葡萄炭疽病防治藥劑的篩選和殘留安全性評價*

馬桂梅，普繼雄，孫秀梅，馬澤輝，楊躍明，張俊祥

（1 彌勒市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，云南652399）（2 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所）

葡萄炭疽病主要由膠孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）引起，在我國葡萄產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生[1-2]。葡萄炭疽病菌主要為害近成熟期的葡萄果實，引起果粒腐爛[3]。在云南省彌勒市，葡萄炭疽病發(fā)病率20%～30%，受害葡萄失去商品價值，嚴(yán)重影響彌勒市葡萄產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。葡萄炭疽病通常以化學(xué)藥劑防治為主，化學(xué)藥劑的長期使用導(dǎo)致葡萄炭疽病菌產(chǎn)生了抗藥性[4-7]。因此，篩選高效、低毒、低殘留農(nóng)藥，指導(dǎo)葡萄炭疽病防治尤為重要。本研究選取17 種藥劑對葡萄炭疽病菌的室內(nèi)毒力進(jìn)行了測定，在此基礎(chǔ)上開展了田間防效評價和殘留安全性評價，旨在為葡萄炭疽病的防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

葡萄炭疽病菌菌株S1，分離于云南省彌勒市一果園的葡萄果實（品種為水晶葡萄），保存于中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所果樹植物保護(hù)研究中心。

1.2 供試藥劑

50%多菌靈可濕性粉劑，由蘇農(nóng)（廣德）生物科技有限公司生產(chǎn)；80%代森錳鋅可濕性粉劑，由湖南農(nóng)大海特農(nóng)化有限公司生產(chǎn)；430 g/L 戊唑醇懸浮劑，由天津華宇農(nóng)藥有限公司生產(chǎn)；20%吡噻菌胺懸浮劑，由日本三井化學(xué)AGRO 株式會社生產(chǎn)；41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑，由拜爾作物科學(xué)（中國）有限公司生產(chǎn)；43%腐霉利懸浮劑，由日本住友化學(xué)株式會社生產(chǎn)；450 g/L 咪鮮胺水劑，由天津市施普樂農(nóng)藥技術(shù)發(fā)展有限公司生產(chǎn)；40%嘧霉胺懸浮劑，由陜西上格之路生物科學(xué)有限公司生產(chǎn)；240 g/L 噻呋酰胺懸浮劑，由河北冠龍農(nóng)化有限公司生產(chǎn)；200 g/L 氯氟醚吡唑酯懸浮劑+200 g/L 吡唑醚菌酯懸浮劑，由巴斯夫歐洲公司生產(chǎn)；25%乙嘧酚懸浮劑，由江西禾益化工股份有限公司生產(chǎn)；50%啶酰菌胺水分散粒劑，由巴斯夫歐洲公司生產(chǎn)；250 g/L 嘧菌酯懸浮劑，由先正達(dá)南通作物保護(hù)有限公司生產(chǎn)；40%雙胍三辛烷基苯磺酸鹽可濕性粉劑，由日本曹達(dá)株式會社生產(chǎn)；25%吡唑醚菌酯懸浮劑，由山東康喬生物科技有限公司生產(chǎn)；22.5%啶氧菌酯懸浮劑，由美國杜邦公司生產(chǎn)；25%苯醚甲環(huán)唑懸浮劑，由深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司生產(chǎn)。

1.3 葡萄炭疽病菌室內(nèi)藥劑篩選

根據(jù)每種農(nóng)藥使用濃度的不同，配置相應(yīng)的3個濃度梯度（表1）的含藥PDA 平板。采用菌絲生長速率法[8]測定17 種供試藥劑對葡萄病原菌的抑制活性。將葡萄炭疽病菌菌株S1 接種到PDA 培養(yǎng)基上，置于溫度26 ℃恒溫培養(yǎng)箱、黑暗培養(yǎng)5 d 后，挑取少量菌絲成團(tuán)狀（直徑約1 mm），分別接種到含藥的PDA 平板上，以無藥PDA 平板為對照。每個處理重復(fù)4 次，置于溫度26 ℃恒溫培養(yǎng)5 d，待對照組菌落長滿平板時，用十字交叉法測量各處理的菌落直徑，計算菌絲生長抑制率。

抑制率（%）=［（空白對照菌落直徑-藥劑處理菌落直徑）/空白對照菌落直徑］×100

1.4 田間藥效試驗

1.4.1 試驗地條件

試驗于2021 年6—7 月在云南省彌勒市彌陽街道章保社區(qū)章保村一葡萄園（東經(jīng)103°25′59″、北緯24°21′57″）進(jìn)行。試驗地葡萄品種為水晶葡萄，露地栽培，土壤為黏壤土，管理水平中等。

1.4.2 試驗設(shè)計

試驗共設(shè)7 個處理（表2），以清水為對照，每個處理重復(fù)3 次，試驗小區(qū)24 m2，隨機(jī)排列。2021年6 月25 日第1 次施藥（未見病果），7 月5 日第2次施藥。施藥器械為背負(fù)式電動噴霧器（東田3WBD-15L 型），噴孔直徑0.8 mm，工作壓力0.25～0.40 MPa。噴霧時葉片正反面均勻著藥、濕潤為止。

1.4.3 調(diào)查時間和方法

按照《農(nóng)藥田間藥效試驗準(zhǔn)則 第13 部分：殺菌劑防治葡萄炭疽病》（NY/T 1464.13—2007）進(jìn)行調(diào)查。調(diào)查方法為每小區(qū)隨機(jī)選取不同部位果穗20個，調(diào)查記錄每個果穗的總果粒數(shù)和病果粒數(shù)。

病果率（%）=（病果粒數(shù)/總果粒數(shù)）×100

防治效果（%）=［（空白對照區(qū)施藥后病果率-藥劑處理區(qū)施藥后病果率）/空白對照區(qū)施藥后病果率］×100

1.5 農(nóng)藥殘留安全性評價

從各試驗小區(qū)隨機(jī)摘取0.5 kg 新鮮葡萄果粒，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所農(nóng)業(yè)農(nóng)村部果品及苗木質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心完成農(nóng)藥殘留量檢測，具體參照《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）進(jìn)行。測定結(jié)果與葡萄中相應(yīng)藥劑最大殘留限量進(jìn)行比較，若測定值小于或等于最大殘留限量，則判定農(nóng)藥殘留符合國家食品安全標(biāo)準(zhǔn)。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計方法

試驗數(shù)據(jù)采用DPS 7.05軟件進(jìn)行統(tǒng)計與差異顯著性分析[9]。

2 結(jié)果與分析

2.1 葡萄炭疽菌的室內(nèi)藥劑篩選

由表1 可知，在17 種供試藥劑中，80%代森錳鋅可濕性粉劑、430 g/L 戊唑醇懸浮劑、20%吡噻菌胺懸浮劑、450 g/L 咪鮮胺水劑和25%苯醚甲環(huán)唑懸浮劑各濃度對葡萄炭疽菌的抑菌效果均較好，菌絲生長抑制率均在86%以上。其中，80%代森錳鋅可濕性粉劑500 倍液對菌絲生長抑制率高達(dá)95.6%。而50%啶酰菌胺水分散粒劑、240 g/L 噻呋酰胺懸浮劑、50%多菌靈可濕性粉劑各濃度對葡萄炭疽菌的抑菌效果均較差，菌絲生長抑制率均在34%以下。

表1 17 種供試藥劑對葡萄炭疽病病原菌菌絲生長的影響

續(xù)表1

2.2 田間藥效試驗結(jié)果

田間防效試驗結(jié)果（表2）表明，第2 次施藥后7 d，80%代森錳鋅可濕性粉劑500 倍液、430 g/L 戊唑醇懸浮劑2 000 倍液、20%吡噻菌胺懸浮劑1 500倍液、450 g/L 咪鮮胺水劑1 200 倍液、25%苯醚甲環(huán)唑懸浮劑1 000 倍液的防治效果分別為86.8%、85.8%、88.7%、93.4%和89.6%，均極顯著高于對照藥劑50%多菌靈可濕性粉劑500 倍液的防效（55.7%）。第2 次施藥后14 d，450 g/L 咪鮮胺水劑1 200 倍液防效達(dá)93.7%，防治效果最好。80%代森錳鋅可濕性粉劑500倍液和430 g/L戊唑醇懸浮劑2 000 倍液的防效無顯著性差異，防效在88%以上。20%吡噻菌胺懸浮劑1 500 倍液和25%苯醚甲環(huán)唑懸浮劑1 000 倍液也均表現(xiàn)出較好的防效，防效在86%以上。

表2 6 種藥劑防治葡萄炭疽病田間藥效試驗結(jié)果

2.3 農(nóng)藥殘留安全性評價

農(nóng)藥殘留分析結(jié)果表明（表3），在果實成熟前期田間施藥2 次后，根據(jù)我國《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）有關(guān)檢測方法和規(guī)定，因吡噻菌胺在葡萄上尚沒有制定相應(yīng)的最大殘留限量而無法作出評價外，其他藥劑（代森錳鋅、戊唑醇、咪鮮胺、苯醚甲環(huán)唑）及對照藥劑（多菌靈）殘留實測值均低于國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的最大殘留限量，符合國家食品安全標(biāo)準(zhǔn)。

表3 供試藥劑使用劑量處理后的葡萄農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果

3 結(jié)論與討論

通過對17種藥劑的室內(nèi)生物活性測定和5種藥劑田間應(yīng)用試驗結(jié)果分析得出，咪鮮胺在葡萄炭疽病防治中表現(xiàn)出較高的防治效果，可作為葡萄炭疽病防治的首選藥劑。此外，代森錳鋅、吡噻菌胺、戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑也表現(xiàn)較好的防治效果，可以作為葡萄炭疽病防治的備選藥劑或輪換使用藥劑。這5 種藥劑均對葡萄生長無不良影響，藥劑殘留實測值均低于國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的最大殘留限量，符合國家食品安全標(biāo)準(zhǔn)，建議在生產(chǎn)中推廣使用。

在葡萄近成熟時，除了防治葡萄炭疽病外，尚需對葡萄白腐病和葡萄灰霉病進(jìn)行防治。本研究結(jié)果所推薦的藥劑中，戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑可以兼防葡萄白腐病[10-11]，吡噻菌胺可以兼防葡萄灰霉病[12]和葡萄白粉病[13]，而代森錳鋅作為一種保護(hù)性殺菌劑對葡萄白腐病和葡萄灰霉病均具有良好的預(yù)防效果[14-15]。因此，本研究結(jié)果為葡萄炭疽病、葡萄灰霉病和葡萄白腐病兼防兼治提供了理論依據(jù)。