MMP-3、Anti-CCP抗體、RF在類風濕關節炎患者中的表達及與免疫功能相關性

袁秀蘭

類風濕關節炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以滑膜炎和免疫功能紊亂為主要表現的自身免疫系統疾病，病因尚未明確[1]。患者可在發病2年內出現骨關節破壞，嚴重的可出現壞死甚至殘疾，嚴重影響患者正常生活[2]。臨床上針對RA的診斷主要依靠患者臨床體征、影像學檢查及血清學檢測等手段綜合考慮。由于患者臨床表現復雜多樣，加上缺乏特異性較強的有效指標，導致患者早期診斷不及時，錯過了最佳干預時機，影響了治療效果。因此，早期診斷、及時干預對RA患者提高治愈率十分重要。類風濕因子（rheumatoid factors，RF）的發現很大程度上提高了RA的診斷效率，但仍有部分患者血清中無法檢測到RF[3]。基質金屬蛋白酶 -3（matrix metalloproteinase 3，MMP-3）可以反映RA患者疾病的活動情況，在輕度活動期即可明顯上升[4]。抗環狀瓜氨酸（Anti-cyclic citrullinated peptide，Anti-CCP）抗體水平與RA患者血清中的多種炎癥因子密切相關，對炎癥反應起到促進作用[5]。本研究主要觀察MMP-3、Anti-CCP抗體、RF在RA患者中的水平變化，分析其與免疫功能的相關性，旨在為RA的診療工作提供參考依據，具體結果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性收集2021年1-12月在咸寧市第一人民醫院進行住院治療的RA患者105例作為觀察組，納入標準：（1）初次就診且符合文獻[6]《類風濕關節炎診療規范》中關于RA的診斷標準；（2）臨床資料完整，依從性高。排除標準：（1）合并其他免疫系統疾病；（2）既往有服用免疫抑制劑或者激素類藥物史；（3）合并惡性腫瘤；（4）重要臟器功能障礙；（5）精神疾病史。患者年齡30～70歲，平均（55.12±6.87）歲；其中男30例，女75例；根據28處關節疾病活動度（DAS28）評分進行分組，DAS28評分＜2.6分納入緩解組，共45例，DAS28評分≥2.6分納入活動組，共60例。同期收集體檢中心健康體檢者100例作為對照組，年齡30～70歲，平均（54.97±6.90）歲；其中男28例，女72例。兩組研究對象的一般資料進行比較，差異無統計學意義（P＞0.05），有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準通過。

1.2 方法

所有研究對象空腹抽取靜脈血3 ml，注入無添加劑促凝管中，靜置 30 min，以 3 000 r/min 的速度離心10 min，分離上層血清保存于-80 ℃超低溫冰箱中。MMP-3、Anti-CCP抗體采用酶聯免疫吸附的方法進行檢測，酶標儀為美國Biotek EXL-800酶標儀；RF采用貝克曼IMMAG800全自動生化分析儀及其配套試劑盒進行檢測。所有操作嚴格按照試劑盒說明書進行，室內質控、陰陽對照均在控。

1.3 觀察指標

觀察所有研究對象的血清MMP-3、Anti-CCP抗體、RF水平及免疫球蛋白IgA、IgM、IgG水平。比較各組研究對象的MMP-3、Anti-CCP抗體、RF水平，分析其對類風濕關節炎患者的診斷價值。比較類風濕關節炎患者活動組和緩解組MMP-3、Anti-CCP抗體、RF及免疫功能指標（IgA、IgM、IgG）水平差異，分析各指標間的相關性。

1.4 統計學處理

采用SPSS 21.0統計學軟件對所有數據進行分析，計量資料以（±s）來表示，組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。采用ROC曲線分析診斷效能，利用Pearson相關性分析各指標間的關系。

2 結果

2.1 觀察組和對照組MMP-3、Anti-CCP抗體、RF水平比較

觀察組患者MMP-3、Anti-CCP抗體、RF水平明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 觀察組和對照組MMP-3、Anti-CCP抗體、RF水平比較（±s）

表1 觀察組和對照組MMP-3、Anti-CCP抗體、RF水平比較（±s）

RF（IU/ml）組別 MMP-3（ng/ml）Anti-CCP抗體（U/ml）觀察組（n=105） 495.48±92.37 125.46±31.57 98.53±18.29對照組（n=100） 112.58±30.48 12.95±3.09 16.44±2.83 t值 40.83 36.06 39.81 P值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.2 MMP-3、Anti-CCP抗體、RF對類風濕關節炎患者的診斷價值

繪制MMP-3、Anti-CCP抗體、RF對類風濕關節炎患者的ROC曲線，結果顯示，聯合檢測的曲線下面積（AUC）為0.840，敏感度和特異度可達到82.0%、70.1%，均高于MMP-3或Anti-CCP抗體或RF單項檢測，進一步提高了診斷效能，見表2和圖1。

表2 MMP-3、Anti-CCP抗體、RF對類風濕關節炎的診斷價值

2.3 活動組和緩解組MMP-3、Anti-CCP抗體、RF及免疫功能指標比較

活動組患者的MMP-3、Anti-CCP抗體、RF及IgA、IgM、IgG水平明顯高于緩解組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 活動組和緩解組MMP-3、Anti-CCP抗體、RF及免疫功能指標比較（±s）

表3 活動組和緩解組MMP-3、Anti-CCP抗體、RF及免疫功能指標比較（±s）

組別 MMP-3（ng/ml） Anti-CCP抗體（U/ml） RF（IU/ml） IgA（g/L） IgM（g/L） IgG（g/L）活動組（n=60） 511.89±99.04 142.47±33.58 111.53±18.29 3.06±0.52 3.06±0.52 18.06±4.12緩解組（n=45） 473.59±87.97 102.78±29.07 81.44±2.83 2.28±0.36 2.00±0.31 14.89±3.24 t值 0.84 6.80 12.02 10.23 12.94 4.28 P 值 0.402 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.4 血清MMP-3、Anti-CCP抗體、RF水平與免疫功能相關性分析

根據Pearson相關性分析的結果顯示，MMP-3、Anti-CCP抗體、RF與IgA、IgM、IgG呈正相關（P＜0.05），見表4。

表4 血清MMP-3、Anti-CCP抗體、RF水平與免疫功能相關性分析

3 討論

類風濕關節炎是臨床上比較常見的一類自身免疫系統疾病，全世界發病率為0.5%～1.5%，我國發病率略低，約為0.42%[7]。RA主要表現為小關節損傷，患者早期多不出現明顯的關節畸形，因此臨床很難給予準確評估，從而造成漏診、誤診的發生，影響患者預后[8]。隨著對RA疾病研究的進一步深入，疾病早期的血清學標志物也逐漸成了研究的熱點。

基質金屬蛋白酶是導致關節損傷的因素之一，其介導的機制降解可破壞關節和軟骨，與炎癥因子的形成和血管周圍基質降解密切有關[9]。MMP-3是基質金屬蛋白酶家族的重要成員之一，由關節滑膜的成纖維細胞和軟骨細胞產生，在RA早期增生的滑膜向關節軟骨面生長并侵蝕關節軟骨，形成血管翳[10]。研究表明，RA患者處于炎癥狀態，炎癥因子會破壞軟骨及骨質，促進成纖維細胞分泌MMP-3，導致患者血清MMP-3水平升高[11]。Anti-CCP抗體是一種環狀聚絲蛋白的多肽片段，屬于自身抗體，對類風濕關節炎的診斷具有較高的敏感度，常用于RA的早期診斷[12]。RF是臨床上最早用于RA診斷的血清學標志物，其診斷陽性率可高達80.00%以上，但在其他結締組織疾病、感染性疾病中有會有所表達，因此其診斷RA的特異度也存在一定不足[13]。本次研究為RA的診斷篩選了MMP-3、Anti-CCP抗體、RF 3個有效指標，結果顯示這些指標在RA患者中均明顯更高（P＜0.O5），與上述理論研究的結論一致，可以推測這些指標參與了RA的發生、發展。進一步繪制ROC曲線發現，三者在RA疾病診斷上均具有一定的價值，3項聯合檢測可進一步提高診斷效能，對疾病早期診斷具有較高的價值。

近年來，有相關研究發現，RA疾病的發展與免疫失衡相關[14]。免疫球蛋白IgA、IgG、IgM是臨床常用的免疫功能指標，RA患者主要是由于體內的IgG發生了改變，刺激機體產生了相應的IgG抗體，RF因子與變性的IgG可形成免疫復合物，這種免疫復合物會在關節滑膜處積聚，激活補體從而導致慢性炎性損傷，導致類風濕關節炎的發生[15]。對RA患者根據DAS28評分分組后發現，活動組患者的MMP-3、Anti-CCP抗體、RF及IgA、IgM、IgG水平明顯高于緩解組（P＜0.05）。這在王曉亮等[15]的研究中也有體現，說明這些指標與疾病的進展密切相關。根據Pearson相關性分析的結果顯示MMP-3、Anti-CCP抗體、RF與IgA、IgM、IgG呈正相關（P＜0.05），再次印證了上述結果。

綜上所述，血清MMP-3、Anti-CCP抗體、RF在類風濕關節炎患者中明顯升高，且與患者免疫功能密切相關，聯合檢測有助于疾病的早期診斷。但本次研究屬于回顧性研究，可能存在一定選擇偏倚，待日后進行前瞻性設計、擴大樣本量來佐證此次研究的正確性。