，故需選用適宜的輔料進行制備[1-3]。琥珀酸常作為片劑的助溶劑、潤滑劑等，具有抗結塊、改善流動性及提高藥物穩定性和溶解度等作用。不同目數的琥珀酸具有不同特性，能夠從結合性、溶解性及穩定性等多方面影響片劑的質量，因此琥珀酸目數的篩選尤為重要。本試驗通過對比不同目數琥珀酸的主要功能性指標，分別制備處方研究其對哌柏西利片制備過程中物料流動性、可壓性及包衣片的溶出曲線、有關物質的影響，篩選出合適目數（粒徑范圍）的琥珀酸用于哌柏西利片的制備[4-6]。

1 材料

1.1 儀器

AL104型電子天平（Mettler Toledo），6S-OCEDM微量電子天平（Sartorius），U3000高效液相色譜儀（DIONEX），BM2000 顯微鏡（江南永新光學儀器有限公司），GL2-35 干法制粒機（張家港市開創機械制造有限公司），ZPS-8壓片機（上海信源制藥機械有限），S250SMART高速壓片機（山東新馬制藥裝備有限公司），三維混合機（南京銳霸科技有限公司），YD-35 硬度儀（天津市鑫洲科技有限公司），MB-35 水分測定儀（奧豪斯儀器有限公司），HELOS/BR-RODOS/T4 激光粒度測定儀（Sympatec），UV-2600 紫外分光光度計（日本島津），FADT-1202 自動取樣溶出儀（Focs），高效包衣機（深圳信宜特科技有限公司），藥品強光照射試驗箱（重慶永生實驗儀器廠），恒溫恒濕箱（施都凱儀器設備有限公司）。

1.2 試藥

哌柏西利片（輝瑞公司，批號：EW2912，規格：125 mg/片）；哌柏西利片（南京濟群醫藥科技股份有限公司，規格：125 mg/片，批號分別為210320、210402、210411、210422、210506-1/-2）；對照品哌柏西利（批號：20091201，純度：99.90%）、雜質A（批號：21416，純度：99.31%）、雜質B（批號：21446，純度：99.31%）（中國食品藥品檢定研究院）；琥珀酸（南京化學，批號：201030083C、201040091C、201030062C）；微晶纖維素（旭化成，批號：2624，型號：PH102）；羧甲基纖維素鈉（德國瑞登梅爾，批號：3201081037）；膠態二氧化硅（德國Evonik，批號：159011814）；硬脂酸鎂（湖州展望，批號：20200103）；薄膜包衣預混劑（上海卡樂康包衣技術有限公司）。

2 方法及結果

2.1 琥珀酸功能性指標測定

結合原料流動性及可壓性較差的性質并查閱產品介紹，選擇4種具有代表性的琥珀酸（30目、40目、60目、80目）進行考察，通過其相關指標特性進行篩選。

2.1.1 粒徑分布的測定 使用激光粒徑儀干法進樣測定琥珀酸的粒徑分布，分散壓力為4 bar，進樣速率70%，使用RAOXO 2.0 軟件對不同目數篩分的琥珀酸粒度分布進行分析，結果見圖1、表1。

圖1 琥珀酸粒度分布圖Fig 1 Particle size distribution of succinic acid

2.1.2 流動性的測定 測定琥珀酸的休止角以考察其流動性，具體方法為將漏斗固定于水平鐵架臺上，從漏斗中緩慢加入物料至物料圓錐體高度不再增加，量取物料垂直高度及圓錐體半徑，以物料垂直高度及圓錐半徑比為正切值計算休止角[7]，每批樣品測量 3 次取平均值，結果見表 1。

2.1.3 堆密度、振實密度及壓縮性指數 參照2020年版《中國藥典》（ChP2020）四部通則0993[8]，測定不同目數琥珀酸的堆密度及振實密度，根據公式壓縮性指數＝100×（堆密度－振實密度）/堆密度，計算壓縮性指數，結果見表 1，不同目數琥珀酸的各指標均存在一定差異，將其作為哌柏西利片組成成分，分別制備成制劑后進一步確定其影響片劑的關鍵指標及選擇最終的目數。

表1 琥珀酸功能性指標測定Tab 1 Functional indexes of succinic acid

2.2 制劑相關指標的測定

分別用目數為＞30、30～40、40～60、60～80的琥珀酸與原料、微晶纖維素、羧甲基纖維素鈉、膠態二氧化硅、硬脂酸鎂過篩后稱重混合，混合后物料進行干法制粒，樣品批號對應為 210320、210402、210411、210422，4 批樣品其他輔料種類、用量以及制備工藝均不變。

2.2.1 混粉相關指標的測定 ① 休止角的測定：取4批樣品混粉參照“2.1.2”項下方法測定休止角，每批樣品測量3次取平均值，結果見表 2。

② 壓縮性指數的測定：取4批樣品混粉參照“2.1.3”項下方法測定壓縮性指數，每批樣品測量3次取平均值，結果見表 2。

③ 顆粒率的測定：參照 ChP2020 四部通則0982單篩分法[8]測定 4批樣品預混粉60目以上的顆粒率，每批樣品測量3次，取平均值，結果見表2。使用60～80目的琥珀酸所制備的混粉休止角明顯大于45°，流動性較差，需關注其片劑含量均勻度是否符合要求。

表2 混粉相關指標的測定結果Tab 2 Related indexes of powder mixture

2.2.2 片芯相關指標的測定 將 4 批樣品在同一壓片環境及設備條件下分別壓片后進行片劑相關指標的考察。

① 外觀及斷層：在壓片過程中觀察各批樣品的外觀性狀及斷層現象。4 批樣品在實驗室壓片數量為 500 片左右時均未出現斷層現象，片劑片重穩定。繼續進一步放大批量（2000片）并使用工廠設備壓制片劑，考察壓片是否斷層，以確定處方工藝的可行性，結果見表 3及圖2。

圖2 片芯外觀（批號：210402）Fig 2 Core appearance（batch No.210402）

② 硬度的測定：每批樣品在連續壓片過程中隨機取樣20片使用 MB-35 硬度儀測量片芯硬度，結果見表 3。

③ 含量均勻度的測定：參照 ChP2020 四部通則含量均勻度檢查法[8]，每批樣品取10片片芯檢測樣品的含量均勻度，結果見表 3。60～80目琥珀酸流動性差，出現斷層，故而含量均勻度不合格；＞30目琥珀酸壓片時，硬度只有120 N，可壓性不好。因此下一步重點考察30～40目和40～60目琥珀酸所制制劑溶出曲線。

表3 片芯相關指標測定結果Tab 3 Related indexes of chip core

2.2.3 溶出曲線的測定

① 溶出試驗條件：溶出方法為槳法，分別以水、pH 1.0 鹽酸溶液、pH 4.5 醋酸鹽緩沖液、pH 6.8 磷酸鹽緩沖液為溶出介質，轉速均為 75 r·min－1，溶出介質體積均為 900 mL，溶出介質溫度均為（37±0.5）℃[9]。

② 溶液的配制：精密稱取哌柏西利片對照品約12 mg置100 mL 量瓶中，加入少量溶出介質超聲溶解并定容，再精密移取5 mL置50 mL量瓶中，加入溶出介質定容，得對照品溶液。分別于各取樣時間點取出溶液10 mL，并補充同等溫度的溶出介質10 mL，將所取樣品溶液過濾，取續濾液1 mL 用介質稀釋定容至10 mL作為供試品溶液。

③ 溶出曲線的測定：將210402 及210411批片芯均使用同一批薄膜包衣預混劑進行包衣，測定2批樣品包衣片及參比制劑（各12片）在4種介質中的溶出曲線，具體方法為取各對照品及供試品溶液，參照 ChP2020 四部通則0401紫外-可見分光光度法[8]在353 nm處測量吸光度，按外標法計算溶出量，繪制溶出曲線，計算相似因子f2[10]。

結果表明 2 批自制樣品在 pH 1.0、水、pH 6.8介質中的溶出曲線均與參比制劑相似，在pH 4.5中210402 批樣品溶出曲線與參比制劑相似，f2＞85，而210411批樣品溶出速率慢于參比制劑，f2只有61，故接下來對210402 批樣品進行影響因素試驗，考察初步穩定性。溶出曲線見圖3。

圖3 參比制劑與 2 批自制樣品在不同介質中的溶出曲線Fig 3 Dissolution curve of the reference preparation and 2 batches of self-made samples in different dissolution media

2.2.4 有關物質的測定

① 色譜條件：色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（250 mm×4.6 mm，5 μm）；柱溫為45℃；流速為 1.0 mL·min－1；進樣量為 20 μL；檢測波長為 250 nm；流動相A為0.03%三氟乙酸水，B為0.03%三氟乙酸乙腈；稀釋溶劑為0.1 mol·L－1HCl-乙腈（80∶20），梯度洗脫，洗脫程序如下：0～10 min，90%A；10～40 min，90%～70%A；40～65 min，70%～15%A；65～66 min，15%～90%A；66～75 min，90%A。

② 溶液的制備：取包衣片研磨后細粉50 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，超聲溶解，用稀釋溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液。取哌柏西利、雜質A、雜質B，精密稱定，用稀釋溶劑稀釋成每1 mL含哌柏西利0.5 mg及雜質A、雜質B各含5 μg的系統溶液。取各溶液進樣測定，各成分分離度符合藥典要求，見圖4。

圖4 系統溶液色譜圖Fig 4 Chromatogram of system solution

取 210402 批自制樣品及參比制劑進行影響因素試驗，將各樣品分別放置于高溫（60℃）、高濕（RH 92.5%）以及光照[（4500±500）lx]條件下于 5、10、30 d取樣檢測有關物質。結果表明自制樣品各雜質含量均不高于參比制劑，且雜質增長趨勢與參比制劑基本一致，結果見表 4。

表4 有關物質測定結果Tab 4 Related substances

2.3 不同批次琥珀酸（30～40目）主要功能性指標一致性考察

選用2批不同批號（批號：201030083C、201040091C）琥珀酸（30～40目）參照“2.1”及“2.2”項下方法測定主要功能性指標并制備樣品（批號分別為 210506-1、210506-2）進行研究，以考察不同批次輔料功能是否具有一致性，并確定不同批次輔料制備的樣品質量是否一致。結果表明，不同批次的琥珀酸（30～40目）主要功能性指標檢測結果及制劑相關檢測結果均無明顯差異，表明該輔料無明顯批間差異，制備的樣品質量基本一致（見表5～7及圖5）。

圖5 參比制劑與 2 批自制樣品在不同介質中的溶出曲線Fig 5 Dissolution curve of the reference preparation and 2 batches of self-made samples in different dissolution medium

表5 不同批次琥珀酸(30～40目)功能性指標測定結果Tab 5 Functional indexes of different batches of succinic acid (30～40 mesh)

3 討論

3.1 流動性

從流動性角度分析，不同目數的琥珀酸因粒徑大小差異導致流動性不同，從而影響制劑混粉的流動性。篩分得到60～80目的琥珀酸，粒徑小，批量放大后，壓片出現斷層，混粉流動性差，不適合進一步研究。小于60目的琥珀酸，粒徑較大，沒有出現斷層現象，適合進一步研究。

表6 不同批次琥珀酸(30～40目)制劑相關指標測定結果Tab 6 Related indexes of different batches of succinic acid (30～40 mesh) preparations

表7 有關物質測定結果Tab 7 Related substances

3.2 可壓性

從可壓性角度分析，＞30目的琥珀酸，粒徑大，批量放大壓片時，主壓片厚調至最小后，片芯硬度仍然只有120 N，達不到參比制劑的目標硬度（150～180 N）。故不適合進一步研究。

3.3 崩解特性

崩解特性角度分析，篩分得30～40目琥珀酸所制得制劑在區分力介質中（pH 4.5）崩解現象與參比制劑相似，在12 min左右崩解。但是40～60目琥珀酸所制得制劑在18 min左右崩解，且終點累計溶出度只有80%左右[5]。

綜上所述，琥珀酸（30～40目）不同批次樣品主要功能性指標檢測的結果基本一致，功能具有一致性，所制備的3 批哌柏西利混粉流動性、可壓性均較好，片劑溶出行為與參比制劑相似，產品質量與參比制劑一致，故適合作為哌柏西利的組成成分并進一步用于放大生產[11-12]。