lncRNA TUG1對人牙髓干細胞成骨/成牙本質分化的影響

人牙髓干細胞（human dental pulp stem cells，hDPSCs）源自于遷移的神經嵴細胞，于2000 年首次從人牙髓中分離和鑒定，具有高度增殖、自我更新和多向分化等間充質干細胞的特性

。其取材方便、易于擴增保存、活性高，能在特定條件下分化為多種組織細胞，是干細胞治療中極有潛力的細胞來源

，在再生醫學領域中具有廣闊的應用前景。牛磺酸上調基因1（taurine upregulated 1，TUG1）是一種長鏈非編碼RNA，位于第22 號染色體上，最早由學者Young 等

從小鼠視網膜細胞中發現，被認為是視網膜細胞發育和光感受器形成的重要參與者。有學者發現TUG1 可促進骨髓間充質干細胞

以及牙周膜細胞

成骨向分化。但TUG1在hDPSCs的增殖及成骨/成牙本質向分化過程中的表達水平和功能作用尚未見報道。本研究旨在通過感染慢病毒構建沉默TUG1 的hDPSCs，探究TUG1對hDPSCs 的增殖及成骨/成牙本質分化的影響。

1 材料和方法

1.1 主要材料和儀器

α-MEM 培養基（Procell，中國），青霉素-鏈霉素、胰酶細胞消化液、堿性磷酸酶（alkaline phospha-tase，ALP）顯色試劑盒（Beyotime，中國），胎牛血清（vivacell，意大利），地塞米松、維生素C、茜素紅染色液（Solarbio，中國），β-甘油磷酸鈉（Macklin，中國），Ⅰ型膠原酶（Biofroxx，德國），CD44、CD45、CD73、CD90、CD133、STRO-1 抗體（Ebioscience，美國），甘油醛-3-磷酸脫氫酶（glyceraldehyde-3-phos-phate dehydrogenase，GAPDH）抗體（Abcam，英國），兔抗人DPSS 抗體（Abcam，英國），兔抗人DMP-1抗體（Abcam，英國），兔抗人Runx2 抗體（Abcam，英國），兔抗人OCN 抗體（Abcam，英國），兔抗人OPN抗體（Abcam，英國），山羊抗兔二抗（Proteintech，美國），4%多聚甲醛（Biosharp，中國），CCK-8 試劑盒（Dojindo，日本），氯化十六烷吡啶（Sloarbio，中國），BCA 蛋白濃度測定試劑盒（Beyotime，中國），ALP測定試劑盒（南京建成，中國），SteadyPure 快速RNA 提取試劑盒、Evo M-MLV 反轉錄預混型試劑盒、SYBR Green Pro Taq HS 預 混 型qPCR 試 劑 盒（Accurate，中國）。

1.2 hDPSCs 的分離培養和鑒定

本研究已取得西南醫科大學附屬口腔醫院倫理委員會批準（批號：20220531002）。……