獼猴桃組織培養繁殖苗木

劉永利

（朝陽縣臺子鎮林業站，遼寧 朝陽 122625）

獼猴桃的繁殖方式多種多樣，有實生繁殖、嫁接繁殖、扦插繁殖等。這3種方式比較常見且容易操作，需要的硬件條件也不高。組織培養雖然相對要復雜一些，上手難度較大，但是如果遇到不能量產的稀有品種，采用此種方法卻能夠取得巨大的效果，所以了解其過程以及繁殖方法十分必要。

表1 常用消毒滅菌劑及效果比較

從理論上講，植物的每一個細胞都具有成長為一個完整植株的功能。因此，植物組織培養是一種十分重要的繁殖技術。

獼猴桃組織也同其他植物組織一樣，具有無限增殖和產生不定芽及不定根的能力，在適宜的培養條件下，用一部分組織可以培養出許多植株，并能保持原有植物的種性，特別是對于數量稀少的優良品種和砧木，采用組織培養來進行工廠化育苗具有重要意義。

1 材料及材料消毒

1.1 材料

組織培養的材料可以選用獼猴桃的莖段、莖尖、腋芽、葉片、葉梗、下胚軸、胚乳、幼胚、原生質體等。在國外也有用根、果實組織（幼果果皮附近的組織）作接種材料的。常用的組織培養材料為獼猴桃莖段、莖尖和腋芽。

1.2 滅菌消毒

因各個器官組織的特性不同，需要無菌操作所用消毒藥品、濃度，具體操作方法、處理時間等也有所差異。常用消毒滅菌劑有多種，效果不盡相同，在實踐中應根據材料摸索試驗，采用既能達到消毒滅菌目的，又不損傷材料的藥劑。

2 基本培養基

基本培養基為MS培養基，但培養材料不同，其組分也有所變化。蔗糖和瓊脂的用量可根據不同需要進行調整，培養基的酸堿度調至pH5.8。配好培養基，分裝于玻璃容器內，在120℃高壓蒸氣下滅菌30分鐘后備用。

圖1 繼代培養切莖

3 外植體接種與培養

外植體選取健壯的當年生嫩枝上的莖段、莖尖或腋芽。將外植體用自來水沖洗2小時，用75%乙醇漂30秒鐘，用0.1%氯化汞溶液滅菌5～8分鐘，倒凈滅菌液，用無菌水沖洗3～4次。如果是莖段接種，則用消毒解剖刀刮去表皮，露出綠色皮層，再縱劈成2～4片，并剪成0.5～1.0厘米長的小段，小段不能帶有節部，接種在試管中的培養基上，每管2～4小段（試管為30毫米×160毫米）。

表2 MS培養基的基本組分 毫克/升

如果是莖尖或腋芽培養，每個試管的培養基上接種一個芽。莖尖應剝去毛被及葉片，留下黃綠色帶有1～2個葉原基的小葉片作培養材料。

上述外植體接種的基本培養基為MS，蔗糖濃度2%，pH5.8，添加玉米素0.1～30毫克/升、6-BA（6-芐基腺嘌呤）0.1～5毫克/升、IBA（吲哚丁酸）0.1～5毫克/升和NAA（萘乙酸）0.1～5毫克/升。接種后將試管放在培養室的培養架上，培養溫度25±1℃，光強度1000勒克斯，每日照光12小時。

4 繼代培養

外植體培養一周后會產生愈傷組織，一個月可見到分化出來的小植株。待莖長到1～3厘米，即可進行繼代培養。采用切斷法，將其剪成約1厘米長莖段，接種到新的培養基中。以后每隔約30天進行一次繼代培養，每次的莖段增殖量為3～4倍。反復進行，直到所需繁殖數量。根據成都生物所的試驗，待試管苗伸長到4～5厘米時進行剪切，每次切成4段，每隔60天切一次，一年可切6次，即1個芽的繁殖系數為4的6次方，即4096株。

5 誘導生根

試管內繼代培養的小植株長到2厘米左右時，從基部切下，用吲哚丁酸（IBA）20～30毫克/升液浸泡2小時，再轉接在生根培養基上誘導生根。生根培養基的成分為MS培養基的大量元素減半，包括激素和蔗糖也要減半，其他成分不變。轉接生根培養時，要防止葉片接觸培養基，以利生根。經培養10天左右，在基部切口即可產生不定根，20天左右成為真根，變成完整幼苗。待植株長到3～5厘米，則可進行鍛煉、移栽。

6 鍛煉與移栽

組培苗是在嚴格的人工操控條件下長成的，對自然生態環境條件下能否適應，還需要一個過渡階段，這個過渡階段就是鍛煉。方法是，將試管苗轉移到較大的容器中培養，使小苗生長健壯；或將有苗的試管移到自然光照下2～3天，打開試管口2～3天，使試管苗得到鍛煉，然后移栽。

試管苗移栽時先用30℃左右溫水，洗凈苗上的瓊脂等培養基，再移入溫室栽植，不要直接移入露地栽植，因成活率很低。溫室保持20～25℃的溫度，95%的空氣相對濕度，土壤為腐殖土或人工配制的營養土。溫室中生長80天左右，葉可長到8片以上，株高6厘米以上，新根數量500條以上，長17厘米以上。然后再移栽到露地苗圃，成活率極高。

7 結語

獼猴桃的實生繁殖、嫁接繁殖、扦插繁殖與組織培養繁殖等4種繁殖方法，是目前中國和其他國家普遍采用的繁殖方法。除此之外，還有其他繁殖方法，如利用枝蔓進行壓條繁殖，包括地面壓條和空中壓條；利用根際萌蘗進行分株繁殖。這兩種繁殖技術因為繁殖率低，不便操作，因此不常采用。