藍莓枸杞菊花復合飲料的研制

◎ 黃 成，羅汝鋒,2，羅 進,2，藍澤基，周靜儀，馬永富

（1.廣東一方制藥有限公司，廣東 佛山 528200；2.廣東省中藥配方顆粒企業重點實驗室，廣東 佛山 528200）

隨著時代的發展，生活節奏的加快，電子產品的普及，用眼過度、視力疲勞等眼睛健康問題在人們日常生活中越發凸顯。根據近期教育部發布的兒童青少年視力健康情況的相關數據可以發現，2020 年全國兒童青少年總體近視率為52.7%，且近視低齡化的趨勢越發突出，全國6 歲兒童平均近視率超過9%，局部地區高達19.1%[1]。因此，在日常生活中，健康用眼，科學護眼，顯得尤為重要。

枸杞子益精明目，富含胡蘿卜素、葉黃素、枸杞多糖、生物黃酮等生物活性成分，具有抗氧化性，對近視、視網膜損傷有一定的預防作用[2-3]。菊花平肝明目，含有豐富的黃酮類化合物、類胡蘿卜素、菊花多糖等活性成分，具有抗氧化、降血糖、保護眼部新生血管、保護視網膜光損傷等作用[4-5]。決明子清熱明目，其有效成分為橙黃決明素、大黃酚、決明內酯、大黃素蒽酮和決明子多糖等，具有保護視神經、抗炎、降血壓、降血脂等功效[6-7]。桑葉清肝明目，富含黃酮類化合物，具有清熱、涼血、明目的功效[8]。藍莓果實含有大量花色苷、原花青素等多酚類化合物，具有抗氧化、保護視力、預防心血管疾病、抗癌等作用[9-11]。

本試驗以枸杞子、菊花、決明子、桑葉為主要原料，根據中醫理論，配合茯苓、金銀花、桑椹等原料，輔以藍莓汁等物料，開發一種具有緩解視覺疲勞保健功能、酸甜可口的復合飲料，符合國內市場的需要，具有廣闊的市場前景。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 材料

枸杞子、菊花、決明子、茯苓、桑葉、金銀花和桑椹，廣東省藥材公司中藥飲片有限公司；藍莓汁（Brix 40%±3%），福建綠泉食品有限公司；三氯蔗糖（食品級），鹽城捷康三氯蔗糖制造有限公司；無水檸檬酸（食品級），日照金禾博源生化有限公司。

1.1.2 試劑

蘆 丁 標 準 品（ 純 度91.7%，批 號100080-201811），中國食品藥品檢定研究院；氯仿（分析純），廣東廣試試劑科技有限公司；氫氧化鈉（分析純），國藥集團化學試劑有限公司；無水乙醇（分析純），天津市永大化學試劑有限公司。

1.2 儀器與設備

液體真空濃縮煎藥機（YZN-50）：北京東華原醫療設備有限責任公司；數顯糖度計（CNT-95）：杭州陸恒生物科技有限公司；臺式低速離心機（TDL-4000C）：上海安亭科學儀器廠；管式超高溫殺菌機（HP-UHT-20）：上海浩朋機電科技有限公司；紫外可見分光光度計（UV-2450）：蘇州島津儀器有限公司；十萬分之一天平（XS105DU），梅特勒-托利多。

1.3 方法

1.3.1 藍莓枸杞菊花復合飲料工藝流程

枸杞子、菊花、決明子、茯苓、桑葉、金銀花和桑椹7 味藥材→藥材前處理→加水提取→過濾→濾液→合并濾液→濃縮→澄清→調配（加入藍莓汁、三氯蔗糖、檸檬酸、純凈水）→均質→滅菌→罐裝→成品。

1.3.2 操作要點

（1）原料要求。挑選優質的枸杞子、菊花、決明子、茯苓、桑葉、金銀花和桑椹等藥食同源原料，無發霉、變質、長蟲，無肉眼可見外來異物，符合《中國藥典》一部相關藥材項下質量要求。

（2）藥材前處理。枸杞子、菊花、茯苓、桑葉、金銀花和桑椹揀選除去雜質；決明子，揀選除去雜質，用文火加熱炒至微鼓起、偶有開裂，有香氣，取出，放涼。

（3）澄清。藥材濃縮液過250 目篩網，冷卻至室溫后放置4 ℃冰箱中靜置沉降3 ～4 h，置離心機中，3 000 r·min-1離心20 min，再取上層澄清液，作為藥材提取原液。

（4）均質。將調配好的飲料，用均質機進行均質處理，均質壓力為25 MPa。

（5）滅菌。均質后的飲料，用管式超高溫殺菌機進行滅菌處理，滅菌溫度140 ℃，滅菌時間15 s。

1.3.3 評分標準

（1）藥材提取出膏率測定及評分標準。精密吸取藥材提取原液10.0 mL 至已恒重的蒸發皿中，水浴蒸干得干浸膏，稱重W，按照干燥失重法（《中國藥典》2020 年版四部 通則0831）105 ℃干燥至恒重，計算出膏率及出膏率得分，公式如下：

式中：A為出膏率，即每100 g 藥材中含有的干浸膏質量，g/100 g；W為10 mL 藥材提取原液中干浸膏質量，g；V為藥材提取原液總體積，mL；Wt為投料藥材重量，g。

（2）藥材提取總黃酮含量測定及評分標準。①對照品溶液制備。精密吸取濃度為150 μg·mL-1的蘆丁標準溶液0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL 和4.0 mL，分別移入10 mL 比色管中，加入30%乙醇溶液至5 mL，各加5%亞硝酸鈉溶液0.3 mL，振搖后放置5min，加入10%硝酸鋁溶液0.3 mL，搖勻后放置1 h，加入 1.0 mol·L-1氫氧化鈉溶液2 mL，用30%乙醇溶液定容至刻度，以零管為空白，搖勻后用1 cm 的比色皿，在510 nm 處測定吸光度，繪制蘆丁含量（μg）與吸光度的標準曲線，得線性回歸方程Y=1.459 5X-0.034 872 8，R2=0.999 55，說明蘆丁濃度在0.007 5 ～0.060 0 mg·mL-1具有較好的線性關系。②樣品溶液制備。精密吸取樣品溶液3 mL，定容至50 mL，用氯仿萃取脫脂，收集下層水溶液定容至50 mL，取2 mL，用裝有聚酰胺樹脂粉末的柱子吸附，然后用70%的乙醇溶液洗脫，收集10 mL 溶液，然后用70%乙醇定容至25 mL，其他步驟同上，計算總黃酮含量、總黃酮提取率及總黃酮提取率得分，公式如下：

式中：X為樣品總黃酮含量，g/100 g（mL）；m1為依據標準曲線計算出被測液中黃酮質量，μg；m為試樣的質量或體積，g 或mL；V1為待測液分取的體積，mL；V2為待測液的總體積，mL。

（3）藥材提取原液感官評價標準如表1，提取感官得分計算公式如下：

表1 藥材提取原液感官評分表

（4）藥材提取正交試驗綜合評分標準。綜合評分=出膏率得分+提取感官得分+總黃酮提取率得分。

1.4 藥材提取條件確定

1.4.1 藥材提取單因素試驗

固定提取溫度100 ℃，提取時間1.5 h，料水比分別選擇1 ∶4、1 ∶6、1 ∶8、1 ∶10 和1 ∶12（g ∶mL），考察料水比對出膏率和總黃酮提取率的影響；固定提取溫度100 ℃，料水比1 ∶10（g ∶mL），提取時間分別選擇0.5 h，1.0 h、1.5 h、2.0 h 和2.5 h，考察提取時間對出膏率和總黃酮提取率的影響；固定提取時間1.5 h，料水比1 ∶10（g ∶mL），提取溫度分別選擇60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃和100 ℃，考察提取溫度對出膏率和總黃酮提取率的影響。

1.4.2 藥材提取條件正交試驗

在單因素試驗的基礎上，選用料水比、提取時間、提取溫度3個因素，3種不同水平，進行L9(34)正交試驗，藥材提取工藝條件正交試驗因素水平見表2。

表2 藥材提取正交試驗設計表

1.5 復合植物飲料的配制

取上述藥材提取原液，輔助藍莓濃縮汁、三氯蔗糖、檸檬酸等原輔料，復合調配飲料。

2 結果與分析

2.1 藥材提取單因素試驗結果與分析

2.1.1 料水比對出膏率和總黃酮提取率的影響

如圖1、圖2 結果所示，隨著料水比的不斷增加，藥材提取的出膏率和總黃酮提取率也明顯增加，當料水比達到1 ∶12（g ∶mL）后，藥材提取的出膏率和總黃酮提取率增加幅度趨于平緩，其原因可能是隨著料水比的增加，使內外滲透壓趨近穩定，可溶性成分的傳質擴散趨于穩定狀態，隨著提取溶劑的增加，可溶性成分溶出量較少。因此，結合成本考慮，料水比選擇1 ∶10 ～1 ∶14（g ∶mL）進行下一步工藝優化。

圖1 料水比對出膏率的影響圖

2.1.2 提取時間對出膏率和總黃酮提取率的影響

如圖3、圖4 結果所示，提取時間在0.5 ～2.0 h 時，隨著提取時間的增加，藥材提取出膏率和總黃酮提取率均快速增加，當提取時間大于2.0 h 后，藥材提取出膏率的增加幅度趨于平緩，總黃酮提取率則有所下降，原因可能是隨著提取時間的增加，溶劑中的可溶性成分溶出已達相對平衡狀態，而提取時間過長，部分熱敏性的黃酮類化合物水解，從而降低了總黃酮提取率。因此，提取時間選擇1.5 ～2.5 h 進行下一步工藝優化。

2.1.3 提取溫度對出膏率和總黃酮提取率的影響

如圖5、圖6 結果所示，隨著溫度的提高，藥材提取的出膏率和總黃酮的提取率均快速增加，說明提取溫度的升高，有利于藥材提取出膏率和總黃酮提取率的提升。

圖6 提取溫度對總黃酮提取率的影響圖

但是王蔚新等[12]研究表明，桑葉及金銀花等藥材在較高的溫度下，容易產生苦味成分，影響產品的感官質量。因此，選擇提取溫度80 ～100 ℃進行下一步優化實驗。

2.2 藥材提取正交試驗結果與分析

由表3 可知，影響藥材提取綜合評分的各因素主次順序為A＞B＞C，最優提取組合為A3B2C3，即料水比為1 ∶14（g ∶mL），提取時間為2.0 h，提取溫度100 ℃。由表4 方差分析結果可知，料水比對藥材提取綜合得分有極顯著的影響（P＜0.01），提取溫度和提取時間對藥材提取綜合得分則無顯著的影響。

表3 藥材提取正交試驗結果表

表4 藥材提取正交試驗結果方差分析表

2.3 提取正交試驗結果驗證

按正交試驗篩選的工藝條件進行3 次確認試驗，即料水比1 ∶14（g ∶mL），提取時間2.0 h，提取溫度100 ℃。在該提取條件下，藥材提取綜合得分為98.75±0.31 分，與原正交試驗結果相比相差不大，說明該工藝穩定、重復性較好。

2.4 復合植物飲品結果與分析

通過對藥材提取原液、藍莓濃縮汁、三氯蔗糖、檸檬酸和純凈水等原輔料進行復配調試，篩選出口感較佳的配比為藥材提取原液添加量13.3%，藍莓濃縮汁添加量為0.50%，三氯蔗糖添加量為0.013%，檸檬酸添加量為0.05%，純凈水添加量86.137%，按照此工藝和配方做出來的復合飲料呈淺橘紅色，澄清透亮，具有藍莓和菊花的香味，酸甜可口。

3 結論

通過對枸杞子、菊花、決明子、茯苓、桑葉、金銀花和桑椹7 味藥材進行提取單因素試驗和正交試驗，對藥材提取原液的提取出膏率、感官評分以及總黃酮的提取率進行綜合評分，得到最佳工藝的藥材提取工藝為料水比1 ∶14（g ∶mL）、提取時間2.0 h、 提取溫度100 ℃。通過對藥材提取原液、藍莓濃縮汁、三氯蔗糖、檸檬酸和純凈水等原輔料進行復配調試，篩選出口感較佳的配比為藥材提取原液添加量13.3%，藍莓濃縮汁添加量0.50%，三氯蔗糖添加量0.013%，檸檬酸添加量0.05%，純凈水添加量86.137%，按照此工藝和配方做出來的復合飲料呈淺橘紅色，澄清透亮，具有藍莓和菊花的香味，酸甜可口。