山楂黃酮對(duì)斷奶仔豬生長性能、免疫和抗氧化能力的影響

趙倩明 ，魏元浩

（1.新疆奎屯市畜牧獸醫(yī)工作站，新疆 奎屯 833200，2.江蘇省揚(yáng)州市揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，江蘇 揚(yáng)州 225009）

抗生素殘留一直是困擾著養(yǎng)殖業(yè)的難題，威脅著肉類食品安全。中國在2020年全面禁止抗生素在飼料中使用，這使養(yǎng)殖業(yè)面臨著新挑戰(zhàn)。近年來植物活性物質(zhì)受到廣泛重視，尤其是中藥活性物質(zhì)，活性高，含量多，研究表明中藥提取物具有替代抗生素的潛力。山楂是中國特有的藥物和食品兼用品，具有多種活性物質(zhì)，包括黃酮類、原花青素、紅果酸、多糖和維生素C等。山楂味甘，能夠激發(fā)食欲，大山楂丸就是我國經(jīng)典藥方，具有促進(jìn)消化, 提高食欲的功能，研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)大山楂丸在動(dòng)物生產(chǎn)中有良好的利用前景。仔豬養(yǎng)殖是豬生產(chǎn)環(huán)節(jié)的重要一環(huán)，仔豬斷奶后容易引起斷奶應(yīng)激綜合癥，降低采食量，并引起腹瀉等問題，影響后續(xù)生長發(fā)育，飼料中抗生素禁用對(duì)仔豬養(yǎng)殖是一個(gè)巨大挑戰(zhàn)。山楂作為一味傳統(tǒng)中藥，具有提高動(dòng)物免疫和增強(qiáng)食欲的功能，而且山楂價(jià)格并不昂貴，具有替代抗生素的潛力。但山楂提取物在養(yǎng)殖中應(yīng)用較少，而且多以復(fù)方藥劑的形式添加，缺乏足夠的實(shí)例證明山楂在養(yǎng)殖中的價(jià)值，因此文章以自山楂中提取的山楂黃酮為試驗(yàn)材料，研究山楂黃酮在仔豬養(yǎng)殖中的作用。試驗(yàn)在斷奶仔豬日糧中添加不同劑量的山楂黃酮，探究山楂黃酮對(duì)斷奶仔豬生長性能、免疫能力、抗氧化能力的影響，為山楂及其相關(guān)活性物質(zhì)在斷奶仔豬上的利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

山楂黃酮從蘭州沃特萊斯生物科技有限公司購買獲得，揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院鑒定純度為60%。試驗(yàn)期間的斷奶仔豬及其飼料由新疆谷牧地農(nóng)牧科技有限公司養(yǎng)豬場提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

按照胎次、體重相近的原則，選取30日齡“杜長大”三元雜交斷奶仔豬40頭，公母各半。隨機(jī)分成4組，每組10頭。對(duì)照組：飼喂基礎(chǔ)日糧；試驗(yàn)Ⅰ組：基礎(chǔ)日糧+0.5%山楂黃酮；試驗(yàn)Ⅱ組：基礎(chǔ)日糧+1%山楂黃酮；試驗(yàn)Ⅲ組：基礎(chǔ)日糧+ 2%山楂黃酮。

1.3 試驗(yàn)飼養(yǎng)管理

場地提前消毒，仔豬自由采食、自由飲水，預(yù)飼期3 d，正飼期32 d。

1.4 測定指標(biāo)和方法

1.4.1 生長性能測定

試驗(yàn)的仔豬分別在試驗(yàn)期的第1天和最后1天上午8：00空腹稱重。每日稱量剩料量。按如下公式計(jì)算仔豬的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）及料重比（F/G）：

平均日增重（g/d）=（末重－初重）/試驗(yàn)天數(shù)

平均日采食量（g/d）=（總投料重－總余料重）/試驗(yàn)天數(shù)

料重比= 平均日采食量/平均日增重

1.4.2 血清免疫指標(biāo)、抗氧化指標(biāo)和肝臟抗氧化指標(biāo)測定

試驗(yàn)最后1天，對(duì)仔豬進(jìn)行靜脈采血，血液離心后取上清液在-20℃冰箱保存。采完血后的仔豬頸部放血致死，均取相同部位的肝臟樣品用液氮速凍保存。使用試劑盒（南京建成生物工程研究所）測定以下指標(biāo)。

血清免疫指標(biāo)：免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白 M（IgM）、免疫球蛋白 G（IgG）。

血清抗氧化指標(biāo)：總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）。

肝臟抗氧化指標(biāo)：總抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、丙二醛。

1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)先使用Excel 2019軟件整理，然后采用SPSS 19.0軟件的單因素方差分析法進(jìn)行分析，以P＜0.05為差異顯著。試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 山楂黃酮對(duì)生長性能的影響

從表1可知，試驗(yàn)Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組的末重、平均日增重、平均日采食量高于對(duì)照組。試驗(yàn)Ⅱ組的末重、平均日增重、平均日采食量顯著高于其余3組（P＜0.05），試驗(yàn)Ⅱ組的料重比低于其余3組，但無顯著差異。

表1 山楂黃酮對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響

2.2 山楂黃酮對(duì)血清免疫指標(biāo)的影響

由表2可知，試驗(yàn)Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組的IgA、IgG和IgM含量高于對(duì)照組，血清免疫球蛋白濃度隨著山楂黃酮濃度的增加而升高。試驗(yàn)Ⅲ組的IgA含量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），IgG和IgM含量顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ組（P＜0.05）。

表2 山楂黃酮對(duì)仔豬血清免疫指標(biāo)的影響 g/L

2.3 山楂黃酮對(duì)血液抗氧化能力的影響

由表3可知，試驗(yàn)組的SOD、GSH-Px、T-AOC含量高于對(duì)照組，且隨著山楂黃酮濃度增加而升高。試驗(yàn)Ⅲ組的SOD、GSH-Px含量顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ組（P＜0.05），T-AOC含量顯著高于其余3組。對(duì)照組的MDA含量顯著高于其余3組（P＜0.05），各試驗(yàn)組的MDA含量隨山楂黃酮濃度升高而降低。

表3 山楂黃酮對(duì)仔豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.4 山楂黃酮對(duì)肝臟抗氧化能力的影響

由表4可知，試驗(yàn)Ⅲ組的SOD顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ組（P＜ 0.05），GSH-Px含量顯著高于其余3組，MDA含量顯著低于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ組（P＜0.05）。隨著日糧山楂黃酮濃度升高，試驗(yàn)組的SOD、GSH-Px含量升高，MDA含量降低，試驗(yàn)組的SOD、GSH-Px含量均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），MDA含量顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。

表4 山楂黃酮對(duì)仔豬肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 山楂黃酮對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響

黃酮類化合物對(duì)動(dòng)物生長有重要的影響。研究表明，黃酮類化合物在動(dòng)物體內(nèi)發(fā)揮著雙重作用，不同劑量的黃酮類化合物決定了其在動(dòng)物體內(nèi)發(fā)揮積極或消極的作用。Cassidy研究發(fā)現(xiàn)，家禽日糧中添加10或20 mg/kg的大豆黃酮能夠顯著提高采食量。歐陽克惠在雛雞日糧添加了50、100、150 mg/kg的苜蓿黃酮，雛雞的采食量下降。王偉在小鼠日糧中添加高于120 mg/kg的苜蓿黃酮，小鼠的平均日增重呈下降趨勢。王夢竹等在綿羊日糧中添加100~400 mg/kg苜蓿黃酮，綿羊的生長性能無顯著變化，提高了氮利用率，有潛在的促生長功能。占今舜研究表明，泌乳奶牛日糧中添加100 g的苜蓿黃酮顯著提高了奶牛的采食量和產(chǎn)奶量。以上研究表明動(dòng)物的種類、添加量都會(huì)影響到黃酮發(fā)揮的效果。本研究發(fā)現(xiàn)山楂黃酮添加量為1%時(shí)效果最好，仔豬的生長性能各項(xiàng)指標(biāo)都顯著增加，但添加量達(dá)到2%時(shí)出現(xiàn)下降趨勢，這可能是山楂黃酮添加量超過了仔豬的適應(yīng)能力，仔豬的腸胃還未發(fā)育完全，不能適應(yīng)高劑量的山楂黃酮，導(dǎo)致山楂黃酮的促生長能力降低。因此，本研究得出結(jié)論，山楂黃酮能夠提高仔豬的生長性能，添加量為1%時(shí)效果最好。

3.2 山楂黃酮對(duì)斷奶仔豬血液免疫指標(biāo)的影響

仔豬在斷奶后由于缺乏來自母體的抗體補(bǔ)充，腸道也沒有完全發(fā)育，在采食飼料后極易產(chǎn)生腹瀉等問題，對(duì)仔豬后續(xù)生長產(chǎn)生了嚴(yán)重的影響。3種免疫球蛋白IgA、IgM、IgG的含量是衡量機(jī)體免疫的重要指標(biāo)。黃酮類化合物的藥理功能，能夠?qū)μ岣邫C(jī)體的免疫性能產(chǎn)生積極的作用。朱宇旌研究表明，小鼠采食苜蓿黃酮后，小鼠的免疫器官系數(shù)顯著上升，表明一定劑量的苜蓿黃酮可以改善小鼠的免疫功能。肉雞日糧中添加染木料黃酮，肉雞免疫器官指數(shù)增加，促進(jìn)了淋巴細(xì)胞的增殖。陳銀銀在揚(yáng)州鵝的日糧中添加苜蓿黃酮，發(fā)現(xiàn)添加量為300 mg/kg時(shí)顯著提高血清中IgG的含量。張琦琦研究發(fā)現(xiàn)，妊娠母豬日糧中添加大豆黃酮后，血清IgG的含量顯著升高。趙萌在斷奶仔豬中添加藤茶總黃酮，添加量為0.5%顯著提高了血清中IgG的含量，添加量為1%時(shí)，血清中IgG含量反而降低，研究表明，不同來源的黃酮類化合物對(duì)不同動(dòng)物的影響有很大差異，這可能是導(dǎo)致出現(xiàn)此差異的原因。本研究發(fā)現(xiàn)不同濃度的山楂黃酮都可以提高仔豬血清中IgA、IgM、IgG的含量，并且隨著山楂黃酮濃度增加，各項(xiàng)免疫球蛋白的含量增加，但在0.5%的添加量時(shí)IgA、IgG的含量并沒有顯著增加，這表明低濃度的山楂黃酮對(duì)提高仔豬免疫能力的效果并不好，這可能與山楂黃酮的藥用活性較低有關(guān)。山楂黃酮添加量達(dá)到1%及以上時(shí)，才能顯著提高仔豬的免疫能力。

3.3 山楂黃酮對(duì)斷奶仔豬抗氧化性能的影響

動(dòng)物體內(nèi)會(huì)不斷產(chǎn)生自由基，多數(shù)疾病都與過量自由基的產(chǎn)生有關(guān)聯(lián)。荊常亮發(fā)現(xiàn)苜蓿黃酮具有去除DPPH自由基、ABTS自由基和羥基自由基的效果。蘇效雙等研究表明75 μg/mL苜蓿黃酮能顯著促進(jìn)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖，提高抗氧化的能力。MDA是衡量動(dòng)物抗氧化能力的重要指標(biāo)，自由基積累后就會(huì)產(chǎn)生MDA，MDA會(huì)破壞細(xì)胞膜，使細(xì)胞解體，對(duì)機(jī)體造成損傷。Sihem研究表明隨著日糧中苜蓿黃酮添加量增加，生長期的肉兔血液中MDA含量持續(xù)下降。侯昆在奶牛日糧中添加竹葉黃酮，發(fā)現(xiàn)奶牛血清中MDA含量顯著下降，竹葉黃酮一定程度上能夠提高奶牛的抗氧化能力。SOD是生物體中抗氧化酶系的重要組成部分，通過催化超氧陰離子自由基歧化生成氧和過氧化氫，對(duì)維持生物體的氧化平衡起到重要作用。T-AOC是評(píng)估機(jī)體抗氧化能力的綜合指標(biāo)，從總體上體現(xiàn)機(jī)體的抗氧化能力。舒剛在肉雞日糧中添加竹葉黃酮，王鵬祖在肉雞日糧中添加沙棘葉黃酮，均發(fā)現(xiàn)隨著黃酮添加量增加，肉雞血清和各器官的T-AOC和SOD含量呈上升趨勢。本研究表明山楂黃酮顯著降低血清和肝臟中MDA含量，與前人研究一致。低濃度的山楂黃酮對(duì)血清抗氧化能力提高并不顯著，但顯著提高肝臟的抗氧化能力，表明山楂黃酮具有保護(hù)肝臟的潛力。山楂黃酮添加量超過1%后，可以顯著提高仔豬血清和肝臟的抗氧化能力。

4 結(jié)論

山楂黃酮能提高斷奶仔豬的生長性能，在添加量為1%時(shí)效果最好。山楂黃酮添加量高于1%時(shí)，能夠提高仔豬的免疫和抗氧化能力，山楂黃酮具有保護(hù)仔豬肝臟的潛力。