1～3 d天新生兒高敏肌鈣蛋白I參考區(qū)間的建立研究

袁善彬，曹 瑩△，張 鵬，仇 菊，于海洋，趙雨陽

(北京市密云區(qū)婦幼保健院：1.檢驗科;2.兒科,北京 101500)

肌鈣蛋白(Tn)是肌肉組織收縮的調(diào)節(jié)蛋白，位于收縮蛋白的細肌絲上，在肌肉收縮和舒張過程中起著重要的調(diào)節(jié)作用。心肌Tn僅存在于心肌細胞中，是由TnT、TnI、TnC 3種亞單位組成的復(fù)合物。超敏TnI(hsTnI)是心肌細胞特有的抗原，當心肌細胞受損時會從心肌纖維上降解下來，血清hsTnI水平升高可反映心肌細胞損傷程度[1]。新生兒在分娩過程中經(jīng)常會發(fā)生宮內(nèi)窘迫、新生兒窒息等缺氧現(xiàn)象,導(dǎo)致心肌損傷，血清hsTnI診斷窒息性心肌損傷的特異性為95.5%[2]。當新生兒發(fā)生心肌損害時，血清hsTnI升高程度能反映心肌細胞損傷程度，其特異性與敏感性均高于常用的心肌酶譜，是國際上最新指南推薦的檢測心肌損傷和診斷急性心肌梗死的“金標準”[3-4]。目前，我國有關(guān)部門尚未發(fā)布1～3 d新生兒血清hsTNI的參考區(qū)間。本研究旨在建立北京市密云區(qū)1～3 d新生兒血清hsTnI的參考區(qū)間，為臨床提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性選取2020-2021年本院分娩篩查的新生兒257例，其中男125例，女132例。孕母納入標準[5]:(1)孕期無性傳播疾病及家族疾病史，未感染弓形蟲、風(fēng)疹病毒、巨細胞病毒及單純皰疹病毒；(2)無妊娠期疾病，如糖尿病、甲狀腺功能減退癥、高血壓；(3)肝功能檢測正常、無消化道出血及其他消化道疾病；(4)無先天性疾病；(5)無各種腫瘤疾病；(6)近期未接受輸血治療。新生兒納入標準：(1)出生體重2.5～4.0 kg；(2)胎齡在37～42周，日齡1～3 d；(3)臍帶、羊水、胎盤無異常，無宮內(nèi)窘迫及出生后窒息史；(4)阿氏評分在9分及以上；(5)出生后常規(guī)接種卡介苗和首劑乙肝疫苗，體格檢查無異常。新生兒排除標準：(1)外周血白細胞數(shù)<6.0×109/L或>30×109/L，C反應(yīng)蛋白水平大于8 mg/L，血紅蛋白水平小于100 g/L；(2)血清樣本膽紅素水平大于400 μmol/L，血清清蛋白水平小于25 g/L，血糖水平大于或等于7.0 mmol/L，三酰甘油水平大于或等于10.0 mmol/L，血清肌酐水平大于150 μmol/L。新生兒心肌損傷診斷標準：(1)有明確圍產(chǎn)期缺氧或窒息病史,阿氏評分小于7分；(2)表現(xiàn)出心音低純、面色發(fā)白、心動過緩、心力衰竭等心肌損傷特征；(3)血清肌酸激酶水平大于600 U/L、肌酸激酶同工酶MB水平大于40 U/L。本研究已獲本院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核通過。

1.2方法 新生兒采血前空腹3～6 h，于上午8:00-10:00經(jīng)橈動脈采血2 mL,置促凝劑真空管中，離心，剔除溶血、脂血，2 h內(nèi)用BECKMAN DXI800儀器檢測。分析系統(tǒng)性能評估：每次室內(nèi)質(zhì)控兩水平均在控時檢測樣本,所有試驗嚴格按照儀器和檢測試劑盒標準操作規(guī)程進行操作，檢測方法和檢測結(jié)果具有計量學(xué)溯源性。分組判斷：對性別、日齡行Z檢驗，將不需分組的參考值合并，確定實際參考樣品組。參考區(qū)間驗證：隨機選取1～3 d不同性別健康新生兒各20例，不超過2例新生兒檢查結(jié)果落在所驗證的參考區(qū)間外，則可基本認為該參考區(qū)間適用；如果有3例及以上的觀測值落在參考區(qū)間外，則表示該參考區(qū)間不適用。

2 結(jié) 果

2.1不同性別新生兒一般資料比較 不同性別新生兒一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 不同性別新生兒一般資料比較

2.2不同日齡、不同性別新生兒血清hsTnI水平比較 1～3 d新生兒血清hsTnI水平依次為21.60(12.60，30.60)、19.88(9.12，30.63)、24.96(15.60，34.32) pg/mL，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。不同日齡新生兒中，不同性別新生兒血清hsTnI水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 不同日齡、不同性別新生兒血清hsTnI水平比較[M(P25，P75),U/L]

2.31～3 d新生兒血清hsTnI水平參考區(qū)間建立及驗證 1～3 d新生兒血清hsTnI水平參考區(qū)間為7～48 pg/mL。收集1～3 d的20例健康新生兒和20例心肌損傷新生兒進行驗證，全部驗證通過，其中20例健康新生兒hsTnI水平為14～40 pg/mL,20例心肌損傷新生兒hsTnI水平為63～173 pg/mL。20例心肌損傷新生兒中，男、女各10例，分娩時有明確圍產(chǎn)期窒息病史,阿氏評分小于7分，有心音低純、面色發(fā)白臨床表現(xiàn)，血清肌酸激酶水平為(984±118)U/L，肌酸激酶同工酶MB水平為(83.85±10.00)U/L。經(jīng)過臨床討論，7～48 pg/mL的參考區(qū)間適用于本地區(qū)1～3 d新生兒。

3 討 論

hsTn是一種調(diào)節(jié)心肌收縮的蛋白質(zhì)分子，當心肌細胞損傷時，Tn很快被釋放入血液并持續(xù)升高，且在血液中存在時間較長，有較好的反映心臟損傷的特異性。與早期標志物如肌紅蛋白、肌酸激酶同工酶MB等比較，心肌Tn具有較高靈敏度和特異度，并成為目前臨床診斷心肌梗死和急性冠狀動脈綜合征危險分層的主要依據(jù)之一。新生兒出生后0～9個月內(nèi)的hsTnI在心臟中表達，當心肌細胞壞死、凋亡、更新、細胞膜通透性改變時，hsTnI以單體和復(fù)合物等多種形式釋放到外周血。hsTnI是心肌損傷的重要生物標志物[6]。新生兒圍產(chǎn)期感染、缺氧、缺血及酸中毒狀態(tài)下常伴不同程度的心肌受損，hsTnI會在心肌受損3～6 h開始釋放，10～24 h達到高峰，hsTnI升高結(jié)合臨床缺血證據(jù)有助于新生兒的心肌損傷及心肌梗死的早期診斷和治療[7]。最近的研究表明，對于早期心血管疾病形成患者，hsTnI檢測對心肌損害、敗血癥、心肌炎、慢性阻塞性肺疾病等的診斷和治療有重要意義[8-10]。hsTnI也是新生兒缺氧缺血性腦病的新生物標志物[11]。有研究顯示，新生兒Tn水平顯著高于成年人，因此不能參考成年人hsTnI水平的參考區(qū)間[12]。目前，我國尚未發(fā)布新生兒血清hsTnI水平參考區(qū)間，因此建立新生兒血清hsTnI參考區(qū)間有十分重要的意義。本研究結(jié)果顯示，1～3 d新生兒血清hsTnI水平參考區(qū)間為7～48 pg/mL，高于檢測設(shè)備提供商提供的參考區(qū)間(男性為0～19.8 pg/mL、女性為0～11.6 pg/mL)，并高于文獻[13]報道的7.4～14.9 pg/mL。本研究建立的參考區(qū)間與文獻[14](新生兒出生72 h內(nèi)hsTnI水平為48.5 pg/mL)及文獻[15](新生兒血清hsTnI參考區(qū)間為12.85～44.0 pg/mL)報道的基本一致。

綜上所述，本地區(qū)1～3 d新生兒血清hsTnI水平參考區(qū)間可設(shè)定為7～48 pg/mL。1～3 d新生兒由于生理特點等因素，其血清hsTnI水平參考區(qū)間與成年人相差較大，采用成年人的參考區(qū)間容易誤診，貽誤病情。因此，建立1～3 d新生兒血清hsTnI水平參考區(qū)間十分必要。